Sut i Selio Plât PCR

Rhagymadrodd

platiau PCR, sy'n rhan annatod o'r labordy ers blynyddoedd lawer, yn dod hyd yn oed yn fwy cyffredin yn y sefyllfa fodern wrth i labordai gynyddu eu trwygyrch a defnyddio awtomeiddio fwyfwy o fewn eu llifoedd gwaith.Gall fod yn anodd cyflawni'r amcanion hyn tra'n cadw cywirdeb a chywirdeb arbrofion.Un o'r meysydd cyffredin lle gall gwallau ymledu yw trwy selioplatiau PCR, gyda thechneg wael yn caniatáu anweddu samplau, gan newid y pH ac felly amharu ar swyddogaethau ensymatig, a gwahodd halogiad.Dysgu sut i selio aPlât PCRyn dileu'r risgiau hyn yn gywir ac yn sicrhau canlyniadau atgynhyrchadwy.

Dewch o hyd i'r Sêl Cywir ar gyfer eich Plât PCR

Capiau Plât yn erbyn Morloi Ffilm yn erbyn Caeadau
Capiauyn ffordd dda o selio'ch plât â sêl dynn, tra'n dal i roi'r hyblygrwydd i chi ddadselio ac ail-selio'r plât yn hawdd iawn heb unrhyw wastraff.Fodd bynnag, mae gan gapiau ychydig o anfanteision allweddol.

Yn gyntaf, bydd yn rhaid i chi brynu'r cap penodol sy'n gydnaws, sy'n golygu nad ydynt yn amlbwrpas.Bydd yn rhaid i chi wneud yn siŵr bod y cap a ddewiswch yn cyd-fynd â'r plât, sy'n dibynnu ar ei wneuthurwr, a dewis naill ai cromennog neu fflat yn seiliedig ar y thermocycler rydych chi'n ei ddefnyddio.

Yn ail, gall cymhwyso'r capiau i'r plât fod yn ailadroddus iawn ac yn ddiflas, gyda'r risg o groeshalogi os rhowch y cap anghywir ar y ffynnon anghywir.

Er bod morloi ffilm yn llai hyblyg o ran tynnu ac ailosod, maent yn amlbwrpas iawn gan y byddant yn ffitio unrhyw fath o blât PCR, heb unrhyw sylw i bwy yw'r gwneuthurwr.Yn syml, gellir eu torri i faint, gan eu gwneud yn effeithiol iawn.

Opsiwn arall yw caead plât.Mae'r rhain yn cynnig llai o amddiffyniad na chapiau a morloi, ac fe'u defnyddir yn bennaf ar gyfer gorchudd tymor byr yn unig i atal halogiad.

Seliau Ffilm Optegol vs Ffoil

P'un a oes angen sêl optegol, glir neu sêlffilm ffoil alwminiwmi selio eich plât yn cael ei benderfynu gan eich fformat arbrofol.Ffilmiau selio optegolyn dryloyw i ganiatáu i chi arsylwi samplau, tra'n dal i'w diogelu ac atal anweddiad.Maent hefyd yn arbennig o ddefnyddiol mewn arbrofion qPCR sy'n golygu gwneud mesuriadau fflworoleuedd hynod fanwl gywir o'r plât, ac os felly bydd angen ffilm selio arnoch sy'n hidlo cyn lleied o fflworoleuedd â phosibl.Mae'n bwysig sicrhau bod y sêl neu'r cap rydych chi'n ei ddefnyddio yn ddigon clir i sicrhau bod y darlleniadau'n gywir.

Mae ffilmiau ffoil yn briodol ar gyfer unrhyw samplau sy'n sensitif i olau neu sydd i'w storio ar dymheredd is na 80°C.Am y rheswm hwn, bydd angen ffilm ffoil ar y rhan fwyaf o samplau y bwriedir eu storio am gyfnod hir.Mae ffilmiau ffoil hefyd yn dylladwy, sy'n ddefnyddiol ar gyfer naill ai archwilio ffynhonnau unigol, neu ar gyfer trosglwyddo samplau â nodwyddau.Gall hyn ddigwydd â llaw neu fel rhan o lwyfan robotig.

