Η μικροπιπέτα είναι ίσως το πιο χρησιμοποιούμενο εργαλείο στο εργαστήριο. Χρησιμοποιείται από επιστήμονες σε ένα ευρύ φάσμα τομέων, συμπεριλαμβανομένων των ακαδημαϊκών ιδρυμάτων, των νοσοκομείων και των εγκληματολογικών εργαστηρίων, καθώς και στην ανάπτυξη φαρμάκων και εμβολίων για τη μεταφορά ακριβών, πολύ μικρών ποσοτήτων υγρού.
Ενώ μπορεί να είναι ενοχλητικό και απογοητευτικό να εντοπίζετε φυσαλίδες αέρα στην άκρη της πιπέτας μιας χρήσης, εάν δεν εντοπιστούν ή αγνοηθούν, μπορεί να έχει τεράστιο αντίκτυπο στην αξιοπιστία και την αναπαραγωγιμότητα των αποτελεσμάτων.
Τα καλά νέα είναι ότι υπάρχουν μερικά απλά μέτρα που μπορείτε να λάβετε για να αποτρέψετε τις φυσαλίδες αέρα και να βελτιώσετε την αποτελεσματικότητα του εργαστηρίου, την ικανοποίηση του χειριστή, καθώς και την ακρίβεια και την πιστότητα των αποτελεσμάτων.
Παρακάτω, εξετάζουμε τις συνέπειες της εμφάνισης φυσαλίδας αέρα στην άκρη της πιπέτας σας και τι πρέπει να κάνετε στη συνέχεια.
Η συνέπεια των φυσαλίδων στοΆκρο πιπέτας
Ακόμα κι αν χρησιμοποιείτε τις πιο ακριβείς, κορυφαίες, καλοσυντηρημένες, σέρβις και βαθμονομημένες πιπέτες, η αξιοπιστία των αποτελεσμάτων σας μπορεί να επηρεαστεί από εργαστηριακά σφάλματα. Όταν εισέρχονται φυσαλίδες στοάκρομπορεί να έχει πολλά αποτελέσματα.
● Όταν ο χρήστης εντοπίσει τη φυσαλίδα αέρα, πρέπει να αφιερώσει χρόνο για να διανείμει κατάλληλα το αναρροφημένο υγρό, να εξαγάγει το ρύγχος και να ξεκινήσει ξανά τη διαδικασία.
● Οι μη ανιχνευμένες φυσαλίδες αέρα μπορεί να οδηγήσουν σε μεταφορά χαμηλού όγκου, αλλοιώνοντας έτσι τη συγκέντρωση των μειγμάτων αντίδρασης, οδηγώντας σε αποτυχημένα πειράματα και αμφισβητήσιμα ή αναξιόπιστα αποτελέσματα.
Αυτά τα αποτελέσματα μπορούν να έχουν διάφορες συνέπειες (1).
● Μειωμένη Απόδοση Εργαστηρίου – Οι δοκιμές και οι αναλύσεις θα πρέπει να επαναλαμβάνονται, με αποτέλεσμα το κόστος εργασίας και υλικών, το οποίο μπορεί να είναι αρκετά σημαντικό.
● Αμφισβητούμενα ή Λανθασμένα Αποτελέσματα Εξετάσεων – Εάν δημοσιευτούν λανθασμένα αποτελέσματα, μπορεί να υπάρξουν πιο σοβαρές συνέπειες, όπως λανθασμένη διάγνωση και κακή έκβαση των ασθενών.
● Ανάκληση Χειρογράφων από Περιοδικά – Εάν οι συνάδελφοι δεν καταφέρουν να αναπαράγουν τα αποτελέσματά σας λόγω φυσαλίδων αέρα που προκαλούν ανακριβή αποτελέσματα, οι εργασίες ενδέχεται να αποσυρθούν.
Βέλτιστες πρακτικές για την πρόληψη των φυσαλίδων αέρα
Στην πλειονότητα των περιπτώσεων, οι φυσαλίδες αέρα στις άκρες των πιπετών προκαλούνται από λάθος του χειριστή. Η κακή τεχνική λόγω ανεπαρκούς εκπαίδευσης ή κόπωσης είναι συνήθως το υποκείμενο πρόβλημα.
Η πιπέτα είναι μια εξειδικευμένη διαδικασία που απαιτεί 110% προσοχή, κατάλληλη εκπαίδευση και εξάσκηση για την επίτευξη συνεπών και ακριβών αποτελεσμάτων.
