如何密封 PCR 板

介绍

PCR板多年来一直是实验室的必备工具，随着实验室不断扩大其通量并越来越多地在工作流程中采用自动化，其在现代环境中变得越来越普遍。在保持实验准确性和完整性的同时实现这些目标可能并非易事。最容易出现错误的环节之一是密封PCR板，如果技术不完善，样品会蒸发，pH 值会改变，从而破坏酶的功能，并容易造成污染。学习如何密封PCR板正确消除这些风险并确保可重复的结果。

为您的 PCR 板找到合适的密封

板盖、薄膜密封和盖子
帽子盖子是密封盘子的好方法，密封效果很好，同时还能灵活地根据需要轻松打开和重新密封盘子，不会造成任何浪费。然而，盖子也有一些关键的缺点。

首先，你必须购买兼容的特定盖子，这使得它们用途不广。你必须确保你选择的盖子适合你的反应板，这取决于它的制造商，并根据你使用的热循环仪选择圆顶形或平底形的盖子。

其次，将盖子盖到板上可能非常重复且繁琐，如果将错误的盖子放在错误的孔上，则有交叉污染的风险。

虽然薄膜密封在拆卸和更换方面不太灵活，但它们用途广泛，适用于任何类型的PCR板，无论制造商是谁。它们可以轻松裁剪成合适的尺寸，非常有效。

另一个选择是板盖。这类盖的保护作用不如瓶盖和密封圈，主要用于短期覆盖以防止污染。

光学密封与铝箔膜密封

无论您需要光学、透明密封还是铝箔膜密封您的板取决于您的实验格式。光学密封膜透明，方便您观察样品，同时还能保护样品并防止蒸发。它们在qPCR实验中也特别有用，因为qPCR实验需要直接从孔板进行高精度荧光测量，在这种情况下，您需要密封膜来滤除尽可能少的荧光。务必确保您使用的密封膜或瓶盖具有足够高的光学透明度，以确保读数准确。

铝箔膜适用于任何对光敏感或需在 80°C 以下储存的样品。因此，大多数需要长期储存的样品都需要使用铝箔膜。铝箔膜也可刺穿，方便检查单个孔或通过针头转移样品。这可以手动进行，也可以作为机器人平台的一部分进行。

还要考虑到包括酸、碱或溶剂在内的腐蚀性物质需要能够承受它们的密封，在这种情况下，箔密封可能更合适。

粘合剂与热封膜
粘合膜密封使用方法非常简单。用户只需将密封剂贴到板上，然后用简单的涂抹工具向下按压，形成紧密的密封即可。

热封技术更为先进，与传统的粘合剂密封相比，其密封效果更持久，蒸发率更低。如果您需要长期保存样品，则非常适合使用热封技术，但这对板封设备有额外的要求。

如何密封 PCR 板

板封方法

自粘式

1. 确保在平坦且稳定的工作台面上工作

2. 从包装中取出薄膜，并撕掉背衬

3. 小心地将密封垫放在板上，同时确保所有孔都被覆盖

4. 使用涂抹工具在盘子上施加压力。从一端开始，逐渐向另一端均匀施压。

5. 重复多次

6. 将涂抹器绕着外面的孔转一圈，确保它们也正确密封。

热封

热封的原理是借助板封口机将薄膜熔化到每个孔的边缘。操作热封口机时，请参考设备制造商提供的说明书。请确保您购买的设备制造商信誉良好，因为密封正确、有效且防水至关重要。

板封孔小贴士

a. 对密封件施加压力时，请沿水平和垂直方向施加压力，以确保正确密封

b. 无论做什么，先进行测试总是一个好习惯，封板也不例外。先用空板测试，然后再使用装有样品的封板。

c. 测试时，撕掉密封膜，检查粘合剂是否粘牢，没有缝隙。第一篇参考文献中对此进行了直观的展示。如果板子密封不当，撕掉密封膜时，粘合剂与板子之间会存在缝隙，导致粘合剂无法完全粘合。

d. 对于样品的运输，您可能会发现在铝箔密封上加一层塑料密封会很有帮助，可以提供额外的保护（尤其是防止刺穿）。

e. 粘贴薄膜时，务必确保表面没有凸起或褶皱——这些缺陷会导致泄漏和蒸发