Mikropipeta jest prawdopodobnie najczęściej używanym narzędziem w laboratorium. Używają jej naukowcy z wielu sektorów, w tym środowiska akademickiego, szpitali i laboratoriów medycyny sądowej, a także w rozwoju leków i szczepionek, aby przenosić precyzyjne, bardzo małe ilości cieczy
Choć zauważenie pęcherzyków powietrza na końcówce jednorazowej pipety może być irytujące i frustrujące, jeśli nie zostaną wykryte lub zignorowane, może to mieć ogromny wpływ na wiarygodność i powtarzalność wyników.
Dobra wiadomość jest taka, że istnieje kilka prostych sposobów, które można podjąć, aby zapobiec powstawaniu pęcherzyków powietrza i poprawić wydajność laboratorium, zadowolenie operatora, a także dokładność i precyzję wyników.
Poniżej przyjrzymy się skutkom pojawienia się pęcherzyka powietrza w końcówce pipety i wyjaśnimy, co należy zrobić.
Konsekwencje powstawania baniek wKońcówka pipety
Nawet jeśli używasz najdokładniejszych, najlepszych, dobrze utrzymanych, serwisowanych i skalibrowanych pipet, wiarygodność wyników może być ograniczona przez błędy laboratoryjne. Gdy do środka dostaną się pęcherzyki,wskazówkamoże mieć różne skutki.
● Gdy użytkownik zauważy pęcherzyk powietrza, musi poświęcić czas na odpowiednie dozowanie zasysanej cieczy, wysunąć końcówkę i rozpocząć proces od nowa.
● Niewykryte pęcherzyki powietrza mogą skutkować niskim transferem objętości, co może zmienić stężenie mieszanin reakcyjnych, prowadząc do nieudanych eksperymentów i uzyskania wątpliwych lub mało wiarygodnych wyników.
Wyniki te mogą mieć kilka konsekwencji (1).
● Zmniejszona wydajność laboratorium – testy i analizy będą musiały być powtarzane, co wiąże się z kosztami pracy i materiałów, które mogą być dość znaczne.
● Wątpliwe lub nieprawidłowe wyniki testów – opublikowanie nieprawidłowych wyników może mieć poważniejsze konsekwencje, w tym błędną diagnozę i złe rokowanie dla pacjenta.
● Wycofanie rękopisów z czasopism – Jeśli kolegom nie uda się powtórzyć wyników z powodu pęcherzyków powietrza powodujących niedokładne wyniki, artykuły mogą zostać wycofane.
Najlepsze praktyki zapobiegające powstawaniu pęcherzyków powietrza
W większości przypadków pęcherzyki powietrza w końcówkach pipet są spowodowane błędem operatora. Zła technika spowodowana niewystarczającym przeszkoleniem lub zmęczeniem jest zwykle podstawowym problemem.
Pipetowanie jest czynnością wymagającą 110% uwagi, odpowiedniego przeszkolenia i praktyki, aby uzyskać spójne i dokładne wyniki.
Chociaż istnieje wiele sposobów na ograniczenie ogólnych błędów pipetowania, poniżej przedstawiamy kilka najlepszych praktyk, które można zastosować, aby uniknąć pęcherzyków powietrza wkońcówki pipet.
Ulepsz technikę użytkownika
Pipetuj powoli
Jeśli tłok zostanie zwolniony zbyt szybko podczas zasysania, do końcówki mogą dostać się pęcherzyki powietrza. Może to być szczególnie problematyczne podczas przenoszenia lepkich cieczy. Podobny efekt może wystąpić, jeśli tłok zostanie zwolniony zbyt szybko po dozowaniu.
Aby uniknąć powstawania pęcherzyków powietrza podczas zasysania, należy poruszać tłokiem pipet ręcznych w sposób płynny i regularny, stosując stałą siłę.
Użyj właściwej głębokości zanurzenia
Jeśli końcówka pipety nie zostanie zanurzona wystarczająco głęboko poniżej menisku zbiornika z cieczą, może to spowodować zasysanie powietrza i powstawanie pęcherzyków powietrza.
Jednak zanurzenie końcówki zbyt głęboko może spowodować zassanie większej ilości cieczy ze względu na zwiększone ciśnienie lub na zewnątrz końcówki mogą pojawić się krople, dlatego ważne jest, aby zanurzyć końcówkękońcówka pipetyna odpowiednią głębokość.
Zalecana głębokość różni się w zależności od rozmiaru, typu i marki pipety. Podczas gdy zalecenia producenta powinny być przestrzegane, oto ogólny przewodnik dostarczony przez National Physical Laboratory.
