A micropipetta hè probabilmente u strumentu u più utilizatu in u laburatoriu. Sò aduprate da i scientifichi in una vasta gamma di settori, cumpresi l'accademia, l'uspidali è i laboratori forensi, è ancu u sviluppu di medicinali è vaccini per trasferisce quantità precise è assai chjuche di liquidu.
Mentre pò esse fastidiosu è frustrante di individuà bolle d'aria in a punta di a pipetta dispunibule s'elle ùn sò micca individuate o ignorate, pò avè un impattu enormu nantu à l'affidabilità è a riproducibilità di i risultati.
A bona nutizia hè chì ci sò alcune misure simplici chì pudete piglià per prevene e bolle d'aria, è migliurà l'efficienza di u laburatoriu, a satisfaczione di l'operatori è ancu l'accuratezza è a precisione di i risultati.
Quì sottu, espluremu e cunsequenze di avè una bolla d'aria in a punta di a pipetta è ciò chì duvete fà dopu.
A cunsequenza di e bolle in uPunta di pipetta
Ancu s'è vo aduprate e pipette più precise, di punta, ben mantenute, riparate è calibrate, l'affidabilità di i vostri risultati pò esse affettata da errori di laburatoriu. Quandu e bolle entranu in upuntapò avè parechji risultati.
● Quandu l'utilizatore vede a bolla d'aria, deve passà u tempu à dispensà u liquidu aspiratu in modu adattatu, espulsà a punta è ricumincià u prucessu.
● E bulle d'aria micca rilevate ponu purtà à un trasferimentu di bassu vulume, alterendu cusì a cuncentrazione di e miscele di reazione chì porta à esperimenti falliti è risultati discutibili o inaffidabili.
Questi risultati ponu avè parechje cunsequenze (1).
● Diminuzione di l'efficienza di u laburatoriu - I testi è l'analisi devenu esse ripetuti, ciò chì implica costi di manodopera è di materiali, chì ponu esse abbastanza sustanziali.
● Risultati di Test Dubbiosi o Incorretti - Se i risultati incorretti sò publicati, ci ponu esse cunsequenze più gravi, cumprese diagnosi sbagliate è risultati scadenti per i pazienti.
● Ritirata di manuscritti da riviste - Se i pari ùn riescenu micca à replicà i vostri risultati per via di bolle d'aria chì causanu risultati imprecisi, i documenti ponu esse ritirati.
E migliori pratiche per prevene e bolle d'aria
In a maiò parte di i casi, e bolle d'aria in i punte di e pipette sò causate da un errore di l'operatore. Una tecnica scarsa per via di una furmazione insufficiente o di a fatigue hè di solitu u prublema sottustante.
U pipettaggio hè un'operazione qualificata chì richiede 110% d'attenzione, una furmazione adatta è pratica per ottene risultati consistenti è precisi.
Mentre ci sò parechje cose chì pudete fà per riduce l'errori generali di pipettaggio, quì sottu avemu messu in risaltu alcune di e migliori pratiche chì ponu esse aduprate per evità bolle d'aria inpunte di pipetta.
Migliurà a tecnica di l'utilizatore
Pipettà pianu pianu
Sè u pistone hè liberatu troppu prestu quandu si aspira, e bolle d'aria ponu esse introdutte in a punta. Questu pò esse particularmente problematicu quandu si trasferiscenu liquidi viscosi. Un effettu simile pò accade sè u pistone hè liberatu troppu prestu dopu a dispensazione.
Per evità bolle d'aria durante l'aspirazione, fate attenzione à fà funziunà u pistone di e pipette manuali in modu fluidu è regulare, applicendu una forza consistente.
Aduprate a prufundità d'immersione curretta
Se a punta di a pipetta ùn hè micca immersa abbastanza in fondu sottu à u meniscu di u reservoir di liquidu, pò causà l'aspirazione di l'aria è dunque a furmazione di bolle.
Tuttavia, immergendu a punta troppu prufonda pò aspirà più liquidu per via di una pressione aumentata o gocce ponu accade nantu à l'esternu di a punta, dunque hè impurtante immerge apunta di pipettaà a prufundità curretta.
A prufundità cunsigliata varieghja secondu a dimensione, u tipu è a marca di a pipetta. Mentre chì e raccomandazioni di u fabricatore devenu esse seguitate, eccu una guida generale furnita da u Laboratoriu Fisicu Naziunale.
