مقدمه
پلیتهای PCRکه سالهاست جزء اصلی آزمایشگاهها هستند، در محیط مدرن، با افزایش توان عملیاتی آزمایشگاهها و بهکارگیری فزاینده اتوماسیون در گردش کارشان، رواج بیشتری پیدا میکنند. دستیابی به این اهداف ضمن حفظ دقت و صحت آزمایشها میتواند دشوار باشد. یکی از حوزههای رایجی که خطاها میتوانند در آن رخنه کنند، آببندی ...پلیتهای PCRبا تکنیک ضعیف، امکان تبخیر نمونهها، تغییر pH و در نتیجه اختلال در عملکردهای آنزیمی و ایجاد آلودگی وجود دارد. یادگیری نحوه آببندیپلیت PCRبه درستی این خطرات را از بین میبرد و نتایج تکرارپذیر را تضمین میکند.
مهر و موم مناسب برای پلیت PCR خود را پیدا کنید
دربهای پلیت در مقابل درزگیرهای فیلمی در مقابل دربها
کلاهکهاروش خوبی برای آببندی محکم پلیت شما هستند، در عین حال به شما این انعطافپذیری را میدهند که به راحتی و بدون هیچ گونه ضایعاتی پلیت را باز و دوباره ببندید. با این حال، درپوشها چند ایراد اساسی دارند.
اولاً، شما باید کلاهک مخصوصی را که با آن سازگار است، خریداری کنید که باعث میشود آنها همهکاره نباشند. شما باید مطمئن شوید که کلاهکی که انتخاب میکنید با صفحه متناسب است، که این به سازنده آن بستگی دارد، و بر اساس دستگاه ترموسایکلر مورد استفاده، کلاهک گنبدی یا تخت را انتخاب کنید.
ثانیاً، قرار دادن درپوشها روی پلیت میتواند بسیار تکراری و خستهکننده باشد، و اگر درپوش اشتباه را روی چاهک اشتباه قرار دهید، خطر آلودگی متقابل وجود دارد.
اگرچه مهر و مومهای فیلمی از نظر برداشتن و تعویض انعطافپذیری کمتری دارند، اما بسیار متنوع هستند زیرا با هر نوع پلیت PCR، صرف نظر از سازنده، سازگار هستند. آنها را میتوان به سادگی به اندازه دلخواه برش داد که این امر آنها را بسیار مؤثر میکند.
گزینه دیگر، درب بشقابی است. این دربها محافظت کمتری نسبت به درپوشها و درزگیرها ارائه میدهند و عمدتاً فقط برای پوشش کوتاهمدت و جلوگیری از آلودگی استفاده میشوند.
آببندهای نوری در مقابل آببندهای فویلی
چه به یک مهر و موم نوری، شفاف یا ... نیاز داشته باشیدفیلم فویل آلومینیومیاینکه پلیت خود را چگونه آببندی کنید، به فرمت آزمایشی شما بستگی دارد.فیلمهای آببندی نوریشفاف هستند تا به شما امکان مشاهده نمونهها را بدهند، در عین حال از آنها محافظت کرده و از تبخیر جلوگیری میکنند. آنها همچنین به ویژه در آزمایشهای qPCR که شامل اندازهگیریهای بسیار دقیق فلورسانس مستقیماً از صفحه هستند، مفید هستند، که در این صورت به یک فیلم آببندی نیاز خواهید داشت که تا حد امکان فلورسانس کمی را فیلتر کند. مهم است که مطمئن شوید مهر و موم یا درپوشی که استفاده میکنید از وضوح نوری کافی برخوردار است تا از صحت قرائتها اطمینان حاصل شود.
فیلمهای فویل برای هر نمونهای که به نور حساس است یا قرار است در دمای زیر 80 درجه سانتیگراد نگهداری شود، مناسب هستند. به همین دلیل، اکثر نمونههایی که برای نگهداری طولانی مدت در نظر گرفته شدهاند، به یک فیلم فویل نیاز دارند. فیلمهای فویل همچنین قابل سوراخ شدن هستند که برای بررسی چاهکهای منفرد یا انتقال نمونهها توسط سوزن مفید است. این کار میتواند به صورت دستی یا به عنوان بخشی از یک پلتفرم رباتیک انجام شود.
