Как да запечатате PCR плака

Въведение

PCR плаки, основен елемент в лабораторията в продължение на много години, стават още по-разпространени в съвременната среда, тъй като лабораториите увеличават производителността си и все повече използват автоматизация в работните си процеси. Постигането на тези цели, като същевременно се запази точността и целостта на експериментите, може да бъде трудно. Една от често срещаните области, където могат да се промъкнат грешки, е запечатването на...PCR плаки, с лоша техника, което позволява изпаряване на пробите, променя pH и следователно нарушава ензимните функции и предизвиква замърсяване. Да се ​​научим как да запечатамеPCR плакаправилно елиминира тези рискове и осигурява възпроизводими резултати.

Намерете правилния печат за вашата PCR плака

Капачки за чинии срещу филмови уплътнения срещу капаци
Капачкиса добър начин да запечатате чинията си плътно, като същевременно ви дават гъвкавостта много лесно да я отваряте и затваряте отново, когато е необходимо, без никакви отпадъци. Капачките обаче имат няколко ключови недостатъка.

Първо, ще трябва да закупите специфичната съвместима капачка, което ги прави неуниверсални. Ще трябва да се уверите, че избраната от вас капачка пасва на плаката, което зависи от производителя ѝ, и да изберете куполна или плоска форма в зависимост от термоциклера, който използвате.

Второ, поставянето на капачките върху плаката може да бъде много повтарящо се и досадно, с риск от кръстосано замърсяване, ако поставите грешна капачка на грешната ямка.

Въпреки че филмовите уплътнения са по-малко гъвкави по отношение на премахването и подмяната, те са многофункционални, тъй като са подходящи за всякакъв тип PCR плака, независимо кой е производителят. Те могат просто да бъдат отрязани по размер, което ги прави много ефективни.

Друг вариант е капак тип „пластина“. Те предлагат по-малка защита от капачките и уплътненията и се използват главно само за краткосрочно покритие, за да се предотврати замърсяване.

Оптични срещу фолийни уплътнения

Независимо дали се нуждаете от оптично, прозрачно уплътнение илиалуминиево фолиоЗапечатването на чинията ви се определя от вашия експериментален формат.Оптични запечатващи филмиса прозрачни, за да ви позволят да наблюдавате пробите, като същевременно ги защитават и предотвратяват изпаряването. Те са особено полезни и в qPCR експерименти, които включват извършване на високо прецизни измервания на флуоресценцията директно от плаката, като в този случай ще ви е необходимо запечатващо фолио, което филтрира възможно най-малко флуоресценция. Важно е да се уверите, че използваното от вас фолио или капачка има достатъчно високо ниво на оптична прозрачност, за да се гарантира точността на показанията.

Фолиевите филми са подходящи за всякакви проби, които са чувствителни към светлина или ще се съхраняват при температура под 80°C. Поради тази причина повечето проби, предназначени за дългосрочно съхранение, ще изискват фолио. Фолиевите филми също така могат да се пробиват, което е полезно както за изследване на отделни ямки, така и за прехвърляне на проби с игли. Това може да се случи ръчно или като част от роботизирана платформа.

Също така имайте предвид, че агресивните вещества, които включват киселини, основи или разтворители, ще изискват уплътнение, което може да ги издържи, като в този случай фолиевото уплътнение вероятно е по-подходящо.

Лепило срещу термозапечатващо фолио
Уплътнения от самозалепващо фолиоса много ясни и лесни за нанасяне. Всичко, от което се нуждаете, е потребителят да постави уплътнението върху плочата и да използва обикновен апликатор, за да натисне и да образува плътно запечатване.

Термозапечатките са по-усъвършенствани, осигурявайки по-дълготрайно запечатване с намалени скорости на изпарение в сравнение с конвенционалното лепило. Тази опция е подходяща, ако искате да съхранявате проби в дългосрочен план, въпреки че това е свързано с допълнително изискване за оборудване за запечатване на плочи.

Как да запечатате PCR плака

Метод за запечатване на плочи

Самозалепващи се

1. Уверете се, че работите върху равна и стабилна работна повърхност

2. Извадете фолиото от опаковката му и отстранете защитното фолио

3. Внимателно поставете печата върху плаката, като се уверите, че всички ямки са покрити.

4. Използвайте апликатор, за да приложите натиск върху плочата. Започнете от единия край и преминете към другия, като натискате равномерно.

5. Повторете това многократно

6. Прокарайте апликатора си около външните ямки, за да се уверите, че и те са правилно запечатани.

Термоуплътнения

Термозапечатките работят чрез разтопяване на филма към ръба на всяка ямка с помощта на устройство за запечатване на плочи. За да работите с термозапечатка, вижте инструкциите, предоставени от производителя на оборудването. Уверете се, че производителят, от когото доставяте оборудването си, е с добра репутация, тъй като е много важно запечатването да е правилно, ефективно и водонепроницаемо.

Най-добри съвети за запечатване на плочи

а. Когато прилагате натиск върху уплътнението, действайте както в хоризонтална, така и във вертикална посока, за да осигурите правилно уплътнение

б. Винаги е добра практика да правите тестов цикъл на каквото и да правите, и това не е по-различно при запечатването на пластини. Тествайте с празна пластина, преди да използвате такава с проби.

в. При тестване, свалете уплътнението и проверете дали лепилото е залепнало правилно, без пролуки. В първия референтен документ има визуално представяне на това. Ако не сте запечатали плочата правилно, когато премахнете уплътнението, ще има пролуки, където лепилото не е залепнало напълно за плочата.

г. За изпращане и транспортиране на проби може да е полезно да поставите пластмасов печат върху фолиото за допълнителна защита (особено от пробиване).

д. Винаги се уверявайте, че няма неравности или гънки при полагане на фолиото – те ще причинят течове и изпарение