Laboratórni pracovníci môžu tráviť hodiny denne držaním mikropipety v ruke a zlepšenie efektívnosti pipetovania a zabezpečenie spoľahlivých výsledkov je často výzvou. Výber správnej mikropipety pre akúkoľvek danú aplikáciu je kľúčom k úspechu laboratórnej práce; nielenže zabezpečuje výkon akéhokoľvek experimentu, ale tiež zvyšuje efektivitu. Pochopenie potrieb pracovného postupu pipetovania umožňuje používateľom vybrať presné a opakovateľné pipety, ale existuje mnoho ďalších faktorov, ktoré by sa mali zvážiť na zlepšenie výsledkov pipetovania a zaručenie úspechu experimentov.
Vo všeobecnosti sa kvapaliny delia do troch hlavných kategórií: vodné, viskózne a prchavé. Väčšina kvapalín je na vodnej báze, vďaka čomu sú pipety s výtlačným systémom vzduchu prvou voľbou pre mnohých. Zatiaľ čo väčšina kvapalín s týmto typom pipety funguje dobre, pri práci s veľmi viskóznymi alebo prchavými kvapalinami by sa mali zvoliť volumetrické pipety. Rozdiely medzi týmito typmi pipiet sú znázornené na obrázku 1. Pre dosiahnutie vynikajúcich výsledkov je tiež dôležité používať správnu techniku pipetovania – bez ohľadu na typ kvapaliny.
Dva najdôležitejšie parametre ovplyvňujúce výsledky pipetovania sú presnosť a precíznosť (obrázok 2). Na dosiahnutie maximálnej presnosti, precíznosti a spoľahlivosti pipetovania je potrebné mať na pamäti niekoľko kritérií. Spravidla by si používateľ mal vždy vybrať najmenšiu pipetu, ktorá dokáže spracovať požadovaný prenosový objem. To je dôležité, pretože presnosť sa znižuje s približovaním nastaveného objemu k minimálnemu objemu pipety. Napríklad, ak dávkujete 50 µl s pipetou s objemom 5 000 µl, výsledky môžu byť slabé. Lepšie výsledky sa dajú dosiahnuť s pipetami s objemom 300 µl, zatiaľ čo pipety s objemom 50 µl poskytujú najlepšie výsledky. Okrem toho sa objem nastavený na tradičných manuálnych pipetách môže počas pipetovania zmeniť v dôsledku náhodného otočenia piestu. Preto niektorí výrobcovia pipiet vyvinuli návrhy na uzamknutie nastavenia objemu, aby sa zabránilo neúmyselným zmenám počas pipetovania a tým sa ďalej zabezpečila presnosť. Kalibrácia je ďalším dôležitým aspektom, ktorý pomáha zaručiť spoľahlivé výsledky preukázaním presnosti a precíznosti pipety. Tento proces by mal byť pre používateľa jednoduchý; Napríklad niektoré elektronické pipety dokážu nastaviť pripomienky kalibrácie alebo uložiť históriu kalibrácie. Nejde len o pipety, ktoré treba brať do úvahy. Ak sa hrot pipety uvoľní, presakuje alebo odpadne, môže to spôsobiť rôzne problémy. Tento bežný problém v laboratóriu je často spôsobený používaním univerzálnych hrotov pipety, ktoré často vyžadujú „poklepávanie“. Tento proces natiahne okraj hrotu pipety a môže spôsobiť presakovanie alebo stratu hrotu, alebo dokonca úplné spadnutie hrotu z pipety. Výber kvalitnej mikropipety navrhnutej so špecifickými hrotmi zaisťuje bezpečnejšie pripojenie, poskytuje vyššiu úroveň spoľahlivosti a lepšie výsledky. Okrem toho, niečo také jednoduché, ako farebne odlíšené pipety a hroty, môže tiež pomôcť používateľom zabezpečiť, aby boli pre ich pipety vybraté správne hroty.
V prostredí s vysokou priepustnosťou je dôležité byť čo najefektívnejší a zároveň zachovať spoľahlivosť a konzistentnosť procesu pipetovania. Existuje mnoho spôsobov, ako zlepšiť účinnosť pipetovania, vrátane použitia viackanálových a/alebo elektronických pipiet. Tieto všestranné prístroje často ponúkajú niekoľko rôznych režimov pipetovania – ako je reverzné pipetovanie, variabilné dávkovanie, programované sériové riedenia a ďalšie – na zjednodušenie procesu. Napríklad postupy, ako je opakované dávkovanie, sú ideálne na dávkovanie viacerých alikvotných podielov rovnakého objemu bez dopĺňania hrotu. Používanie jednokanálových pipiet na prenos vzoriek medzi rôznymi formátmi laboratórneho vybavenia sa môže rýchlo stať veľmi únavným a náchylným na chyby. Viackanálové pipety umožňujú prenos viacerých vzoriek naraz v okamihu. To nielen zvyšuje účinnosť, ale tiež pomáha predchádzať chybám pri pipetovaní a poraneniam z opakovaného napätia (RSI). Niektoré pipety majú dokonca možnosť meniť rozostupy hrotov počas pipetovania, čo umožňuje paralelný prenos viacerých vzoriek medzi rôznymi veľkosťami a formátmi laboratórneho vybavenia, čím sa šetria hodiny času (obrázok 3).
Laboratórni pracovníci zvyčajne trávia pipetovaním hodiny denne. To môže spôsobiť nepohodlie a v závažnejších prípadoch dokonca aj poranenie ruky alebo paže. Najlepšou radou, ako sa vyhnúť týmto potenciálnym rizikám, je čo najkratšie skrátiť čas držania pipety. Okrem toho by si používatelia mali vybrať ľahkú a dobre vyváženú mikropipetu so závažím v strede pre lepšiu stabilitu. Pipeta by mala pohodlne sedieť v rukách ľavákov aj pravákov, mať dobrý dizajn úchopu a nastavovať objem čo najpohodlnejšie a najrýchlejšie, aby sa predišlo zbytočnému pohybu. Dôležité sú aj špičky, pretože vkladanie a vyhadzovanie špičky často vyžaduje väčšiu silu ako pipetovanie a existuje potenciálne riziko zranenia, najmä pri vysokovýkonných nastaveniach. Špičky pipiet by mali zacvaknúť na miesto s minimálnou silou, poskytovať bezpečné spojenie a mali by sa dať rovnako ľahko vysunúť.
Pri výbere správnej mikropipety pre vašu aplikáciu je dôležité zvážiť každý aspekt vášho pracovného postupu. Zvážením pipety, jej charakteristík, typu a objemu pipetovanej kvapaliny a použitých hrotov môžu vedci zaručiť presné, precízne a spoľahlivé výsledky pri zachovaní produktivity a minimalizácii rizika zranenia.
V tomto vydaní je výťažnosť základných analytov hodnotená pomocou HPLC-MS s použitím zmiešaných mikroplatničiek so silnou katiónovou výmenou SPE. Výhody SEC-MALLS v biofarmaceutických aplikáciách…
International Labmate Limited Oak Court Business Centre Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH Spojené kráľovstvo
Čas uverejnenia: 10. júna 2022