Cum se sigilează o placă PCR

Introducere

Plăci PCR, un element de bază al laboratorului timp de mulți ani, devin și mai răspândite în mediul modern, pe măsură ce laboratoarele își extind randamentul și utilizează din ce în ce mai mult automatizarea în cadrul fluxurilor lor de lucru. Atingerea acestor obiective, păstrând în același timp acuratețea și integritatea experimentelor, poate fi dificilă. Una dintre domeniile comune în care pot apărea erori este sigilareaPlăci PCR, cu o tehnică deficitară care permite evaporarea probelor, modificând pH-ul și, prin urmare, perturbând funcțiile enzimatice și invitând contaminarea. Învățarea modului de sigilare a unuiPlacă PCRelimină corect aceste riscuri și asigură rezultate reproductibile.

Găsiți sigiliul potrivit pentru placa dvs. PCR

Capace tip placă vs. etanșări tip film vs. capace
Capsulesunt o modalitate bună de a sigila farfuria etanș, oferindu-vă în același timp flexibilitatea de a desigila și resigila foarte ușor farfuria după cum aveți nevoie, fără risipă. Cu toate acestea, capacele au câteva dezavantaje cheie.

În primul rând, va trebui să cumpărați capacul specific compatibil, ceea ce le face neversatile. Va trebui să vă asigurați că capacul ales se potrivește plăcii, care depinde de producător, și să alegeți fie bombat, fie plat, în funcție de termociclatorul pe care îl utilizați.

În al doilea rând, aplicarea capacelor pe placă poate fi foarte repetitivă și plictisitoare, existând riscul de contaminare încrucișată dacă puneți capacul greșit pe godeul greșit.

Deși sigiliile din folie sunt mai puțin flexibile în ceea ce privește îndepărtarea și înlocuirea, acestea sunt foarte versatile, deoarece se potrivesc oricărui tip de placă PCR, indiferent de producător. Pot fi pur și simplu tăiate la dimensiune, ceea ce le face foarte eficiente.

O altă opțiune este un capac din placă. Acestea oferă o protecție mai mică decât capacele și garniturile și sunt folosite în principal doar pentru acoperire pe termen scurt, pentru a preveni contaminarea.

Sigilii optice vs. folie de etanșare

Indiferent dacă aveți nevoie de o etanșare optică, transparentă sau de unfolie de aluminiuSigilarea plăcii este decisă de formatul experimental.Filme de etanșare opticăsunt transparente pentru a vă permite să observați probele, protejându-le în același timp și prevenind evaporarea. De asemenea, sunt deosebit de utile în experimentele qPCR care implică efectuarea de măsurători extrem de precise ale fluorescenței direct de pe placă, caz în care veți avea nevoie de o folie de etanșare care filtrează cât mai puțină fluorescență posibil. Este important să vă asigurați că sigiliul sau capacul pe care îl utilizați are un nivel suficient de ridicat de claritate optică pentru a asigura acuratețea citirilor.

Foliile de folie sunt potrivite pentru orice probă sensibilă la lumină sau care urmează să fie depozitată la temperaturi sub 80°C. Din acest motiv, majoritatea probelor destinate depozitării pe termen lung vor necesita o folie de folie. Foliile de folie sunt, de asemenea, perforabile, ceea ce este util fie pentru examinarea godeurilor individuale, fie pentru transferul probelor cu ace. Acest lucru se poate face manual sau ca parte a unei platforme robotizate.

De asemenea, luați în considerare faptul că substanțele agresive care includ acizi, baze sau solvenți vor necesita o etanșare care să le reziste, caz în care o etanșare din folie este probabil mai potrivită.

Folie adezivă vs. folie termoizolantă
Sigilii din folie adezivăsunt foarte simple și ușor de aplicat. Tot ce trebuie să faceți este ca utilizatorul să aplice sigiliul pe placă și să folosească un instrument simplu de aplicare pentru a apăsa și a forma o etanșare strânsă.

Sigilările termice sunt mai avansate, oferind o etanșare mai durabilă, cu rate de evaporare reduse în comparație cu o etanșare adezivă convențională. Această opțiune este potrivită dacă doriți să stocați probe pe termen lung, deși acest lucru implică o cerință suplimentară pentru echipamentul de sigilare a plăcilor.

Cum se sigilează o placă PCR

Metoda de etanșare a plăcilor

Autoadeziv

1. Asigurați-vă că lucrați pe o suprafață de lucru plană și stabilă

2. Scoateți folia din ambalaj și îndepărtați suportul.

3. Așezați cu grijă sigiliul pe placă, asigurându-vă că toate godeurile sunt acoperite.

4. Folosește un instrument aplicator pentru a aplica presiune pe placă. Începe de la un capăt și continuă spre celălalt, apăsând uniform.

5. Repetați acest lucru de mai multe ori

6. Mișcați aplicatorul în jurul puțurilor exterioare, pentru a vă asigura că și acestea sunt etanșate corespunzător.

Sigilii termice

Termosizolarea funcționează prin topirea peliculei până la marginea fiecărui godeu, cu ajutorul unui aparat de sigilare a plăcilor. Pentru a utiliza un aparat de sigilare termică, consultați instrucțiunile furnizate de producătorul echipamentului. Asigurați-vă că producătorul de la care vă procurați echipamentul are o reputație bună, deoarece este foarte important ca sigilarea să fie corectă, eficientă și etanșă.

Sfaturi importante pentru sigilarea plăcilor

a. Când aplicați presiune asupra garniturii, acționați atât pe orizontală, cât și pe verticală pentru a asigura o etanșare corespunzătoare.

b. Este întotdeauna o practică bună să se efectueze un test al oricărui lucru pe care îl se face, iar acest lucru nu este diferit în cazul sigilării plăcilor. Testați cu o placă goală înainte de a utiliza una cu probe.

c. În timpul testării, îndepărtați sigiliul și verificați dacă adezivul a lipit corect, fără goluri. Există o reprezentare vizuală a acestui lucru în primul document de referință. Dacă nu ați sigilat placa corect, atunci când îndepărtați sigiliul, vor exista goluri în care adezivul nu s-a lipit complet de placă.

d. Pentru expedierea și transportul probelor, s-ar putea să fie util să aplicați un sigiliu de plastic peste sigiliul din folie pentru o protecție suplimentară (în special împotriva perforarii).

e. Asigurați-vă întotdeauna că nu există denivelări sau cute atunci când aplicați folia - acestea vor cauza scurgeri și evaporare.