Mikropipetten er nok det mest anvendte værktøj i laboratoriet. Den bruges af forskere i en bred vifte af sektorer, herunder den akademiske verden, hospitaler og retsmedicinske laboratorier samt udvikling af lægemidler og vacciner, til at overføre præcise, meget små mængder væske.
Selvom det kan være irriterende og frustrerende at få øje på luftbobler i engangspipettespidsen, hvis de ikke opdages eller ignoreres, kan det have en enorm indflydelse på resultaternes pålidelighed og reproducerbarhed.
Den gode nyhed er, at der er nogle enkle foranstaltninger, du kan tage for at forhindre luftbobler og forbedre laboratorieeffektiviteten, operatørtilfredsheden samt nøjagtigheden og præcisionen af resultaterne.
Nedenfor undersøger vi konsekvensen af at få en luftboble i din pipettespids, og hvad du skal gøre derefter.
Konsekvensen af bobler iPipettespids
Selv hvis du bruger de mest præcise, velholdte, servicerede og kalibrerede pipetter af højeste kvalitet, kan pålideligheden af dine resultater blive påvirket af laboratoriefejl. Når der kommer bobler ind itipdet kan have flere udfald.
● Når brugeren ser luftboblen, skal vedkommende bruge tid på at dispensere den opsugede væske korrekt, skubbe spidsen ud og starte processen forfra.
● Uopdagede luftbobler kan resultere i lav volumenoverførsel, hvilket ændrer koncentrationen af reaktionsblandinger, hvilket kan føre til mislykkede eksperimenter og tvivlsomme eller upålidelige resultater.
Disse resultater kan have flere konsekvenser (1).
● Nedsat laboratorieeffektivitet – Test og analyser skal gentages, hvilket medfører løn- og materialeomkostninger, som kan være ret betydelige.
● Tvivlsomme eller forkerte testresultater – Hvis der offentliggøres forkerte resultater, kan det have mere alvorlige konsekvenser, herunder fejldiagnose og dårlige patientresultater.
● Tilbagetrækning af manuskripter fra tidsskrifter – Hvis fagfæller ikke kan replikere dine resultater på grund af luftbobler, der forårsager unøjagtige resultater, kan artiklerne blive trukket tilbage.
Bedste praksis til at forhindre luftbobler
I de fleste tilfælde skyldes luftbobler i pipettespidserne operatørfejl. Dårlig teknik på grund af utilstrækkelig træning eller træthed er normalt det underliggende problem.
Pipettering er en dygtig operation, der kræver 110 % opmærksomhed, ordentlig træning og øvelse for at opnå ensartede og nøjagtige resultater.
Selvom der er flere ting, du kan gøre for at reducere generelle pipetteringsfejl, har vi nedenfor fremhævet nogle bedste fremgangsmåder, der kan anvendes for at undgå luftbobler ipipettespidser.
Forbedre brugerteknik
Pipettér langsomt
Hvis stemplet slippes for hurtigt under aspiration, kan der komme luftbobler ind i spidsen. Dette kan være særligt problematisk ved overførsel af viskøse væsker. En lignende effekt kan opstå, hvis stemplet slippes for hurtigt efter dispensering.
For at undgå luftbobler under aspiration skal du sørge for at betjene stemplet på manuelle pipetter på en jævn og regelmæssig måde med ensartet kraft.
Brug den korrekte nedsænkningsdybde
Hvis pipettespidsen ikke nedsænkes dybt nok under menisken i væskereservoiret, kan det resultere i indånding af luft og dermed bobledannelse.
Hvis spidsen nedsænkes for dybt, kan det dog aspirere mere væske på grund af øget tryk, eller der kan forekomme dråber på ydersiden af spidsen, så det er vigtigt at nedsænke spidsenpipettespidstil den korrekte dybde.
Den anbefalede dybde varierer afhængigt af pipettestørrelse, type og mærke. Selvom producentens anbefalinger bør følges, er her en generel vejledning fra National Physical Laboratory.
