So versiegeln Sie eine PCR-Platte

Einführung

PCR-Platten, seit vielen Jahren ein fester Bestandteil des Labors, gewinnen in modernen Umgebungen immer mehr an Bedeutung, da Labore ihren Durchsatz steigern und zunehmend Automatisierung in ihren Arbeitsabläufen einsetzen. Das Erreichen dieser Ziele unter Wahrung der Genauigkeit und Integrität von Experimenten kann schwierig sein. Ein häufiger Fehlerbereich ist die Versiegelung vonPCR-Platten, mit schlechter Technik, die zur Verdunstung von Proben führt, den pH-Wert verändert und dadurch die enzymatischen Funktionen stört und Kontaminationen begünstigt. Lernen, wie man einePCR-Plattebeseitigt diese Risiken korrekt und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.

Finden Sie die richtige Versiegelung für Ihre PCR-Platte

Plattenkappen vs. Foliensiegel vs. Deckel
KappenSie sind eine gute Möglichkeit, Ihren Teller dicht zu verschließen und gleichzeitig die Flexibilität zu haben, den Teller bei Bedarf ganz einfach und ohne Abfall zu öffnen und wieder zu verschließen. Verschlüsse haben jedoch einige entscheidende Nachteile.

Zunächst müssen Sie eine passende Kappe kaufen, was die Vielseitigkeit einschränkt. Achten Sie darauf, dass die gewählte Kappe auf die Platte passt (dies hängt vom Hersteller ab) und wählen Sie je nach verwendetem Thermocycler eine gewölbte oder flache Kappe.

Zweitens kann das Aufbringen der Kappen auf die Platte sehr repetitiv und mühsam sein, und es besteht die Gefahr einer Kreuzkontamination, wenn Sie die falsche Kappe auf die falsche Vertiefung setzen.

Foliensiegel sind zwar weniger flexibel beim Entfernen und Ersetzen, dafür aber sehr vielseitig, da sie auf jede Art von PCR-Platte passen, unabhängig vom Hersteller. Sie lassen sich einfach auf die passende Größe zuschneiden und sind daher sehr effektiv.

Eine weitere Möglichkeit ist ein Tellerdeckel. Diese bieten weniger Schutz als Kappen und Dichtungen und werden hauptsächlich nur zum kurzfristigen Abdecken verwendet, um Verunreinigungen zu vermeiden.

Optische Versiegelungen vs. Folienversiegelungen

Ob Sie eine optische, klare Versiegelung oder eineAluminiumfolieDie Art und Weise, wie Sie Ihre Platte versiegeln, hängt von Ihrem experimentellen Format ab.Optische Versiegelungsfoliensind transparent, sodass Sie Proben beobachten können, diese aber gleichzeitig schützen und Verdunstung verhindern. Sie eignen sich besonders für qPCR-Experimente, bei denen hochpräzise Fluoreszenzmessungen direkt von der Platte durchgeführt werden. In diesem Fall benötigen Sie eine Versiegelungsfolie, die möglichst wenig Fluoreszenz herausfiltert. Achten Sie darauf, dass die verwendete Versiegelung oder Kappe eine ausreichend hohe optische Klarheit aufweist, um genaue Messwerte zu gewährleisten.

Folien eignen sich für lichtempfindliche Proben und Proben, die bei Temperaturen unter 80 °C gelagert werden sollen. Daher benötigen die meisten Proben, die für eine Langzeitlagerung bestimmt sind, Folien. Folien sind zudem durchstechbar, was sowohl für die Untersuchung einzelner Vertiefungen als auch für den Probentransfer mit Nadeln nützlich ist. Dies kann manuell oder mithilfe einer Roboterplattform erfolgen.

Bedenken Sie auch, dass aggressive Substanzen wie Säuren, Basen oder Lösungsmittel eine Versiegelung erfordern, die diesen Substanzen standhält. In diesem Fall ist eine Folienversiegelung wahrscheinlich besser geeignet.

Klebstoff vs. Heißsiegelfolie
KlebefoliensiegelDie Anwendung ist kinderleicht. Sie müssen lediglich die Versiegelung auf die Platte auftragen und mit einem einfachen Applikatorwerkzeug andrücken, um eine dichte Versiegelung zu erzielen.

Heißsiegel sind eine fortschrittlichere Methode und bieten eine länger anhaltende Versiegelung mit geringerer Verdunstungsrate im Vergleich zu herkömmlichen Klebesiegeln. Diese Option eignet sich für die langfristige Lagerung von Proben, erfordert jedoch zusätzliche Plattenversiegelungsgeräte.

So versiegeln Sie eine PCR-Platte

Plattenversiegelungsmethode

Selbstklebend

1. Stellen Sie sicher, dass Sie auf einer ebenen und stabilen Arbeitsfläche arbeiten

2. Nehmen Sie die Folie aus der Verpackung und entfernen Sie die Schutzfolie

3. Legen Sie die Dichtung vorsichtig auf die Platte und achten Sie dabei darauf, dass alle Vertiefungen abgedeckt sind.

4. Üben Sie mit einem Applikator Druck auf die Platte aus. Beginnen Sie an einem Ende und arbeiten Sie sich zum anderen vor, wobei Sie gleichmäßig drücken.

5. Wiederholen Sie dies mehrmals

6. Führen Sie Ihren Applikator um die äußeren Vertiefungen, um sicherzustellen, dass diese auch richtig abgedichtet sind.

Heißsiegel

Heißsiegelverfahren funktionieren, indem die Folie mithilfe eines Plattenversiegelers am Rand jeder Vertiefung angeschmolzen wird. Beachten Sie zur Bedienung eines Heißsiegelgeräts die Anweisungen des Geräteherstellers. Achten Sie auf einen seriösen Hersteller, da eine einwandfreie, effektive und wasserdichte Versiegelung sehr wichtig ist.

Top-Tipps zur Plattenversiegelung

a. Üben Sie beim Druck auf die Dichtung sowohl horizontal als auch vertikal Druck aus, um eine ordnungsgemäße Abdichtung zu gewährleisten.

b. Es ist immer ratsam, einen Testlauf durchzuführen, egal was Sie tun. Das ist auch beim Versiegeln von Platten nicht anders. Testen Sie mit einer leeren Platte, bevor Sie eine mit Proben verwenden.

c. Entfernen Sie zum Testen die Versiegelung und prüfen Sie, ob der Klebstoff richtig und ohne Lücken haftet. Eine visuelle Darstellung hierzu finden Sie im ersten Referenzdokument. Wenn Sie die Platte nicht richtig versiegelt haben, entstehen beim Entfernen der Versiegelung Lücken, da der Klebstoff nicht vollständig mit der Platte verbunden ist.

d. Für den Versand und Transport von Proben kann es hilfreich sein, für zusätzlichen Schutz (insbesondere gegen Durchstechen) zusätzlich ein Kunststoffsiegel auf die Folienversiegelung aufzubringen.

e. Achten Sie beim Anbringen der Folie immer darauf, dass keine Unebenheiten oder Falten entstehen – diese führen zu Undichtigkeiten und Verdunstung