Ligesom en kok, der bruger en kniv, har en videnskabsmand brug for pipetteringsevner. En erfaren kok kan måske skære en gulerod i bånd, tilsyneladende uden at tænke over det, men det skader aldrig at huske på nogle pipetteringsretningslinjer – uanset hvor erfaren videnskabsmanden er. Her giver tre eksperter deres bedste tips.
"Man skal være omhyggelig med at bruge den rigtige teknik, når man manuelt dispenserer væske," siger Magali Gaillard, senior manager, porteføljestyring, MLH Business Line, Gilson (Villiers-le-bel, Frankrig). "Nogle af de mest almindelige pipetteringsfejl er relateret til uforsigtig brug af pipettespidser, inkonsekvent rytme eller timing og forkert håndtering af pipetten."
Nogle gange vælger en videnskabsmand endda den forkerte pipette. Som Rishi Porecha, global produktchef hosRaininInstruments (Oakland, CA) siger: "Nogle almindelige fejl ved pipettering omfatter ikke at bruge den korrekte volumenpipette til en specifik opgave og at bruge en luftforskydningspipette til at håndtere ikke-vandig væske." Med viskose væsker bør der altid anvendes en positiv forskydningspipette.
Før man går i gang med specifikke pipetteringsprocedurer, bør man overveje nogle generelle koncepter. "Hver gang pipettebrugere begynder at arbejde for dagen, bør de overveje, hvilket eksperiment de udfører, hvilke væsker de arbejder med, og hvilken kapacitet de ønsker, før de vælger en pipette," siger Porecha. "Realistisk set har intet laboratorium alle de pipetter, en bruger måtte ønske sig, men hvis en bruger ser på, hvilke værktøjer der er tilgængelige i laboratoriet og afdelingen, kan de få en bedre idé om, hvilke eksisterende pipetter de skal implementere i et assay, eller hvilke pipetter de måske ønsker at købe."
Funktionerne i nutidens pipetter rækker ud over selve enheden. Fremskridt inden for væskehåndtering har gjort det muligt for brugere at forbinde deres pipette til skyen. Med denne forbindelse kan en bruger downloade protokoller eller oprette brugerdefinerede protokoller. Pipetteringsdata kan endda indsamles i skyen, hvilket er en måde at identificere eventuelle fejltrin og forbedre pipetteringsprocessen, især ved at spore den løbende nøjagtighed, eller manglen på samme.
Med det rigtige udstyr i hånden er den næste udfordring at få trinene rigtige.
Nøglen til succes
Med en luftforskydningspipette øger følgende trin sandsynligheden for nøjagtig og gentagen måling af et specifikt volumen:
- Indstil volumen på pipetten.
- Tryk stemplet ned.
- Nedsænk spidsen til den korrekte dybde, som kan variere afhængigt af pipetten og spidsen, og slip stemplet forsigtigt tilbage til sin hvileposition.
- Vent cirka et sekund, mens væsken strømmer ind itip.
- Placer pipetten – holdt i en vinkel på 10-45 grader – mod væggen i modtagerkammeret, og tryk stemplet forsigtigt ned til det første stop.
- Vent et sekund, og tryk derefter stemplet ned til det andet stop.
- Skub spidsen op ad beholdervæggen for at fjerne pipetten.
- Lad stemplet vende tilbage til sin hvileposition.
Opslagstidspunkt: 12. dec. 2022