Guide til dybden af spidsnedsænkning
Pipettevolumen (µl) og nedsænkningsdybde (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
ForvandingPipettespidser
Ved pipettering af volumener større end 10 µlpipettespidserforfugtes normalt ved at fylde dem flere gange med den væske, der dispenseres, og udstøde den til spildevand for at forbedre nøjagtigheden.
Hvis de ikke forfugtes, kan det resultere i luftbobler, især ved brug af viskøse eller hydrofobe væsker. For at undgå luftbobler skal du sørge for at forfugte spidserne, når du pipetterer volumen større end 10 µl.
Brug omvendt pipetteringsteknikker, hvis det er relevant
Viskøse stoffer: Et almindeligt problem ved pipettering af viskøse stoffer såsom protein- eller nukleinsyreopløsninger, glycerol og Tween 20/40/60/80 er den hyppige dannelse af bobler, når den fremadrettede pipetteringsteknik anvendes.
Langsom pipettering ved brug af omvendt pipetteringsteknik reducerer risikoen for bobledannelse ved overførsel af viskose opløsninger.
ELISA-teknik
Omvendt pipettering anbefales også ved pipettering af små mængder96-brønds mikrotestpladertil ELISA-teknikker. Når luftbobler trækkes ind i pipetten eller dispenseres i brøndene ved tilsætning af reagenser, kan det påvirke værdierne for optisk densitet og resultaterne. Omvendt pipettering anbefales for at minimere eller eliminere dette problem.
Brug ergonomiske pipetter
Gammeldags pipetter, der ikke er designet med ergonomi i tankerne, kræver mere fysisk indsats, du bliver træt, og din pipetteringsteknik bliver sjusket og dårlig. Ovennævnte fejl, såsom hurtig stempeludløsning, kan forekomme hyppigere.
Ved at investere i en mere ergonomisk løsning vil du være i stand til at opretholde en fremragende teknik og forhindre dannelse af luftbobler på grund af dårlig teknik.
Tag dig tid til at oplære personale
Regelmæssig træning og evaluering af personale i pipetteringsteknikker kan sikre, at operatørfejl og dannelse af luftbobler reduceres.
Overvej flere automatiserede løsninger
Som nævnt ovenfor forårsages de fleste luftbobler af operatøren. Det kan være muligt at reducere operatørfejl og komfort ved at bruge elektroniske pipetter eller en fleksibel væskehåndteringsplatform, såsomAgilent Bravo væskehåndteringsrobot.
Brug god kvalitetPipettespidser
Mikropipetter købes normalt med omhu, men ofte lægges der ikke stor vægt på kvaliteten af engangspipettespidsen. På grund af den indflydelse, som en spids har på pipetteringsresultaterne, kræver standarden ISO 8655 en ekstra kalibrering, hvis pipetter og spidser fra forskellige producenter anvendes.
Dette kan skyldes, at mange billige spidser kan se fine ud i starten, men når man studerer dem omhyggeligt, kan de have glimt, fremspring, ridser og luftbobler, eller være bøjede eller indeholde urenheder.
Køb af spidser af god kvalitet lavet af polypropylen af høj kvalitet kan reducere forekomsten af luftbobler.
Afslutningsvis
Luftbobler i pipettespidsen påvirker laboratoriets effektivitet, og det kan føre til unøjagtigheder og upræcisioner i resultaterne. Vi har nævnt flere ting, du kan gøre for at undgå, at der kommer luftbobler ind i pipettespidsen.pipettespids.
Men hvis kvaliteten er dårligpipettespidserforårsager luftbobler i din pipettespids, vil du blive glad for at vide, at vores universelle pasformpipettespidserer fremstillet efter de højeste standarder og er lavet af ren polypropylen af høj kvalitet.
Suzhou Ace Biomedical-virksomhedProducerer universelle pipettespidser af høj kvalitet med volumener på 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 og 1250 µL, 96 spidser/stativ. Enestående holdbarhed – alle ACE-spidsstativer kan klare kravene ved brug med multikanalpipetter. Sterile, filter-, RNase-/DNase-fri og ikke-pyrogeniske.
Velkommen til at spørge os for yderligere oplysninger.
Opslagstidspunkt: 29. dec. 2022