Mikropipeta je pravděpodobně nejpoužívanějším nástrojem v laboratoři. Používají ji vědci v široké škále odvětví, včetně akademické obce, nemocnic a forenzních laboratoří, ale i při vývoji léků a vakcín k přenosu přesných, velmi malých množství kapaliny.
I když může být nepříjemné a frustrující spatřit vzduchové bubliny v jednorázové pipetové špičce, pokud si jich nevšimnete nebo je ignorujete, může to mít obrovský dopad na spolehlivost a reprodukovatelnost výsledků.
Dobrou zprávou je, že existuje několik jednoduchých opatření, která můžete podniknout, abyste zabránili vzniku vzduchových bublin a zlepšili efektivitu laboratoře, spokojenost obsluhy a také přesnost a preciznost výsledků.
Níže se podíváme na důsledky, které může mít vzduchová bublina ve špičce pipety, a na to, co byste měli dělat dál.
Důsledek bublin vŠpička pipety
I když používáte nejpřesnější, špičkové, dobře udržované, servisované a kalibrované pipety, spolehlivost vašich výsledků může být ovlivněna laboratorními chybami. Když se dovnitř dostanou bublinkytipmůže to mít několik výsledků.
● Když uživatel spatří vzduchovou bublinu, musí strávit čas správným dávkováním nasáté kapaliny, vysunout trysku a spustit proces znovu.
● Nedetekované vzduchové bubliny mohou vést k nízkému objemovému přenosu, a tím ke změně koncentrace reakčních směsí, což vede k neúspěšným experimentům a sporným nebo nespolehlivým výsledkům.
Tyto výsledky mohou mít několik důsledků (1).
● Snížená efektivita laboratoře – Testy a rozbory se budou muset opakovat, což bude mít za následek značné náklady na práci a materiál.
● Pochybné nebo nesprávné výsledky testů – Pokud jsou zveřejněny nesprávné výsledky, může to mít závažnější následky, včetně chybné diagnózy a špatných výsledků léčby pacientů.
● Stažení rukopisů z časopisů – Pokud kolegové nereplikují vaše výsledky kvůli vzduchovým bublinám, které způsobují nepřesné výsledky, mohou být práce staženy.
Nejlepší postupy pro prevenci vzduchových bublin
Ve většině případů jsou vzduchové bubliny v pipetovacích špičkách způsobeny chybou obsluhy. Základním problémem je obvykle špatná technika v důsledku nedostatečného školení nebo únavy.
Pipetování je odborná operace, která vyžaduje 110% pozornost, řádný výcvik a praxi k dosažení konzistentních a přesných výsledků.
I když existuje několik věcí, které můžete udělat pro snížení obecných chyb při pipetování, níže uvádíme několik osvědčených postupů, které lze použít k zamezení vzniku vzduchových bublin všpičky pipet.
Zlepšení uživatelské techniky
Pipetujte pomalu
Pokud se píst při nasávání uvolní příliš rychle, mohou se do hrotu dostat vzduchové bubliny. To může být obzvláště problematické při přenosu viskózních kapalin. Podobný efekt může nastat, pokud se píst po dávkování uvolní příliš rychle.
Abyste se při nasávání vyhnuli vzniku vzduchových bublin, dbejte na to, abyste píst ručních pipet ovládali plynule a pravidelně a vyvíjeli stálou sílu.
Použijte správnou hloubku ponoru
Pokud se hrot pipety neponoří dostatečně hluboko pod meniskus zásobníku kapaliny, může to vést k nasátí vzduchu a tím k tvorbě bublin.
Příliš hluboké ponoření hrotu však může v důsledku zvýšeného tlaku nasát více kapaliny nebo se na jeho vnější straně mohou objevit kapky, proto je důležité hrot ponořitšpička pipetydo správné hloubky.
Doporučená hloubka se liší v závislosti na velikosti, typu a značce pipety. I když je třeba dodržovat doporučení výrobce, zde je obecný návod od Národní fyzikální laboratoře.
