Slik bruker du pipetter og spisser riktig

Akkurat som en kokk som bruker kniv, trenger en forsker pipetteringsferdigheter. En erfaren kokk kan kanskje skjære en gulrot i strimler, tilsynelatende uten å tenke seg om, men det skader aldri å huske på noen retningslinjer for pipettering – uansett hvor erfaren forskeren er. Her gir tre eksperter sine beste tips.

«Man må være nøye med å bruke riktig teknikk når man dispenserer væske manuelt», sier Magali Gaillard, seniorleder for porteføljeforvaltning i MLH Business Line i Gilson (Villiers-le-bel, Frankrike). «Noen av de vanligste pipetteringsfeilene er knyttet til uforsiktig bruk av pipettespisser, inkonsekvent rytme eller timing, og feil håndtering av pipetten.»

Noen ganger velger en forsker til og med feil pipette. Som Rishi Porecha, global produktsjef hosRaininInstruments (Oakland, CA) sier: «Noen vanlige feil ved pipettering inkluderer å ikke bruke riktig volumpipette for en spesifikk oppgave og å bruke en luftforskyvningspipette til å håndtere ikke-vandig væske.» Med viskøse væsker bør en positiv fortrengningspipette alltid brukes.

Før man går inn på spesifikke pipetteringsprosedyrer, bør man vurdere noen generelle konsepter. «Hver gang pipettebrukere begynner å jobbe for dagen, bør de vurdere hvilket eksperiment de gjør, hvilke væsker de jobber med og hvilken gjennomstrømning de ønsker før de velger en pipette», sier Porecha. «Realistisk sett har ingen laboratorier alle pipettene en bruker kan ønske seg, men hvis en bruker ser på hvilke verktøy som er tilgjengelige i laboratoriet og avdelingen, kan de få en bedre ide om hvilke eksisterende pipetter de skal bruke i en analyse, eller hvilke pipetter de kanskje vil kjøpe.»

Funksjonene som er tilgjengelige i dagens pipetter strekker seg utover selve enheten. Fremskritt innen væskehåndtering har gjort det mulig for brukere å koble pipetten sin til skyen. Med denne tilkoblingen kan en bruker laste ned protokoller eller lage tilpassede. Pipetteringsdata kan til og med registreres i skyen, noe som er én måte å identifisere eventuelle feiltrinn og forbedre pipetteringsprosessen, spesielt ved å spore den pågående nøyaktigheten, eller mangelen på sådan.

Med riktig utstyr for hånden er den neste utfordringen å få trinnene riktige.

Nøkkelen til suksess

Med en luftforskyvningspipette øker følgende trinn sannsynligheten for nøyaktig og gjentatt måling av et bestemt volum:

1. Still inn volumet på pipetten.
2. Trykk ned stempelet.
3. Senk spissen ned til riktig dybde, som kan variere avhengig av pipette og spiss, og slipp stempelet forsiktig tilbake til hvileposisjon.
4. Vent omtrent ett sekund til væsken renner inn itupp.
5. Plasser pipetten – holdt i 10–45 grader – mot veggen i mottakskammeret, og trykk stempelet forsiktig ned til første stopp.
6. Vent ett sekund, og trykk deretter stempelet ned til det andre stoppet.
7. Skyv spissen opp langs beholderveggen for å fjerne pipetten.
8. La stempelet gå tilbake til hvileposisjonen.