Guida à a prufundità di l'immersione di a punta
Volume di a pipetta (µl) è prufundità d'immersione (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-BagnatuPunte di pipetta
Quandu si pipettanu volumi superiori à 10 µlpunte di pipettasò generalmente pre-umidificati riempienduli parechje volte cù u liquidu chì hè dispensatu è espulsendulu per rifiuti per migliurà a precisione.
A mancanza di pre-bagnalli pò causà bolle d'aria, in particulare quandu si utilizanu liquidi viscosi o idrofobici. Per evità bolle d'aria, assicuratevi di pre-bagnate i puntali quandu pipettate un vulume più grande di 10 µl.
Aduprate tecniche di pipettaggio inversu se apprupriatu
Sustanze Viscose: Un prublema cumunu quandu si pipettanu sustanzi viscose cum'è suluzioni di proteine o acidi nucleichi, glicerolu è Tween 20/40/60/80 hè a furmazione frequente di bolle quandu si usa a tecnica di pipettaggio in avanti.
Pipettà lentamente, aduprendu a tecnica di pipettaggio inversu, riduce u risicu di furmazione di bolle durante u trasferimentu di suluzioni viscose.
Tecnica ELISA
Si cunsiglia ancu di pipettà inversu quandu si pipettanu picculi volumi inPiastre di prova micro a 96 pozzettiper e tecniche ELISA. Quandu e bolle d'aria sò aspirate in a pipetta o dispensate in i pozzi quandu si aghjunghjenu reagenti, pò influenzà i valori di densità ottica è i risultati. Si cunsiglia u pipettaggio inversu per minimizà o eliminà stu prublema.
Aduprà pipette ergonomiche
E pipette di vechju stile chì ùn sò state cuncipite cù l'ergonomia in mente richiedenu più sforzu fisicu, vi stancate è a vostra tecnica di pipettaggio diventa trascurata è scarsa. L'errori citati sopra, cum'è u rilasciu rapidu di u pistone, ponu accade più spessu.
Investendu in una suluzione più ergonomica, puderete mantene una tecnica eccellente è impedisce a furmazione di bolle d'aria per via di una tecnica scarsa.
Pigliate u tempu per furmà u persunale
A furmazione è a valutazione regulare di u persunale in e tecniche di pipettaggio pò assicurà chì l'errore di l'operatore è a furmazione di bolle d'aria sianu ridutti.
Cunsiderate più suluzioni automatizate
Cum'è nutatu sopra, a maiò parte di e bolle d'aria sò causate da l'operatore. Pò esse pussibule di riduce l'errore di l'operatore è u cunfortu aduprendu pipette elettroniche o una piattaforma flessibile per a manipulazione di liquidi cum'è aRobot di manipolazione di liquidi Agilent Bravo.
Aduprate una bona qualitàPunte di pipetta
E micropipette sò generalmente cumprate cun cura, ma spessu si pensa pocu à a qualità di a punta di pipetta dispunibule. A causa di l'influenza chì una punta hà nantu à i risultati di pipettazione, a norma ISO 8655 richiede una calibrazione supplementare se si utilizanu pipette è punte di diversi pruduttori.
Questu puderia esse perchè parechje punte economiche ponu sembrà bè inizialmente, ma quandu li studiate attentamente ponu avè lampi, sporgenze, graffi è bolle d'aria, o esse piegate o cuntene impurità.
Cumprà punte di bona qualità fatte di polipropilene di alta qualità pò riduce a presenza di bolle d'aria.
Per cunclude
Avè bolle d'aria in a punta di a pipetta hà un impattu annantu à l'efficienza di u laburatoriu, è ancu nantu à l'inesattezza è l'imprecisione di i risultati. Avemu nutatu parechje cose chì pudete fà per impedisce chì e bolle d'aria entrinu inpunta di pipetta.
Tuttavia, se a qualità hè scarsapunte di pipettacausanu bolle d'aria chì entranu in a punta di a vostra pipetta, sarete cuntenti di sapè chì a nostra misura universalepunte di pipettasò fatti secondu i più alti standard è sò fatti cù polipropilene puru di prima qualità.
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Data di publicazione: 29 dicembre 2022