Sut i Selio Plât PCR

Cyflwyniad

Platiau PCR, sy'n rhan annatod o'r labordy ers blynyddoedd lawer, yn dod yn fwy cyffredin fyth yn y lleoliad modern wrth i labordai gynyddu eu trwybwn a defnyddio awtomeiddio fwyfwy yn eu llif gwaith. Gall cyflawni'r amcanion hyn wrth gadw cywirdeb a chyfanrwydd arbrofion fod yn anodd. Un o'r meysydd cyffredin lle gall gwallau ddod i'r amlwg yw selioPlatiau PCR, gyda thechneg wael yn caniatáu anweddu samplau, newid y pH ac felly amharu ar swyddogaethau ensymatig, a gwahodd halogiad. Dysgu sut i selioPlât PCRyn dileu'r risgiau hyn yn gywir ac yn sicrhau canlyniadau y gellir eu hatgynhyrchu.

Dewch o hyd i'r sêl gywir ar gyfer eich plât PCR

Capiau Platiau vs. Seliau Ffilm vs. Caeadau
Capiauyn ffordd dda o selio'ch plât gyda sêl dynn, gan roi'r hyblygrwydd i chi ddadselio ac ailselio'r plât yn hawdd iawn yn ôl yr angen heb unrhyw wastraff. Fodd bynnag, mae gan gapiau gwpl o anfanteision allweddol.

Yn gyntaf, bydd yn rhaid i chi brynu'r cap penodol sy'n gydnaws, sy'n golygu nad ydyn nhw'n amlbwrpas. Bydd yn rhaid i chi sicrhau bod y cap a ddewiswch yn ffitio'r plât, sy'n dibynnu ar ei wneuthurwr, a dewis naill ai cap cromennog neu fflat yn seiliedig ar y thermocycler rydych chi'n ei ddefnyddio.

Yn ail, gall rhoi'r capiau ar y plât fod yn ailadroddus ac yn ddiflas iawn, gyda'r risg o groeshalogi os byddwch chi'n rhoi'r cap anghywir ar y ffynnon anghywir.

Er bod seliau ffilm yn llai hyblyg o ran tynnu ac ailosod, maent yn amlbwrpas iawn gan y byddant yn ffitio unrhyw fath o blât PCR, ni waeth pwy yw'r gwneuthurwr. Gellir eu torri i'r maint cywir yn syml, gan eu gwneud yn effeithiol iawn.

Dewis arall yw caead plât. Mae'r rhain yn cynnig llai o amddiffyniad na chapiau a seliau, ac fe'u defnyddir yn bennaf ar gyfer gorchudd tymor byr yn unig i atal halogiad.

Seliau Ffilm Optegol vs. Ffilm Ffoil

P'un a oes angen sêl optegol, glir neu sêl arnoch chiffilm ffoil alwminiwmMae selio'ch plât yn cael ei benderfynu gan eich fformat arbrofol.Ffilmiau selio optegolyn dryloyw i ganiatáu ichi arsylwi samplau, gan eu hamddiffyn a'u hatal rhag anweddu o hyd. Maent hefyd yn arbennig o ddefnyddiol mewn arbrofion qPCR sy'n cynnwys gwneud mesuriadau manwl iawn o fflwroleuedd yn uniongyrchol o'r plât, ac os felly bydd angen ffilm selio arnoch sy'n hidlo cyn lleied o fflwroleuedd â phosibl. Mae'n bwysig sicrhau bod gan y sêl neu'r cap rydych chi'n ei ddefnyddio lefel ddigon uchel o eglurder optegol i sicrhau bod y darlleniadau'n gywir.

Mae ffilmiau ffoil yn briodol ar gyfer unrhyw samplau sy'n sensitif i olau neu sydd i'w storio islaw 80°C. Am y rheswm hwn, bydd angen ffilm ffoil ar y rhan fwyaf o samplau sydd i'w storio yn y tymor hir. Mae ffilmiau ffoil hefyd yn dylluadwy, sy'n ddefnyddiol ar gyfer archwilio pyllau unigol, neu ar gyfer trosglwyddo samplau gan nodwyddau. Gall hyn ddigwydd â llaw neu fel rhan o blatfform robotig.

