Микропипета је вероватно најкоришћенији алат у лабораторији. Користе је научници у широком спектру сектора, укључујући академске заједнице, болнице и форензичке лабораторије, као и развој лекова и вакцина, за пренос прецизних, веома малих количина течности.
Иако може бити досадно и фрустрирајуће уочити мехуриће ваздуха на врху пипете за једнократну употребу, ако се не примете или игноришу, то може имати огроман утицај на поузданост и поновљивост резултата.
Добра вест је да постоје неке једноставне мере које можете предузети како бисте спречили стварање мехурића ваздуха и побољшали ефикасност лабораторије, задовољство оператера, као и тачност и прецизност резултата.
У наставку истражујемо последице појављивања мехурића ваздуха у врху пипете и шта треба даље да урадите.
Последица мехурића уВрх пипете
Чак и ако користите најтачније, најквалитетније, добро одржаване, сервисиране и калибрисане пипете, поузданост ваших резултата може бити погођена лабораторијским грешкама. Када мехурићи уђу у...бакшишможе имати неколико исхода.
● Када корисник уочи мехур ваздуха, мора да потроши време на одговарајуће дозирање усисане течности, избаци врх и поново започне процес.
● Неоткривени мехурићи ваздуха могу довести до преноса мале запремине, мењајући тако концентрацију реакционих смеша, што доводи до неуспешних експеримената и сумњивих или непоузданих резултата.
Ови исходи могу имати неколико последица (1).
● Смањена ефикасност лабораторије – Тестови и анализе ће морати да се понављају, што ће довести до трошкова рада и материјала, који могу бити прилично значајни.
● Сумњиви или нетачни резултати тестова – Ако се објаве нетачни резултати, може доћи до озбиљнијих последица, укључујући погрешну дијагнозу и лоше исходе лечења пацијената.
● Повлачење рукописа из часописа – Ако колеге не успеју да реплицирају ваше резултате због мехурића ваздуха који узрокују нетачне резултате, радови могу бити повучени.
Најбоље праксе за спречавање ваздушних мехурића
У већини случајева, мехурићи ваздуха у врховима пипета су узроковани грешком оператера. Лоша техника због недовољне обуке или умора је обично основни проблем.
Пипетирање је вешта операција која захтева 110% пажње, одговарајућу обуку и вежбање како би се постигли доследни и тачни резултати.
Иако постоји неколико ствари које можете учинити да бисте смањили опште грешке при пипетирању, у наставку смо истакли неке најбоље праксе које се могу применити да бисте избегли мехуриће ваздуха уврхови пипета.
Побољшајте корисничку технику
Пипетирајте полако
Ако се клип пребрзо отпусти приликом усисавања, мехурићи ваздуха могу ући у врх. Ово може бити посебно проблематично приликом преноса вискозних течности. Сличан ефекат може се десити ако се клип пребрзо отпусти након дозирања.
Да бисте избегли стварање мехурића ваздуха приликом аспирације, водите рачуна да клип ручних пипета померате глатко и равномерно, примењујући константну силу.
Користите исправну дубину урањања
Ако врх пипете не буде довољно дубоко уроњен испод менискуса резервоара за течност, може доћи до усисавања ваздуха и стварања мехурића.
Међутим, превише дубоко потапање врха може усисати више течности због повећаног притиска или се капљице могу појавити на спољашњој страни врха, па је важно потопитиврх пипетедо исправне дубине.
Препоручена дубина варира у зависности од величине, типа и произвођача пипете. Иако треба следити препоруке произвођача, ево општег водича који је дала Национална физичка лабораторија.
Водич за дубину урањања врха
Запремина пипете (µl) и дубина урањања (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Претходно влажењеВрхови пипете
Приликом пипетирања запремине веће од 10µlврхови пипетаобично се претходно навлаже тако што се неколико пута напуне течношћу која се дозира и испусте је у отпад ради побољшања тачности.
Ако их претходно не навлажите, може доћи до стварања мехурића ваздуха, посебно када се користе вискозне или хидрофобне течности. Да бисте избегли стварање мехурића ваздуха, обавезно претходно навлажите врхове када пипетирате запремину већу од 10 µl.
Користите технике обрнутог пипетирања ако је прикладно
Вискозне супстанце: Уобичајени проблем при пипетирању вискозних супстанци као што су раствори протеина или нуклеинских киселина, глицерол и Tween 20/40/60/80 је често стварање мехурића када се користи техника пипетирања унапред.
Споро пипетирање, коришћењем технике обрнутог пипетирања, смањује се ризик од стварања мехурића при преносу вискозних раствора.
ELISA техника
Обрнуто пипетирање се такође препоручује када се пипетирају мале запремине уМикро плоче са 96 бунарићаза ELISA технике. Када се мехурићи ваздуха увуку у пипету или распореде у бунариће приликом додавања реагенса, то може утицати на вредности оптичке густине и резултате. Препоручује се обрнуто пипетирање како би се овај проблем минимизирао или елиминисао.
Користите ергономске пипете
Пипете старог модела које нису дизајниране имајући у виду ергономију захтевају више физичког напора, умарате се и ваша техника пипетирања постаје немарна и лоша. Горе поменуте грешке, попут брзог отпуштања клипа, могу се јављати чешће.
Улагањем у ергономскије решење моћи ћете да одржите одличну технику и спречите стварање мехурића ваздуха услед лоше технике.
Одвојите време за обуку особља
Редовна обука и процена особља у техникама пипетирања може осигурати смањење грешака оператера и стварања мехурића ваздуха.
Размотрите више аутоматизованих решења
Као што је горе наведено, већину ваздушних мехурића изазива оператер. Могуће је смањити грешке оператера и повећати удобност коришћењем електронских пипета или флексибилне платформе за руковање течностима као што јеРобот за руковање течностима Agilent Bravo.
Користите добар квалитетВрхови пипете
Микропипете се обично купују пажљиво, али се често мало пажње посвећује квалитету врха пипете за једнократну употребу. Због утицаја који врх има на резултате пипетирања, стандард ISO 8655 захтева додатну калибрацију ако се користе пипете и врхови различитих произвођача.
То би могло бити зато што многи јефтини врхови могу у почетку изгледати добро, али када их пажљиво проучите, могу имати бљескове, избочине, огреботине и мехуриће ваздуха, или могу бити савијени или садржати нечистоће.
Куповина квалитетних врхова направљених од висококвалитетног полипропилена може смањити појаву мехурића ваздуха.
Закључак
Улазак мехурића ваздуха у врх пипете утиче на ефикасност лабораторије, као и на нетачност и непрецизност резултата. Навели смо неколико ствари које можете учинити да бисте спречили улазак мехурића ваздуха у...врх пипете.
Међутим, ако је лошег квалитетаврхови пипетаузрокују улазак мехурића ваздуха у врх ваше пипете, биће вам драго да знате да је наш универзалниврхови пипетанаправљени су по највишим стандардима и направљени су од чистог полипропилена врхунског квалитета.
Биомедицинска компанија Суџоу АцеПроизводе висококвалитетне универзалне врхове за пипете запремина 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 и 1250 µL, 96 врхова/сталац. Изузетна издржљивост – сви ACE носачи за врхове испуњавају захтеве употребе са вишеканалним пипеторима. Стерилни, са филтером, без RNase/DNase и апирогени.
Добродошли да нас питате за више детаља.
Време објаве: 29. децембар 2022.