Ενώ υπάρχουν πολλά πράγματα που μπορείτε να κάνετε για να μειώσετε τα γενικά σφάλματα πιπέτας, παρακάτω έχουμε επισημάνει ορισμένες βέλτιστες πρακτικές που μπορούν να εφαρμοστούν για την αποφυγή φυσαλίδων αέρα.άκρες πιπέτας.
Βελτίωση της τεχνικής χρήστη
Πιπέτα αργά
Εάν το έμβολο απελευθερωθεί πολύ γρήγορα κατά την αναρρόφηση, μπορεί να εισαχθούν φυσαλίδες αέρα στην άκρη. Αυτό μπορεί να είναι ιδιαίτερα προβληματικό κατά τη μεταφορά παχύρρευστων υγρών. Παρόμοιο αποτέλεσμα μπορεί να προκύψει εάν το έμβολο απελευθερωθεί πολύ γρήγορα μετά τη χορήγηση.
Για να αποφύγετε τις φυσαλίδες αέρα κατά την αναρρόφηση, φροντίστε να χειρίζεστε το έμβολο των χειροκίνητων πιπετών με ομαλό και κανονικό τρόπο, ασκώντας σταθερή δύναμη.
Χρησιμοποιήστε το σωστό βάθος βύθισης
Η μη εμβάπτιση της άκρης της πιπέτας αρκετά βαθιά κάτω από τον μηνίσκο της δεξαμενής υγρού μπορεί να οδηγήσει σε αναρρόφηση αέρα και, κατά συνέπεια, σε σχηματισμό φυσαλίδων.
Ωστόσο, η εμβάπτιση της άκρης πολύ βαθιά μπορεί να αναρροφήσει περισσότερο υγρό λόγω αυξημένης πίεσης ή σταγονίδια μπορεί να εμφανιστούν στο εξωτερικό της άκρης, επομένως είναι σημαντικό να βυθίσετε τηνάκρη πιπέταςστο σωστό βάθος.
Το συνιστώμενο βάθος ποικίλλει ανάλογα με το μέγεθος, τον τύπο και τη μάρκα της πιπέτας. Ενώ θα πρέπει να ακολουθούνται οι συστάσεις του κατασκευαστή, ακολουθεί ένας γενικός οδηγός που παρέχεται από το Εθνικό Εργαστήριο Φυσικής.
Οδηγός για το βάθος βύθισης της άκρης
Όγκος πιπέτας (µl) και βάθος εμβάπτισης (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Προ-ΥγρόΆκρες πιπέτας
Κατά την αναρρόφηση με πιπέτα όγκων μεγαλύτερων από 10µlάκρες πιπέταςσυνήθως προ-υγραίνονται γεμίζοντάς τα αρκετές φορές με το υγρό που διανέμεται και αποβάλλοντάς το προς τα άχρηστα για βελτίωση της ακρίβειας.
Η μη προ-ύγρανσή τους μπορεί να οδηγήσει σε φυσαλίδες αέρα, ειδικά όταν χρησιμοποιούνται παχύρρευστα ή υδρόφοβα υγρά. Για να αποφύγετε τις φυσαλίδες αέρα, βεβαιωθείτε ότι έχετε προ-ύγρανει τα ρύγχη κατά την πιπέτα με όγκο μεγαλύτερο από 10µl.
Χρησιμοποιήστε τεχνικές αντίστροφης πιπέτας, εάν είναι απαραίτητο
Ιξώδεις ουσίες: Ένα συνηθισμένο πρόβλημα κατά την αναρρόφηση με πιπέτα παχύρρευστων ουσιών, όπως διαλύματα πρωτεϊνών ή νουκλεϊκών οξέων, γλυκερόλη και Tween 20/40/60/80, είναι ο συχνός σχηματισμός φυσαλίδων όταν χρησιμοποιείται η τεχνική της εμπρόσθιας αναρρόφησης με πιπέτα.
Η αργή αναρρόφηση με πιπέτα, χρησιμοποιώντας την τεχνική αντίστροφης αναρρόφησης, μειώνει τον κίνδυνο σχηματισμού φυσαλίδων κατά τη μεταφορά ιξωδών διαλυμάτων.
Τεχνική ELISA
Συνιστάται επίσης η αντίστροφη πιπέτα κατά την πιπέτα μικρών όγκων σεΜικρο-δοκιμαστικές πλάκες 96 φρεατίωνγια τεχνικές ELISA. Όταν φυσαλίδες αέρα εισέρχονται στην πιπέτα ή διανέμονται σε φρεάτια κατά την προσθήκη αντιδραστηρίων, αυτό μπορεί να επηρεάσει τις τιμές οπτικής πυκνότητας και τα αποτελέσματα. Συνιστάται η αντίστροφη χρήση πιπέτας για την ελαχιστοποίηση ή την εξάλειψη αυτού του προβλήματος.
