Mikropipetten är förmodligen det mest använda verktyget i laboratoriet. Den används av forskare inom en mängd olika sektorer, inklusive den akademiska världen, sjukhus och forensiska laboratorier samt läkemedels- och vaccinutveckling, för att överföra exakta, mycket små mängder vätska.
Även om det kan vara irriterande och frustrerande att upptäcka luftbubblor i engångspipettens spets om de inte upptäcks eller ignoreras, kan det ha en enorm inverkan på resultatens tillförlitlighet och reproducerbarhet.
Den goda nyheten är att det finns några enkla åtgärder du kan vidta för att förhindra luftbubblor och förbättra laboratorieeffektiviteten, operatörernas nöjdhet samt resultatens noggrannhet och precision.
Nedan utforskar vi konsekvenserna av att få en luftbubbla i pipettspetsen och vad du bör göra härnäst.
Konsekvensen av bubblor iPipettspets
Även om du använder de mest exakta, högkvalitativa, väl underhållna, servade och kalibrerade pipetterna kan tillförlitligheten hos dina resultat påverkas av laboratoriefel. När bubblor kommer in idricksdet kan ha flera utfall.
● När användaren ser luftbubblan måste hen lägga tid på att dosera den aspirerade vätskan på lämpligt sätt, mata ut spetsen och starta om processen.
● Oupptäckta luftbubblor kan resultera i låg volymöverföring, vilket förändrar koncentrationen av reaktionsblandningar och kan leda till misslyckade experiment och tvivelaktiga eller otillförlitliga resultat.
Dessa resultat kan få flera konsekvenser (1).
● Minskad laboratorieeffektivitet – Tester och analyser måste upprepas, vilket medför arbets- och materialkostnader, vilka kan bli ganska betydande.
● Tvivelaktiga eller felaktiga testresultat – Om felaktiga resultat publiceras kan det få allvarligare konsekvenser, inklusive feldiagnos och dåliga patientresultat.
● Återkallande av manuskript från tidskrifter – Om kollegor inte lyckas replikera dina resultat på grund av luftbubblor som orsakar felaktiga resultat kan artiklarna dras tillbaka.
Bästa praxis för att förhindra luftbubblor
I de flesta fall orsakas luftbubblor i pipettspetsarna av operatörsfel. Dålig teknik på grund av otillräcklig träning eller trötthet är oftast det underliggande problemet.
Pipettering är en skicklig operation som kräver 110 % uppmärksamhet, ordentlig utbildning och övning för att uppnå konsekventa och noggranna resultat.
Även om det finns flera saker du kan göra för att minska generella pipetteringsfel, har vi nedan lyft fram några bästa metoder som kan användas för att undvika luftbubblor ipipettspetsar.
Förbättra användartekniken
Pipett långsamt
Om kolven släpps för snabbt vid aspiration kan luftbubblor komma in i spetsen. Detta kan vara särskilt problematiskt vid överföring av viskösa vätskor. En liknande effekt kan uppstå om kolven släpps för snabbt efter dispensering.
För att undvika luftbubblor vid aspiration, var noga med att manövrera kolven på manuella pipetter på ett jämnt och regelbundet sätt med jämn kraft.
Använd rätt nedsänkningsdjup
Om pipettspetsen inte sänks ner tillräckligt djupt under menisken i vätskebehållaren kan det leda till att luft andas in och därmed bubbelbildning.
Att sänka ner spetsen för djupt kan dock aspirera mer vätska på grund av ökat tryck, eller så kan droppar uppstå på utsidan av spetsen, så det är viktigt att sänka nerpipettspetstill rätt djup.
Det rekommenderade djupet varierar beroende på pipettstorlek, typ och märke. Även om tillverkarens rekommendationer bör följas, här är en allmän vägledning från National Physical Laboratory.
