पीसीआर प्लेट को कैसे सील करें

परिचय

पीसीआर प्लेटेंप्रयोगशालाओं में कई वर्षों से इस्तेमाल की जाने वाली तकनीकें आधुनिक परिवेश में और भी अधिक प्रचलित होती जा रही हैं, क्योंकि प्रयोगशालाएं अपने कार्यप्रवाह को बढ़ा रही हैं और अपने वर्कफ़्लो में स्वचालन को तेज़ी से अपना रही हैं। प्रयोगों की सटीकता और अखंडता को बनाए रखते हुए इन उद्देश्यों को प्राप्त करना मुश्किल हो सकता है। एक आम क्षेत्र जहाँ त्रुटियाँ आ सकती हैं, वह है सीलिंग के साथपीसीआर प्लेटेंखराब तकनीक के कारण नमूनों का वाष्पीकरण हो जाता है, पीएच बदल जाता है और इसलिए एंजाइमेटिक कार्य बाधित हो जाते हैं, और संदूषण को आमंत्रित किया जाता है।पीसीआर प्लेटइन जोखिमों को सही ढंग से समाप्त करता है और पुनरुत्पादनीय परिणाम सुनिश्चित करता है।

अपनी पीसीआर प्लेट के लिए सही सील खोजें

प्लेट कैप्स बनाम फिल्म सील बनाम ढक्कन
कैप्सअपनी प्लेट को कसकर सील करने का यह एक अच्छा तरीका है, साथ ही आपको बिना किसी बर्बादी के प्लेट को आसानी से खोलने और फिर से सील करने की सुविधा भी देता है। हालाँकि, कैप्स में कुछ मुख्य कमियाँ हैं।

सबसे पहले, आपको वह विशिष्ट कैप खरीदनी होगी जो संगत हो, जो उन्हें बहुमुखी नहीं बनाता है। आपको यह सुनिश्चित करना होगा कि आपके द्वारा चुनी गई कैप प्लेट पर फिट हो, जो इसके निर्माता पर निर्भर करता है, और आप जिस थर्मोसाइक्लर का उपयोग कर रहे हैं उसके आधार पर गुंबददार या सपाट कैप चुनें।

दूसरा, प्लेट पर ढक्कन लगाना बहुत ही दोहरावपूर्ण और थकाऊ काम हो सकता है, और यदि आप गलत ढक्कन को गलत कुँए पर लगा देते हैं तो इससे क्रॉस-संदूषण का खतरा हो सकता है।

जबकि फिल्म सील हटाने और बदलने के मामले में कम लचीले होते हैं, वे बहुत बहुमुखी होते हैं क्योंकि वे किसी भी प्रकार की पीसीआर प्लेट पर फिट हो जाएंगे, निर्माता कौन है इसकी परवाह किए बिना। उन्हें आसानी से आकार में काटा जा सकता है, जिससे वे बहुत प्रभावी हो जाते हैं।

दूसरा विकल्प प्लेट ढक्कन है। ये ढक्कन और सील की तुलना में कम सुरक्षा प्रदान करते हैं, और मुख्य रूप से संदूषण को रोकने के लिए केवल अल्पकालिक कवर के लिए उपयोग किए जाते हैं।

ऑप्टिकल बनाम फ़ॉइल फ़िल्म सील

चाहे आपको ऑप्टिकल, स्पष्ट सील याएल्यूमीनियम पन्नी फिल्मआपकी प्लेट को सील करने का तरीका आपके प्रयोगात्मक प्रारूप द्वारा तय किया जाता है।ऑप्टिकल सीलिंग फिल्मेंपारदर्शी होते हैं जिससे आप नमूनों का निरीक्षण कर सकते हैं, जबकि अभी भी उन्हें सुरक्षित रखते हैं और वाष्पीकरण को रोकते हैं। वे qPCR प्रयोगों में भी विशेष रूप से उपयोगी होते हैं जिसमें प्लेट से सीधे प्रतिदीप्ति के अत्यधिक सटीक माप करना शामिल होता है, इस मामले में आपको एक सीलिंग फिल्म की आवश्यकता होगी जो जितना संभव हो उतना कम प्रतिदीप्ति को फ़िल्टर करे। यह सुनिश्चित करना महत्वपूर्ण है कि आप जिस सील या कैप का उपयोग कर रहे हैं, उसमें ऑप्टिकल स्पष्टता का पर्याप्त स्तर हो ताकि रीडिंग सटीक हो।