Ystyriwch hefyd y bydd angen sêl sy'n gallu gwrthsefyll sylweddau ymosodol sy'n cynnwys asidau, basau neu doddyddion, ac os felly mae sêl ffoil yn debygol o fod yn fwy priodol.

Gludiog vs Ffilm Selio Gwres
Morloi ffilm gludiogyn syml iawn ac yn hawdd eu cymhwyso.Y cyfan sydd ei angen yw i ddefnyddiwr roi'r sêl ar y plât, a defnyddio teclyn taenu syml i wasgu i lawr a ffurfio sêl dynn.

Mae morloi gwres yn fwy datblygedig, gan ddarparu sêl barhaol hirach sydd wedi lleihau cyfraddau anweddu o'i gymharu â sêl gludiog confensiynol.Mae'r opsiwn hwn yn briodol os ydych chi'n bwriadu storio samplau yn y tymor hir, er bod hyn yn dod â gofyniad ychwanegol ar gyfer offer selio plât.

Sut i Selio Plât PCR

Dull Selio Plât

Hunan-gludiog

1. Gwnewch yn siŵr eich bod yn gweithio ar wyneb gwaith gwastad a sefydlog

2. Tynnwch y ffilm o'i becynnu, a thynnwch y cefndir

3. Rhowch y sêl yn ofalus ar y plât, gan wneud yn siŵr bod pob un o'r ffynhonnau wedi'u gorchuddio

4. Defnyddiwch offeryn taenu i roi pwysau ar draws y plât.Dechreuwch o un pen a gweithio'ch ffordd draw i'r llall, gan wasgu'n gyfartal

5. Ailadroddwch hyn sawl gwaith

6. Rhedwch eich taenwr o amgylch y ffynhonnau allanol, i wneud yn siŵr bod y rhain hefyd wedi'u selio'n iawn.

Morloi Gwres

Mae seliau gwres yn gweithio trwy doddi'r ffilm i ymyl pob ffynnon, gyda chymorth seliwr plât.I weithredu seliwr gwres, cyfeiriwch at y cyfarwyddiadau a ddarperir gan wneuthurwr yr offer.Gwnewch yn siŵr bod gan y gwneuthurwr rydych chi'n dod o hyd i'ch offer ganddo enw da, oherwydd mae'n bwysig iawn bod y sêl yn gywir, yn effeithiol ac yn dal dŵr.

Syniadau Da Selio Platiau

a.Wrth roi pwysau ar y sêl, ewch i'r cyfeiriad llorweddol a fertigol i sicrhau sêl iawn

b.Mae bob amser yn arfer da cynnal rhediad prawf o beth bynnag yr ydych yn ei wneud, ac nid yw hyn yn ddim gwahanol gyda selio platiau.Profwch gyda phlât gwag cyn defnyddio un gyda samplau.

c.Wrth brofi, tynnwch y sêl ac edrychwch i weld bod y glud yn glynu'n iawn, heb unrhyw fylchau.Mae cynrychiolaeth weledol o hyn yn y ddogfen gyfeirio gyntaf.Os nad ydych wedi selio'r plât yn iawn, pan fyddwch chi'n tynnu'r sêl bydd bylchau lle nad yw'r glud wedi gwneud bond llawn i'r plât.

d.Ar gyfer cludo a chludo samplau, efallai y bydd yn ddefnyddiol gosod sêl blastig ar ben y sêl ffoil i gael amddiffyniad ychwanegol (yn enwedig rhag tyllu).

e.Gwnewch yn siŵr bob amser nad oes unrhyw lympiau na chrychau wrth osod y ffilm - bydd y rhain yn achosi gollyngiadau ac anweddiad