همچنین در نظر داشته باشید که مواد خورندهای که شامل اسیدها، بازها یا حلالها هستند، به آببندی نیاز دارند که بتواند در برابر آنها مقاومت کند، که در این صورت احتمالاً آببندی فویلی مناسبتر است.
چسب در مقابل فیلم آببندی حرارتی
آببندهای فیلم چسبیبسیار سرراست و آسان برای استفاده هستند. تنها چیزی که نیاز دارید این است که کاربر درزگیر را روی صفحه اعمال کند و از یک ابزار ساده برای فشار دادن و ایجاد یک درزگیر محکم استفاده کند.
سیلهای حرارتی پیشرفتهتر هستند و در مقایسه با سیلهای چسبی معمولی، سیل بادوامتری ارائه میدهند که میزان تبخیر کمتری دارد. این گزینه در صورتی مناسب است که به دنبال نگهداری نمونهها در درازمدت باشید، اگرچه این روش نیاز به تجهیزات آببندی صفحهای اضافی دارد.
نحوه پلمپ کردن پلیت PCR
روش آب بندی صفحه
خودچسب
۱. مطمئن شوید که روی یک سطح کار صاف و پایدار کار میکنید.
۲. فیلم را از بستهبندی آن خارج کرده و پشت آن را بردارید.
۳. با دقت درزگیر را روی پلیت قرار دهید، در حالی که مطمئن شوید همه چاهکها پوشانده شدهاند
۴. از یک ابزار فشاری برای اعمال فشار در سراسر صفحه استفاده کنید. از یک سر شروع کنید و به سمت سر دیگر بروید و به طور یکنواخت فشار دهید.
۵. این کار را چندین بار تکرار کنید
۶. اپلیکاتور خود را در اطراف چاهکهای بیرونی حرکت دهید تا مطمئن شوید که آنها نیز به درستی آببندی شدهاند.
مهر و موم های حرارتی
درزگیرهای حرارتی با ذوب کردن فیلم تا لبه هر چاهک، با کمک یک درزگیر صفحهای، کار میکنند. برای کار با درزگیر حرارتی، به دستورالعملهای ارائه شده توسط سازنده تجهیزات مراجعه کنید. مطمئن شوید که سازندهای که تجهیزات خود را از آن تهیه میکنید معتبر باشد، زیرا بسیار مهم است که درزگیر مناسب، مؤثر و ضد آب باشد.
نکات مهم آب بندی بشقاب
الف. هنگام اعمال فشار به آببند، آن را در هر دو جهت افقی و عمودی فشار دهید تا آببندی مناسبی حاصل شود.
ب. همیشه خوب است که هر کاری را که انجام میدهید، یک بار امتحان کنید، و این در مورد آببندی پلیت نیز تفاوتی ندارد. قبل از استفاده از پلیت حاوی نمونه، آن را با یک پلیت خالی امتحان کنید.
ج. هنگام آزمایش، پلمپ را بردارید و بررسی کنید که چسب به درستی و بدون هیچ شکافی چسبیده باشد. نمایش بصری این موضوع در اولین سند مرجع وجود دارد. اگر صفحه را به درستی پلمپ نکرده باشید، هنگام برداشتن پلمپ، شکافهایی وجود خواهد داشت که در آنها چسب به طور کامل به صفحه نچسبیده است.
د. برای حمل و نقل نمونهها، ممکن است استفاده از یک پوشش پلاستیکی روی پوشش فویل برای محافظت بیشتر (به خصوص در برابر سوراخ شدن) مفید باشد.
ه. همیشه هنگام استفاده از فیلم مطمئن شوید که هیچ برآمدگی یا چین و چروکی وجود ندارد - این موارد باعث نشت و تبخیر میشوند.
زمان ارسال: ۲۳ نوامبر ۲۰۲۲