Kako zatvoriti PCR ploču

Uvod

PCR ploče, osnovna djelatnost laboratorija dugi niz godina, postaju još prisutniji u modernom okruženju kako laboratoriji povećavaju svoj protok i sve više koriste automatizaciju unutar svojih radnih procesa. Postizanje ovih ciljeva uz očuvanje točnosti i integriteta eksperimenata može biti teško. Jedno od uobičajenih područja gdje se mogu pojaviti pogreške je brtvljenjePCR ploče, s lošom tehnikom koja omogućuje isparavanje uzoraka, mijenja pH i time poremećuje enzimske funkcije i potiče kontaminaciju. Učenje kako zatvoritiPCR pločaispravno uklanja te rizike i osigurava ponovljive rezultate.

Pronađite pravi pečat za svoju PCR ploču

Poklopci ploča u odnosu na folijske brtve u odnosu na poklopce
Kapicedobar su način za čvrsto zatvaranje tanjura, a istovremeno vam daju fleksibilnost da vrlo lako otvorite i ponovno zatvorite tanjur po potrebi bez ikakvog otpada. Međutim, čepovi imaju nekoliko ključnih nedostataka.

Prvo, morat ćete kupiti određeni kompatibilni poklopac, što ih čini ne svestranim. Morat ćete se uvjeriti da odabrani poklopac odgovara ploči, što ovisi o proizvođaču, i odabrati kupolasti ili ravni oblik ovisno o termocikleru koji koristite.

Drugo, stavljanje čepova na ploču može biti vrlo repetitivno i zamorno, s rizikom unakrsne kontaminacije ako stavite pogrešan čep na pogrešnu jažicu.

Iako su folije za brtve manje fleksibilne u smislu uklanjanja i zamjene, vrlo su svestrane jer odgovaraju bilo kojoj vrsti PCR ploče, bez obzira na proizvođača. Mogu se jednostavno rezati na veličinu, što ih čini vrlo učinkovitima.

Druga mogućnost je pločasti poklopac. On nudi manju zaštitu od čepova i brtvi te se uglavnom koristi samo za kratkotrajno pokrivanje kako bi se spriječila kontaminacija.

Optičke i folijske brtve

Trebate li optički, prozirni pečat ilialuminijska folijaZatvaranje ploče ovisi o vašem eksperimentalnom formatu.Optičke folije za brtvljenjeProzirni su kako biste mogli promatrati uzorke, a istovremeno ih štite i sprječavaju isparavanje. Također su posebno korisni u qPCR eksperimentima koji uključuju vrlo precizna mjerenja fluorescencije izravno s ploče, u kojem slučaju će vam trebati folija za brtvljenje koja filtrira što je moguće manje fluorescencije. Važno je osigurati da pečat ili poklopac koji koristite ima dovoljno visoku razinu optičke jasnoće kako bi se osigurala točnost očitanja.

Folije su prikladne za sve uzorke koji su osjetljivi na svjetlost ili se čuvaju na temperaturi ispod 80°C. Iz tog razloga, većina uzoraka namijenjenih dugotrajnom skladištenju zahtijevat će foliju. Folije se također mogu probušiti, što je korisno za ispitivanje pojedinačnih jažica ili za prijenos uzoraka iglama. To se može dogoditi ručno ili kao dio robotske platforme.

Također uzmite u obzir da agresivne tvari koje uključuju kiseline, baze ili otapala zahtijevaju brtvu koja ih može izdržati, u kojem slučaju je folijska brtva vjerojatno prikladnija.

Ljepljiva folija u odnosu na foliju za toplinsko brtvljenje
Ljepljive folije za brtvljenjeVrlo su jednostavni i lako se nanose. Sve što trebate učiniti je da korisnik nanese brtvu na ploču i pomoću jednostavnog aplikatora pritisne i formira čvrstu brtvu.

Toplinsko brtvljenje je naprednije i pruža dugotrajnije brtvljenje sa smanjenom stopom isparavanja u usporedbi s konvencionalnim ljepljivim brtvljenjem. Ova je opcija prikladna ako želite dugoročno pohranjivati ​​uzorke, iako to dolazi s dodatnim zahtjevom za opremu za brtvljenje ploča.

Kako zatvoriti PCR ploču

Metoda brtvljenja ploča

Samoljepljivo

1. Pazite da radite na ravnoj i stabilnoj radnoj površini

2. Izvadite foliju iz pakiranja i uklonite zaštitnu foliju

3. Pažljivo postavite foliju na ploču, pazeći da su sve jažice pokrivene.

4. Pomoću aplikatora primijenite pritisak na ploču. Počnite od jednog kraja i ravnomjerno pritiskajte prema drugom.

5. Ponovite ovo više puta

6. Prođite aplikatorom oko vanjskih udubljenja kako biste bili sigurni da su i ona pravilno zatvorena.

Toplinska brtvila

Toplinsko brtvljenje funkcionira tako da se film rastopi na rubu svake jažice uz pomoć uređaja za brtvljenje ploča. Za rukovanje uređajem za toplinsko brtvljenje, pogledajte upute proizvođača opreme. Provjerite je li proizvođač od kojeg nabavljate opremu ugledan, jer je vrlo važno da je brtvljenje ispravno, učinkovito i vodonepropusno.

Vrhovi za brtvljenje ploča

a. Prilikom pritiskanja na brtvu, pritiskajte u horizontalnom i vertikalnom smjeru kako biste osigurali pravilno brtvljenje

b. Uvijek je dobra praksa provesti probni rad onoga što radite, a to nije drugačije i kod zatvaranja ploča. Testirajte s praznom pločom prije upotrebe one s uzorcima.

c. Prilikom testiranja, skinite pečat i provjerite je li ljepilo pravilno zalijepljeno, bez praznina. Vizualni prikaz toga nalazi se u prvom referentnom dokumentu. Ako niste pravilno zatvorili ploču, kada uklonite pečat, ostat će praznine gdje se ljepilo nije u potpunosti zalijepilo za ploču.

d. Za otpremu i transport uzoraka, možda će vam biti korisno postaviti plastični pečat preko folije za dodatnu zaštitu (posebno od probijanja).

e. Uvijek pazite da nema neravnina ili nabora prilikom nanošenja folije – to će uzrokovati curenje i isparavanje