Ystyriwch hefyd y bydd angen sêl a all wrthsefyll sylweddau ymosodol sy'n cynnwys asidau, basau neu doddyddion, ac os felly mae sêl ffoil yn debygol o fod yn fwy priodol.

Gludiog vs. Ffilm Selio Gwres
Seliau ffilm gludiogyn syml iawn ac yn hawdd eu rhoi ar waith. Y cyfan sydd ei angen arnoch chi yw i ddefnyddiwr roi'r sêl ar y plât, a defnyddio teclyn rhoi syml i wasgu i lawr a ffurfio sêl dynn.

Mae seliau gwres yn fwy datblygedig, gan ddarparu sêl sy'n para'n hirach ac sydd â chyfraddau anweddu is o'i gymharu â sêl gludiog gonfensiynol. Mae'r opsiwn hwn yn briodol os ydych chi'n bwriadu storio samplau yn y tymor hir, er bod hyn yn dod â gofyniad ychwanegol am offer selio platiau.

Sut i Selio Plât PCR

Dull Selio Plât

Hunan-gludiog

1. Gwnewch yn siŵr eich bod chi'n gweithio ar arwyneb gwaith gwastad a sefydlog

2. Tynnwch y ffilm o'i phecynnu, a thynnwch y cefn

3. Rhowch y sêl yn ofalus ar y plât, gan sicrhau bod yr holl byllau wedi'u gorchuddio.

4. Defnyddiwch offeryn rhoi pwysau ar draws y plât. Dechreuwch o un pen a gweithiwch eich ffordd drosodd i'r llall, gan wasgu'n gyfartal.

5. Ailadroddwch hyn sawl gwaith

6. Rhedwch eich cymhwysydd o amgylch y tyllau allanol, i wneud yn siŵr bod y rhain hefyd wedi'u selio'n iawn.

Seliau Gwres

Mae seliau gwres yn gweithio trwy doddi'r ffilm i ymyl pob twll, gyda chymorth seliwr plât. I weithredu seliwr gwres, cyfeiriwch at y cyfarwyddiadau a ddarperir gan wneuthurwr yr offer. Gwnewch yn siŵr bod y gwneuthurwr rydych chi'n caffael eich offer ganddo yn enwog, gan ei bod hi'n bwysig iawn bod y sêl yn briodol, yn effeithiol ac yn dal dŵr.

Awgrymiadau Gorau ar gyfer Selio Platiau

a. Wrth roi pwysau ar y sêl, ewch i gyfeiriadau llorweddol a fertigol i sicrhau sêl briodol

b. Mae bob amser yn arfer da cynnal rhediad prawf o beth bynnag rydych chi'n ei wneud, ac nid yw hyn yn wahanol gyda selio platiau. Profwch gyda phlât gwag cyn defnyddio un gyda samplau.

c. Wrth brofi, tynnwch y sêl i ffwrdd ac edrychwch i weld a yw'r glud wedi glynu'n iawn, heb unrhyw fylchau. Mae cynrychiolaeth weledol o hyn yn y ddogfen gyfeirio gyntaf. Os nad ydych wedi selio'r plât yn iawn, pan fyddwch chi'n tynnu'r sêl i ffwrdd bydd bylchau lle nad yw'r glud wedi glynu'n llawn wrth y plât.

d. Ar gyfer cludo a chludo samplau, efallai y byddai'n ddefnyddiol rhoi sêl blastig ar ben y sêl ffoil i gael amddiffyniad ychwanegol (yn enwedig rhag tyllu).

e. Gwnewch yn siŵr bob amser nad oes unrhyw lympiau na chrychau wrth roi'r ffilm – bydd y rhain yn achosi gollyngiadau ac anweddiad.