Průvodce hloubkou ponoření hrotu
Objem pipety (µl) a hloubka ponoru (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1 000: 2 – 4
- 1 000 – 5 000: 2 – 5
PředvlhčeníŠpičky pipety
Při pipetování objemů větších než 10 µlšpičky pipetse obvykle předem navlhčí tak, že se několikrát naplní dávkovanou kapalinou a poté se pro zlepšení přesnosti vypustí do odpadu.
Pokud je předem nenavlhčíte, může to vést ke vzniku vzduchových bublin, zejména při použití viskózních nebo hydrofobních kapalin. Abyste zabránili vzniku vzduchových bublin, předem navlhčete špičky při pipetování objemu většího než 10 µl.
V případě potřeby použijte techniky reverzního pipetování
Viskózní látky: Častým problémem při pipetování viskózních látek, jako jsou roztoky proteinů nebo nukleových kyselin, glycerol a Tween 20/40/60/80, je častá tvorba bublin při použití techniky pipetování dopředu.
Pomalé pipetování technikou reverzního pipetování snižuje riziko tvorby bublin při přenosu viskózních roztoků.
Technika ELISA
Reverzní pipetování se doporučuje také při pipetování malých objemů do96jamkové mikrodestičkypro techniky ELISA. Pokud jsou při přidávání činidel do pipety nasávány vzduchové bubliny nebo jsou dávkovány do jamek, může to ovlivnit hodnoty optické hustoty a výsledky. Pro minimalizaci nebo odstranění tohoto problému se doporučuje reverzní pipetování.
Používejte ergonomické pipety
Staré pipety, které nebyly navrženy s ohledem na ergonomii, vyžadují více fyzické námahy, unavíte se a vaše pipetovací technika se stává nedbalou a špatnou. Výše uvedené chyby, jako je rychlé uvolnění pístu, se mohou vyskytovat častěji.
Investicí do ergonomičtějšího řešení si budete moci udržet vynikající techniku a zabránit tvorbě vzduchových bublin v důsledku špatné techniky.
Věnujte čas školení zaměstnanců
Pravidelné školení a hodnocení personálu v technikách pipetování může zajistit snížení chyb obsluhy a tvorby vzduchových bublin.
Zvažte automatizovanější řešení
Jak je uvedeno výše, většinu vzduchových bublin způsobuje obsluha. Chyby obsluhy a pohodlí lze snížit použitím elektronických pipet nebo flexibilní platformy pro manipulaci s kapalinami, jako je napříkladRobot Agilent Bravo pro manipulaci s kapalinami.
Používejte dobrou kvalituŠpičky pipety
Mikropipety se obvykle kupují s opatrností, ale často se věnuje malá pozornost kvalitě jednorázové pipetovací špičky. Vzhledem k vlivu, který má špička na výsledky pipetování, vyžaduje norma ISO 8655 dodatečnou kalibraci, pokud se používají pipety a špičky od různých výrobců.
Může to být proto, že mnoho levných špiček může zpočátku vypadat dobře, ale když si je pečlivě prostudujete, mohou mít otřepy, výstupky, škrábance a vzduchové bubliny, mohou být ohnuté nebo obsahovat nečistoty.
Nákup kvalitních špiček vyrobených z vysoce kvalitního polypropylenu může snížit výskyt vzduchových bublin.
Na závěr
Vznik vzduchových bublin ve špičce pipety má vliv na efektivitu laboratoře a také na nepřesnost a nedokonalost výsledků. Uvádíme několik věcí, které můžete udělat, abyste zabránili vniknutí vzduchových bublin do...špička pipety.
Pokud je však špatná kvalitašpičky pipetzpůsobují, že se do špičky pipety dostávají vzduchové bubliny, jistě vás potěší, že naše univerzálníšpičky pipetjsou vyrobeny podle nejvyšších standardů a jsou vyrobeny z prvotřídního čistého polypropylenu.
Biomedicínská společnost Suzhou AceVyrábíme vysoce kvalitní univerzální pipetovací špičky o objemech 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 a 1250 µl, 96 špiček/stojanek. Výjimečná odolnost – všechny stojany na špičky ACE splňují požadavky na použití s vícekanálovými pipetami. Sterilní, s filtrem, bez RNáz/DNáz a nepyrogenní.
Vítejte a neváhejte se na nás obrátit s žádostí o více informací.
Čas zveřejnění: 29. prosince 2022