Przewodnik po głębokości zanurzenia końcówki
Objętość pipety (µl) i głębokość zanurzenia (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1000: 2 – 4
- 1000 – 5000: 2 – 5
Wstępne zwilżenieKońcówki pipet
W przypadku pipetowania objętości większych niż 10 µlkońcówki pipetZazwyczaj są one wstępnie zwilżane poprzez wielokrotne napełnianie ich dozowaną cieczą i wydalanie jej do odpadów w celu zwiększenia dokładności.
Niezwilżenie ich może skutkować pęcherzykami powietrza, szczególnie w przypadku stosowania lepkich lub hydrofobowych cieczy. Aby uniknąć pęcherzyków powietrza, upewnij się, że końcówki są zwilżone przed pipetowaniem objętości większej niż 10 µl.
W razie potrzeby stosuj techniki odwrotnego pipetowania
Substancje lepkie: Częstym problemem występującym przy pipetowaniu substancji lepkich, takich jak roztwory białek lub kwasów nukleinowych, gliceryna i Tween 20/40/60/80, jest częste tworzenie się pęcherzyków w przypadku stosowania techniki pipetowania do przodu.
Powolne pipetowanie, z wykorzystaniem techniki odwrotnego pipetowania, zmniejsza ryzyko powstawania pęcherzyków powietrza podczas przenoszenia lepkich roztworów.
Technika ELISA
Zaleca się również pipetowanie odwrotne przy pipetowaniu małych objętości doPłytki mikrotestowe 96-dołkowedla technik ELISA. Gdy pęcherzyki powietrza są wciągane do pipety lub dozowane do studzienek podczas dodawania odczynników, może to mieć wpływ na wartości gęstości optycznej i wyniki. Zaleca się odwrotne pipetowanie, aby zminimalizować lub wyeliminować ten problem.
Używaj ergonomicznych pipet
Stare pipety, które nie zostały zaprojektowane z myślą o ergonomii, wymagają większego wysiłku fizycznego, męczysz się, a Twoja technika pipetowania staje się niechlujna i słaba. Błędy wymienione powyżej, takie jak szybkie zwolnienie tłoka, mogą występować częściej.
Inwestując w bardziej ergonomiczne rozwiązanie, będziesz w stanie zachować doskonałą technikę i zapobiegniesz tworzeniu się pęcherzyków powietrza z powodu złej techniki.
Znajdź czas na przeszkolenie personelu
Regularne szkolenie i ocena personelu w zakresie technik pipetowania może zapewnić redukcję błędów operatora i tworzenia się pęcherzyków powietrza.
Rozważ więcej zautomatyzowanych rozwiązań
Jak wspomniano powyżej, większość pęcherzyków powietrza powstaje z winy operatora. Możliwe jest zmniejszenie błędów operatora i komfortu poprzez stosowanie elektronicznych pipet lub elastycznej platformy do obsługi cieczy, takiej jakRobot do obsługi cieczy Agilent Bravo.
Użyj dobrej jakościKońcówki pipet
Mikropipety są zazwyczaj kupowane z rozwagą, ale często mało uwagi poświęca się jakości jednorazowej końcówki pipety. Ze względu na wpływ końcówki na wyniki pipetowania, norma ISO 8655 wymaga dodatkowej kalibracji, jeśli używane są pipety i końcówki od różnych producentów.
Może to być spowodowane tym, że wiele tanich końcówek na pierwszy rzut oka wydaje się w porządku, lecz po dokładniejszym przyjrzeniu się mogą pojawić się na nich przebłyski, wystające elementy, zarysowania i pęcherzyki powietrza, być pogięte lub zawierać zanieczyszczenia.
Zakup końcówek dobrej jakości, wykonanych z wysokogatunkowego polipropylenu, może zredukować ryzyko powstawania pęcherzyków powietrza.
Podsumowując
Pojawienie się pęcherzyków powietrza w końcówce pipety ma wpływ na wydajność laboratorium, a także na niedokładność i niedokładność wyników. Zwróciliśmy uwagę na kilka rzeczy, które możesz zrobić, aby uniknąć przedostawania się pęcherzyków powietrza do końcówki pipety.końcówka pipety.
Jednakże, jeśli jakość jest słabakońcówki pipetpowodują przedostawanie się pęcherzyków powietrza do końcówki pipety, z przyjemnością poinformujemy, że nasze uniwersalne dopasowaniekońcówki pipetsą wykonane według najwyższych standardów i z najwyższej jakości, czystego polipropylenu.
Firma biomedyczna Suzhou Aceprodukujemy wysokiej jakości uniwersalne końcówki do pipet o objętości 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 i 1250 µL, 96 końcówek/stojak. Wyjątkowa trwałość – wszystkie stojaki na końcówki ACE wytrzymują wymagania użytkowania z pipetami wielokanałowymi. Sterylne, filtrujące, wolne od RNazy/DNazy i niepirogenne.
Zapraszamy do kontaktu w celu uzyskania szczegółowych informacji.
Czas publikacji: 29-12-2022