Guide till djupdjup för nedsänkning av spetsar
Pipettvolym (µl) och nedsänkningsdjup (mm)
- 1–100: 2–3
- 100–1 000: 2–4
- 1 000–5 000: 2–5
FörvättningPipettspetsar
Vid pipettering av volymer större än 10 µlpipettspetsarförfuktas vanligtvis genom att de fylls flera gånger med vätskan som dispenseras och utdrivs i avloppet för att förbättra noggrannheten.
Underlåtenhet att förväta spetsarna kan resultera i luftbubblor, särskilt vid användning av viskösa eller hydrofoba vätskor. För att undvika luftbubblor, se till att förväta dem när du pipetterar volymer större än 10 µl.
Använd omvända pipetteringstekniker om det är lämpligt
Viskösa ämnen: Ett vanligt problem vid pipettering av viskösa ämnen såsom protein- eller nukleinsyralösningar, glycerol och Tween 20/40/60/80 är den frekventa bubblobildningen när framåtpipetteringstekniken används.
Långsam pipettering med omvänd pipetteringsteknik minskar risken för bubbelbildning vid överföring av viskösa lösningar.
ELISA-teknik
Omvänd pipettering rekommenderas också vid pipettering av små volymer i96-brunns mikrotestplattorför ELISA-tekniker. När luftbubblor sugs in i pipetten eller dispenseras i brunnar vid tillsats av reagens kan det påverka optiska densitetsvärden och resultaten. Omvänd pipettering rekommenderas för att minimera eller eliminera detta problem.
Använd ergonomiska pipetter
Gammaldags pipetter som inte är ergonomiskt utformade kräver mer fysisk ansträngning, man blir trött och pipetteringstekniken blir slarvig och dålig. Ovan nämnda fel, såsom snabb kolvlossning, kan förekomma oftare.
Genom att investera i en mer ergonomisk lösning kommer du att kunna upprätthålla utmärkt teknik och förhindra luftbubblor på grund av dålig teknik.
Ta dig tid att utbilda personal
Regelbunden utbildning och utvärdering av personal i pipetteringstekniker kan säkerställa att operatörsfel och luftbubblor minskas.
Överväg fler automatiserade lösningar
Som nämnts ovan orsakas de flesta luftbubblor av operatören. Det kan vara möjligt att minska operatörsfel och komfort genom att använda elektroniska pipetter eller en flexibel vätskehanteringsplattform som t.ex.Agilent Bravo vätskehanteringsrobot.
Använd god kvalitetPipettspetsar
Mikropipetter köps vanligtvis in med omsorg, men ofta läggs liten vikt vid kvaliteten på engångspipettspetsen. På grund av den inverkan som en spets har på pipetteringsresultaten kräver standarden ISO 8655 en extra kalibrering om pipetter och spetsar från olika tillverkare används.
Det kan bero på att många billiga spetsar kan se bra ut till en början, men när man studerar dem noggrant kan de ha fläckar, utskjutande delar, repor och luftbubblor, eller vara böjda eller innehålla orenheter.
Att köpa spetsar av god kvalitet tillverkade av högkvalitativ polypropen kan minska förekomsten av luftbubblor.
Att avsluta
Att få luftbubblor i pipettspetsen påverkar laboratoriets effektivitet och kan leda till felaktigheter och oprecisioner i resultaten. Vi har noterat flera saker du kan göra för att undvika att luftbubblor kommer in i pipettspetsen.pipettspets.
Men om kvaliteten är dåligpipettspetsarorsakar att luftbubblor kommer in i din pipettspets, kommer du att bli glad att veta att vår universella passformpipettspetsarär tillverkade enligt högsta standard och är tillverkade av ren polypropen av premiumkvalitet.
Suzhou Ace Biomedical-företagetProducerar högkvalitativa universalpipettspetsar med volymer på 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 och 1250 µL, 96 spetsar/ställ. Exceptionell hållbarhet – alla ACE-spetsställ klarar kraven vid användning med flerkanalspipetter. Sterila, filter-, RNase-/DNase-fria och icke-pyrogena.
Välkommen att fråga oss för mer information.
Publiceringstid: 29 december 2022