Introducción
Placas de PCR, un elemento básico del laboratorio durante muchos años, se están volviendo aún más comunes en el entorno moderno a medida que los laboratorios aumentan su productividad y emplean cada vez más la automatización en sus flujos de trabajo. Lograr estos objetivos, preservando al mismo tiempo la precisión y la integridad de los experimentos, puede ser difícil. Una de las áreas comunes donde pueden surgir errores es el sellado de...Placas de PCR, con una técnica deficiente que permite la evaporación de las muestras, alterando el pH y, por lo tanto, alterando las funciones enzimáticas, y favoreciendo la contaminación. Aprender a sellar unplaca de PCRelimina correctamente estos riesgos y garantiza resultados reproducibles.
Encuentre el sello adecuado para su placa PCR
Tapas de placa vs. sellos de película vs. tapas
GorrasSon una buena manera de sellar la placa con un sello hermético, a la vez que ofrecen la flexibilidad de abrir y volver a sellar la placa fácilmente según sea necesario, sin desperdicios. Sin embargo, las tapas presentan un par de inconvenientes clave.
En primer lugar, deberá comprar la tapa específica compatible, lo que las hace poco versátiles. Deberá asegurarse de que la tapa que elija se ajuste a la placa (lo cual depende del fabricante) y elegir entre una tapa abovedada o plana según el termociclador que utilice.
En segundo lugar, colocar las tapas en la placa puede ser una tarea muy repetitiva y tediosa, con el riesgo de contaminación cruzada si se coloca la tapa incorrecta en el pocillo incorrecto.
Si bien los sellos de película son menos flexibles a la hora de retirarlos y reemplazarlos, son muy versátiles, ya que se adaptan a cualquier tipo de placa PCR, independientemente del fabricante. Se pueden cortar fácilmente a la medida, lo que los hace muy eficaces.
Otra opción es una tapa de placa. Estas ofrecen menos protección que las tapas y los sellos, y se utilizan principalmente como cobertura temporal para prevenir la contaminación.
Sellos ópticos vs. sellos de película de aluminio
Ya sea que necesite un sello óptico transparente o unpelícula de papel de aluminioEl sellado de tu plato lo decide tu formato experimental.Películas de sellado ópticoSon transparentes para permitir la observación de las muestras, a la vez que las protegen y evitan la evaporación. También son especialmente útiles en experimentos de qPCR que implican mediciones de fluorescencia de alta precisión directamente de la placa. En este caso, se necesita una película de sellado que filtre la menor cantidad posible de fluorescencia. Es importante asegurarse de que el sello o tapa que se utilice tenga una claridad óptica suficiente para garantizar la precisión de las lecturas.
Las películas de aluminio son adecuadas para cualquier muestra fotosensible o que deba almacenarse a menos de 80 °C. Por ello, la mayoría de las muestras destinadas a un almacenamiento prolongado requieren una película de aluminio. Además, las películas de aluminio son perforables, lo cual resulta útil para examinar pocillos individuales o para la transferencia de muestras mediante agujas. Esto puede hacerse manualmente o como parte de una plataforma robótica.
Tenga en cuenta también que las sustancias agresivas que incluyen ácidos, bases o disolventes requerirán un sello que pueda soportarlos, en cuyo caso un sello de aluminio probablemente sea más apropiado.
Película adhesiva vs. película termosellable
Sellos de película adhesivaSon muy sencillos y fáciles de aplicar. Solo se necesita aplicar el sello a la placa y usar un aplicador sencillo para presionar y sellar herméticamente.
Los sellados térmicos son más avanzados y ofrecen un sellado más duradero con menor tasa de evaporación en comparación con un sellado adhesivo convencional. Esta opción es adecuada si se desea almacenar muestras a largo plazo, aunque implica un requisito adicional para el equipo de sellado de placas.
Cómo sellar una placa de PCR
Método de sellado de placas
Autoadhesivo
1. Asegúrese de trabajar en una superficie de trabajo plana y estable.
2. Retire la película de su embalaje y retire el soporte.
3. Coloque con cuidado el sello sobre la placa, asegurándose de que todos los pocillos estén cubiertos.
4. Use un aplicador para aplicar presión sobre la placa. Comience por un extremo y continúe hacia el otro, presionando uniformemente.
5. Repite esto varias veces.
6. Pase el aplicador alrededor de los pocillos externos para asegurarse de que también estén correctamente sellados.
Sellos térmicos
Los selladores térmicos funcionan fundiendo la película hasta el borde de cada pocillo con la ayuda de una selladora de placas. Para utilizar una selladora térmica, consulte las instrucciones del fabricante del equipo. Asegúrese de que el fabricante al que adquiera el equipo sea confiable, ya que es fundamental que el sellado sea adecuado, eficaz y hermético.
Consejos principales para el sellado de placas
a. Al aplicar presión al sello, hágalo tanto en dirección horizontal como vertical para asegurar un sellado adecuado.
b. Siempre es recomendable realizar una prueba de lo que esté haciendo, y esto también ocurre con el sellado de placas. Pruebe con una placa vacía antes de usar una con muestras.
c. Durante la prueba, retire el sello y compruebe que el adhesivo esté bien adherido, sin espacios. El primer documento de referencia muestra esto visualmente. Si no ha sellado la placa correctamente, al retirar el sello quedarán espacios donde el adhesivo no se haya adherido completamente a la placa.
d. Para el envío y transporte de muestras, puede resultar útil aplicar un sello de plástico sobre el sello de aluminio para mayor protección (especialmente contra perforaciones).
e. Asegúrese siempre de que no haya protuberancias ni arrugas al aplicar la película, ya que esto provocará fugas y evaporación.
Hora de publicación: 23 de noviembre de 2022