Zavedení
PCR destičky, které jsou po mnoho let základem laboratoří, se v moderním prostředí stávají ještě rozšířenějšími, protože laboratoře zvyšují svou propustnost a stále více využívají automatizaci ve svých pracovních postupech. Dosažení těchto cílů při zachování přesnosti a integrity experimentů může být obtížné. Jednou z běžných oblastí, kde se mohou chyby vkrádat, je utěsněníPCR destičky...při nesprávné technice dochází k odpařování vzorků, změně pH, a tím k narušení enzymatických funkcí a ke kontaminaci. Naučte se, jak uzavřítPCR destičkasprávně eliminuje tato rizika a zajišťuje reprodukovatelné výsledky.
Najděte správné těsnění pro vaši PCR destičku
Víčka destiček vs. fóliové těsnění vs. víčka
ČepiceJsou dobrým způsobem, jak pevně uzavřít talíř, a zároveň vám poskytují flexibilitu, abyste talíř snadno a bez plýtvání otevírali a znovu uzavírali. Víčka však mají několik klíčových nevýhod.
Zaprvé si budete muset koupit specifickou kompatibilní krytku, což je činí ne univerzálními. Budete se muset ujistit, že vybraná krytka pasuje na destičku, což závisí na jejím výrobci, a v závislosti na použitém termocykleru zvolit buď klenutou, nebo plochou verzi.
Za druhé, nasazování víček na destičku může být velmi opakující se a zdlouhavé, s rizikem křížové kontaminace, pokud nasadíte nesprávný víčko na nesprávnou jamku.
I když jsou fóliové uzávěry méně flexibilní, pokud jde o odstraňování a výměnu, jsou velmi všestranné, protože se hodí na jakýkoli typ PCR destičky bez ohledu na výrobce. Dají se jednoduše nařezat na požadovanou velikost, což je činí velmi efektivními.
Další možností je víko s talířovou úpravou. Ty nabízejí menší ochranu než uzávěry a těsnění a používají se hlavně pouze pro krátkodobé zakrytí, aby se zabránilo kontaminaci.
Optické vs. fóliové fóliové těsnění
Ať už potřebujete optické, průhledné těsnění nebohliníková fólieZapečetění vašeho talíře závisí na vašem experimentálním formátu.Optické těsnicí fólieJsou průhledné, takže můžete vzorky pozorovat a zároveň je chrání a zabraňují odpařování. Jsou také obzvláště užitečné v experimentech qPCR, které zahrnují vysoce přesná měření fluorescence přímo z destičky. V takovém případě budete potřebovat těsnicí fólii, která odfiltruje co nejméně fluorescence. Je důležité se ujistit, že použitá pečeť nebo víčko má dostatečně vysokou úroveň optické čistoty, aby byla zajištěna přesnost odečtů.
Fóliové fólie jsou vhodné pro vzorky, které jsou citlivé na světlo nebo mají být skladovány při teplotě pod 80 °C. Z tohoto důvodu většina vzorků určených k dlouhodobému skladování vyžaduje fóliovou fólii. Fóliové fólie jsou také propíchnutelné, což je užitečné buď pro zkoumání jednotlivých jamek, nebo pro přenos vzorků jehlami. To může probíhat ručně nebo jako součást robotické platformy.
Také vezměte v úvahu, že agresivní látky, jako jsou kyseliny, zásady nebo rozpouštědla, vyžadují těsnění, které jim odolá, v takovém případě je pravděpodobně vhodnější fóliové těsnění.
Lepicí vs. tepelně těsnicí fólie
Lepicí fóliejsou velmi přímočaré a snadno se aplikují. Uživatel pouze nanese těsnění na destičku a pomocí jednoduchého aplikátoru jej přitlačí a vytvoří těsné spojení.
Tepelné svařování je pokročilejší a poskytuje déle trvající utěsnění s nižší rychlostí odpařování ve srovnání s konvenčním lepidlem. Tato možnost je vhodná, pokud chcete vzorky dlouhodobě skladovat, i když to s sebou nese další požadavky na zařízení pro svařování desek.
Jak zapečetit PCR destičku
Metoda utěsnění destiček
Samolepicí
1. Ujistěte se, že pracujete na rovném a stabilním pracovním povrchu
2. Vyjměte fólii z obalu a odstraňte podkladovou vrstvu
3. Opatrně umístěte těsnění na destičku a ujistěte se, že jsou všechny jamky zakryté.
4. Pomocí aplikátoru vyviňte tlak na destičku. Začněte od jednoho konce a rovnoměrně tlačte k druhému.
5. Opakujte to několikrát
6. Projeďte aplikátorem kolem vnějších jamek, abyste se ujistili, že jsou i tyto správně utěsněny.
Tepelné uzávěry
Tepelné svařování funguje tak, že se fólie nataví k okraji každé jamky pomocí svářečky desek. Chcete-li obsluhovat tepelnou svářečku, řiďte se pokyny výrobce zařízení. Ujistěte se, že výrobce, od kterého zařízení pořizujete, je důvěryhodný, protože je velmi důležité, aby bylo svařování správné, účinné a vodotěsné.
Horní hroty pro těsnění desek
a. Při vyvíjení tlaku na těsnění postupujte ve vodorovném i svislém směru, abyste zajistili správné utěsnění.
b. Vždy je dobrým zvykem provést zkušební provoz všeho, co děláte, a u těsnění destiček tomu není jinak. Před použitím destičky se vzorky vyzkoušejte s prázdnou destičkou.
c. Při testování sejměte těsnění a zkontrolujte, zda lepidlo správně přilnulo a nezůstaly žádné mezery. Vizuální znázornění je uvedeno v prvním referenčním dokumentu. Pokud jste desku řádně neutěsnili, po odstranění těsnění se objeví mezery, kde lepidlo k desce zcela nepřilnulo.
d. Pro přepravu a přepravu vzorků může být užitečné nanést na fóliový uzávěr plastovou plombu pro větší ochranu (zejména před propíchnutím).
e. Při aplikaci fólie se vždy ujistěte, že na ní nejsou žádné hrboly ani vrásky – ty by mohly způsobit netěsnosti a odpařování
Čas zveřejnění: 23. listopadu 2022