फ़ॉइल फ़िल्में उन सभी नमूनों के लिए उपयुक्त हैं जो प्रकाश के प्रति संवेदनशील हैं या जिन्हें 80 डिग्री सेल्सियस से कम तापमान पर संग्रहीत किया जाना है। इस कारण से, लंबे समय तक भंडारण के लिए निर्धारित अधिकांश नमूनों को फ़ॉइल फ़िल्म की आवश्यकता होगी। फ़ॉइल फ़िल्में छेदने योग्य भी होती हैं, जो व्यक्तिगत कुओं की जांच करने या सुइयों द्वारा नमूनों के स्थानांतरण के लिए उपयोगी होती हैं। यह मैन्युअल रूप से या रोबोटिक प्लेटफ़ॉर्म के हिस्से के रूप में किया जा सकता है।

यह भी ध्यान रखें कि आक्रामक पदार्थों जैसे अम्ल, क्षार या विलायक के लिए ऐसी सील की आवश्यकता होगी जो उनका सामना कर सके, ऐसे में पन्नी वाली सील अधिक उपयुक्त होगी।

चिपकने वाला बनाम हीट सीलिंग फिल्म
चिपकने वाली फिल्म सीलबहुत ही सीधे-सादे और लगाने में आसान हैं। आपको बस इतना करना है कि उपयोगकर्ता प्लेट पर सील लगाए, और एक साधारण एप्लीकेटर टूल का उपयोग करके नीचे दबाकर एक टाइट सील बनाए।

हीट सील अधिक उन्नत हैं, जो पारंपरिक चिपकने वाली सील की तुलना में लंबे समय तक चलने वाली सील प्रदान करते हैं जिसमें वाष्पीकरण दर कम होती है। यदि आप लंबे समय तक नमूनों को संग्रहीत करना चाहते हैं तो यह विकल्प उपयुक्त है, हालांकि इसके लिए प्लेट सीलिंग उपकरण की अतिरिक्त आवश्यकता होती है।

पीसीआर प्लेट को कैसे सील करें

प्लेट सीलिंग विधि

स्वयं चिपकने वाला

1. सुनिश्चित करें कि आप समतल और स्थिर कार्यस्थल पर काम कर रहे हैं

2. फिल्म को उसकी पैकेजिंग से निकालें, और बैकिंग हटाएँ

3. सील को प्लेट पर सावधानी से रखें, यह सुनिश्चित करते हुए कि सभी कुएँ ढके हुए हों

4. प्लेट पर दबाव डालने के लिए एप्लीकेटर टूल का इस्तेमाल करें। एक सिरे से शुरू करें और दूसरे सिरे तक समान रूप से दबाव डालते हुए आगे बढ़ें

5. इसे कई बार दोहराएं

6. अपने एप्लिकेटर को बाहरी छिद्रों पर चलाकर सुनिश्चित करें कि ये भी ठीक से सील हो गए हैं।

हीट सील्स

हीट सील प्लेट सीलर की मदद से प्रत्येक वेल के रिम पर फिल्म को पिघलाकर काम करते हैं। हीट सीलर को संचालित करने के लिए, उपकरण के निर्माता द्वारा दिए गए निर्देशों को देखें। सुनिश्चित करें कि आप जिस निर्माता से अपना उपकरण खरीदते हैं वह प्रतिष्ठित है, क्योंकि यह बहुत महत्वपूर्ण है कि सील उचित, प्रभावी और जलरोधी हो।

प्लेट सीलिंग के शीर्ष सुझाव

क. सील पर दबाव डालते समय, उचित सील सुनिश्चित करने के लिए क्षैतिज और ऊर्ध्वाधर दोनों दिशाओं में दबाव डालें

ख. आप जो भी कर रहे हैं, उसका परीक्षण करना हमेशा अच्छा अभ्यास है, और प्लेट सीलिंग के मामले में भी यह अलग नहीं है। नमूनों के साथ उपयोग करने से पहले खाली प्लेट के साथ परीक्षण करें।

सी. परीक्षण करते समय, सील को हटाएँ और देखें कि चिपकने वाला पदार्थ ठीक से चिपका हुआ है या नहीं, और उसमें कोई गैप नहीं है। पहले संदर्भ दस्तावेज़ में इसका एक दृश्य प्रतिनिधित्व है। यदि आपने प्लेट को ठीक से सील नहीं किया है, तो जब आप सील हटाएँगे तो वहाँ गैप होंगे जहाँ चिपकने वाला पदार्थ प्लेट से पूरी तरह से नहीं जुड़ा होगा।

घ. नमूनों की शिपिंग और परिवहन के लिए, आपको अतिरिक्त सुरक्षा (विशेष रूप से छेदन से) के लिए फ़ॉइल सील के ऊपर प्लास्टिक सील लगाना उपयोगी लग सकता है।

ई. फिल्म लगाते समय हमेशा सुनिश्चित करें कि कोई धक्के या झुर्रियाँ न हों - इनसे रिसाव और वाष्पीकरण हो सकता है