導入
PCRプレート長年研究室で欠かせない存在であったシーリングは、研究室のスループット向上やワークフローの自動化が進む現代において、ますます普及しつつあります。実験の正確性と完全性を維持しながらこれらの目的を達成することは、困難な場合があります。エラーが発生しやすい箇所の一つは、シーリングです。PCRプレート不適切な方法ではサンプルの蒸発を招き、pH値を変化させて酵素の機能を阻害し、汚染を招く可能性があります。PCRプレートこれらのリスクを適切に排除し、再現可能な結果を保証します。
PCRプレートに適したシールを見つける
プレートキャップ vs. フィルムシール vs. 蓋
キャップキャップは、プレートをしっかりと密閉するのに適した方法です。また、必要に応じて簡単に開封・再封ができ、無駄を省くことができます。しかし、キャップにはいくつか重要な欠点があります。
まず、互換性のあるキャップを購入する必要がありますが、汎用性はありません。キャップがプレートに適合することを確認する必要があります。適合性はメーカーによって異なりますが、使用するサーモサイクラーに合わせてドーム型かフラット型かを選択してください。
第二に、プレートにキャップを付ける作業は非常に反復的で面倒であり、間違ったキャップを間違ったウェルに付けると交差汚染の危険があります。
フィルムシールは取り外しや交換の柔軟性に欠けますが、メーカーを問わずあらゆるPCRプレートに適合するため、非常に汎用性が高く、サイズに合わせて簡単にカットできるため、非常に効果的です。
もう一つの選択肢はプレート蓋です。これはキャップやシールよりも保護力が低く、主に汚染を防ぐための短期的なカバーとしてのみ使用されます。
光学シールと箔フィルムシール
光学的に透明なシールが必要な場合でも、アルミホイルフィルムプレートをどのようにシールするかは、実験形式によって決まります。光学シーリングフィルム透明なので、サンプルを保護し、蒸発を防ぎながら観察できます。また、プレートから直接高精度な蛍光測定を行うqPCR実験にも特に有用です。この場合、蛍光を可能な限り遮断するシーリングフィルムが必要になります。正確な測定結果を得るためには、使用するシールまたはキャップが十分な光学的透明性を備えていることを確認することが重要です。
フォイルフィルムは、光に敏感なサンプルや80℃以下で保管されるサンプルに適しています。そのため、長期保管されるサンプルのほとんどにはフォイルフィルムが必要になります。また、フォイルフィルムは穿孔可能なため、個々のウェルの検査やニードルによるサンプルの移送に便利です。これは、手作業またはロボットプラットフォームの一部として行うことができます。
また、酸、塩基、溶剤などの攻撃的な物質には、それらに耐えられるシールが必要になるため、その場合にはホイルシールの方が適していると考えられます。
接着剤とヒートシールフィルム
粘着フィルムシール非常にシンプルで簡単に貼り付けられます。シールをプレートに貼り付け、シンプルなアプリケーターツールで押し下げてしっかりと密閉するだけです。
ヒートシールはより高度な技術で、従来の粘着シールに比べて蒸発率が低く、シールの持続期間が長くなります。このオプションはサンプルを長期保存する場合に適していますが、プレートシール装置の追加要件が課せられます。
PCRプレートの密封方法
プレートシール方式
粘着式
1. 平らで安定した作業台で作業していることを確認してください
2. フィルムを包装から取り出し、裏紙をはがします。
3. 全てのウェルが覆われていることを確認しながら、シールをプレートに慎重に置きます。
4. アプリケーターツールを使ってプレート全体に圧力をかけます。片方の端から反対側まで均等に押し付けます。
5. これを何度も繰り返します
6. アプリケーターを外側のウェルの周りに動かし、これらも適切に密閉されていることを確認します。
ヒートシール
ヒートシールは、プレートシーラーを用いてフィルムを各ウェルの縁まで溶かすことで機能します。ヒートシーラーの操作方法については、機器メーカーの取扱説明書を参照してください。シールが適切で効果的かつ防水であることが非常に重要であるため、機器を購入するメーカーが信頼できるメーカーであることを確認してください。
プレートシーリングのヒント
a. シールに圧力をかけるときは、水平方向と垂直方向の両方向から圧力をかけ、適切なシールを確保してください。
b. 何をするにしても、必ずテストランを行うことをお勧めします。これはプレートシーリングでも同様です。サンプルを入れたプレートを使用する前に、空のプレートでテストしてください。
c. テストを行う際は、シールを剥がし、接着剤が隙間なくしっかりと接着されていることを確認してください。最初の参考資料には、この点について図解が掲載されています。プレートが適切にシールされていない場合、シールを剥がした際に、接着剤がプレートに完全に接着されていない部分に隙間が生じます。
d. サンプルを発送および輸送する場合、保護を強化するために（特に穴あけに対する保護）、ホイルシールの上にプラスチックシールを貼ると効果的です。
e. フィルムを貼る際は、必ず凹凸やシワがないことを確認してください。これらは漏れや蒸発の原因となります。
投稿日時: 2022年11月23日