Χρησιμοποιήστε εργονομικές πιπέτες
Οι παλιές πιπέτες που δεν έχουν σχεδιαστεί με γνώμονα την εργονομία απαιτούν περισσότερη σωματική προσπάθεια, κουράζεστε και η τεχνική πιπέτας σας γίνεται πρόχειρη και κακή. Τα σφάλματα που αναφέρθηκαν παραπάνω, όπως η γρήγορη απελευθέρωση του εμβόλου, ενδέχεται να εμφανίζονται συχνότερα.
Επενδύοντας σε μια πιο εργονομική λύση, θα είστε σε θέση να διατηρήσετε άριστη τεχνική και να αποτρέψετε τον σχηματισμό φυσαλίδων αέρα λόγω κακής τεχνικής.
Αφιερώστε χρόνο για να εκπαιδεύσετε το προσωπικό
Η τακτική εκπαίδευση και αξιολόγηση του προσωπικού στις τεχνικές πιπέτας μπορεί να διασφαλίσει τη μείωση των σφαλμάτων του χειριστή και του σχηματισμού φυσαλίδων αέρα.
Εξετάστε περισσότερες αυτοματοποιημένες λύσεις
Όπως σημειώθηκε παραπάνω, οι περισσότερες φυσαλίδες αέρα προκαλούνται από τον χειριστή. Μπορεί να είναι δυνατή η μείωση του σφάλματος και η άνεση του χειριστή χρησιμοποιώντας ηλεκτρονικές πιπέτες ή μια εύκαμπτη πλατφόρμα χειρισμού υγρών, όπως ηΡομπότ χειρισμού υγρών Agilent Bravo.
Χρησιμοποιήστε καλή ποιότηταΆκρες πιπέτας
Οι μικροπιπέτες συνήθως αγοράζονται με προσοχή, αλλά συχνά δεν δίνεται ιδιαίτερη σημασία στην ποιότητα της αναλώσιμης μύτης της πιπέτας. Λόγω της επίδρασης που έχει μια μύτη στα αποτελέσματα της πιπέτας, το πρότυπο ISO 8655 απαιτεί επιπλέον βαθμονόμηση εάν χρησιμοποιούνται πιπέτες και μύτη από διαφορετικούς κατασκευαστές.
Αυτό θα μπορούσε να οφείλεται στο γεγονός ότι πολλές φθηνές άκρες μπορεί να φαίνονται ωραίες στην αρχή, αλλά όταν τις μελετήσετε προσεκτικά, μπορεί να έχουν λάμψεις, προεξοχές, γρατσουνιές και φυσαλίδες αέρα, ή να είναι στραβές ή να περιέχουν ακαθαρσίες.
Η αγορά μπεκ καλής ποιότητας κατασκευασμένων από πολυπροπυλένιο υψηλής ποιότητας μπορεί να μειώσει την εμφάνιση φυσαλίδων αέρα.
Συμπερασματικά
Η παρουσία φυσαλίδων αέρα στην άκρη της πιπέτας σας επηρεάζει την αποτελεσματικότητα του εργαστηρίου, καθώς και την ανακρίβεια και την ανακρίβεια των αποτελεσμάτων. Έχουμε σημειώσει πολλά πράγματα που μπορείτε να κάνετε για να αποφύγετε την είσοδο φυσαλίδων αέρα στηνάκρη πιπέτας.
Ωστόσο, εάν η ποιότητα είναι κακήάκρες πιπέταςπροκαλούν την είσοδο φυσαλίδων αέρα στην άκρη της πιπέτας σας, θα χαρείτε να μάθετε ότι η καθολική μας εφαρμογήάκρες πιπέταςκατασκευάζονται σύμφωνα με τα υψηλότερα πρότυπα και είναι κατασκευασμένα από καθαρό πολυπροπυλένιο υψηλής ποιότητας.
Βιοϊατρική εταιρεία Suzhou AceΠαράγουν υψηλής ποιότητας άκρα πιπέτας γενικής χρήσης, όγκους 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 και 1250 µL, 96 άκρα/rack. Εξαιρετική ανθεκτικότητα – όλα τα rack άκρων ACE ανταποκρίνονται στις απαιτήσεις χρήσης με πολυκαναλικές πιπέτες. Στείρα, φιλτραρισμένα, χωρίς RNase/DNase και μη πυρετογόνα.
Καλώς ήρθατε να μας ρωτήσετε για περισσότερες λεπτομέρειες.
Ώρα δημοσίευσης: 29 Δεκεμβρίου 2022