Kako zatvoriti PCR ploču

Uvod

PCR ploče, osnovni element laboratorija dugi niz godina, postaju još rasprostranjeniji u modernom okruženju kako laboratorije povećavaju svoj protok i sve više koriste automatizaciju u svojim radnim procesima. Postizanje ovih ciljeva uz očuvanje tačnosti i integriteta eksperimenata može biti teško. Jedno od uobičajenih područja gdje se greške mogu pojaviti je zaptivanjePCR ploče, s lošom tehnikom koja omogućava isparavanje uzoraka, mijenja pH i time poremećuje enzimske funkcije i izaziva kontaminaciju. Učenje kako zatvoritiPCR pločapravilno eliminira ove rizike i osigurava ponovljive rezultate.

Pronađite pravi pečat za vašu PCR ploču

Poklopci ploča u odnosu na folijske zatvarače u odnosu na poklopce
Kapicesu dobar način da čvrsto zatvorite tanjir, a istovremeno vam daju fleksibilnost da vrlo lako otvorite i ponovo zatvorite tanjir po potrebi bez ikakvog otpada. Međutim, poklopci imaju nekoliko ključnih nedostataka.

Prvo, morat ćete kupiti određeni poklopac koji je kompatibilan, što ih čini ne svestranim. Morat ćete se uvjeriti da odabrani poklopac odgovara ploči, što ovisi o proizvođaču, i odabrati kupolasti ili ravni oblik na temelju termociklera koji koristite.

Drugo, stavljanje poklopaca na ploču može biti vrlo repetitivno i zamorno, s rizikom unakrsne kontaminacije ako stavite pogrešan poklopac na pogrešnu posudu.

Iako su folije za zatvaranje manje fleksibilne u smislu uklanjanja i zamjene, one su vrlo svestrane jer odgovaraju bilo kojoj vrsti PCR ploče, bez obzira na proizvođača. Mogu se jednostavno rezati na veličinu, što ih čini vrlo učinkovitima.

Druga opcija je pločasti poklopac. Oni nude manju zaštitu od čepova i zaptivki, a uglavnom se koriste samo za kratkoročno pokrivanje kako bi se spriječila kontaminacija.

Optičke i folijske zaptivke

Bez obzira da li vam je potreban optički, prozirni pečat ilialuminijska folijaZatvaranje ploče određuje se vašim eksperimentalnim formatom.Optičke zaptivne folijeProzirni su kako biste mogli posmatrati uzorke, a istovremeno ih štititi i sprječavati isparavanje. Također su posebno korisni u qPCR eksperimentima koji uključuju vrlo precizna mjerenja fluorescencije direktno s ploče, u kom slučaju će vam trebati zaštitna folija koja filtrira što je moguće manje fluorescencije. Važno je osigurati da pečat ili poklopac koji koristite ima dovoljno visok nivo optičke jasnoće kako bi se osigurala tačnost očitavanja.

Folije su prikladne za sve uzorke koji su osjetljivi na svjetlost ili se čuvaju na temperaturi ispod 80°C. Iz tog razloga, većina uzoraka namijenjenih dugotrajnom skladištenju zahtijeva foliju. Folije se također mogu probušiti, što je korisno za ispitivanje pojedinačnih jažica ili za prijenos uzoraka iglama. To se može učiniti ručno ili kao dio robotske platforme.

Također uzmite u obzir da agresivne tvari koje uključuju kiseline, baze ili rastvarače zahtijevaju zaptivač koji ih može izdržati, u kojem slučaju je folijski zaptivač vjerojatno prikladniji.

Ljepljiva folija u odnosu na foliju za termičko zatvaranje
Zaptivne folije za ljepljenjeVrlo su jednostavni i laki za nanošenje. Sve što vam je potrebno je da korisnik nanese zaptivač na ploču i pomoću jednostavnog aplikatora pritisne i formira čvrsti zatvarač.

Termičko zaptivanje je naprednije i omogućava dugotrajnije zaptivanje sa smanjenom stopom isparavanja u poređenju sa konvencionalnim ljepljivim zaptivanjem. Ova opcija je prikladna ako želite dugoročno čuvati uzorke, iako to sa sobom nosi dodatne zahtjeve za opremu za zaptivanje ploča.

Kako zatvoriti PCR ploču

Metoda zatvaranja ploče

Samoljepljivo

1. Pazite da radite na ravnoj i stabilnoj radnoj površini

2. Izvadite foliju iz ambalaže i uklonite zaštitnu foliju

3. Pažljivo postavite foliju na ploču, pazeći da su sve jažice pokrivene.

4. Koristite aplikator da biste primijenili pritisak na ploču. Počnite od jednog kraja i ravnomjerno pritiskajte prema drugom.

5. Ponovite ovo više puta

6. Prođite aplikatorom oko vanjskih udubljenja kako biste bili sigurni da su i ona pravilno zatvorena.

Termički zaptivači

Termičko zaptivanje funkcioniše tako što se film rastopi na rub svake posude, uz pomoć uređaja za zaptivanje ploča. Za rukovanje uređajem za termičko zaptivanje, pogledajte uputstva proizvođača opreme. Uvjerite se da je proizvođač od kojeg nabavljate opremu renomiran, jer je veoma važno da je zaptivanje ispravno, efikasno i vodonepropusno.

Vrhovi za zaptivanje ploča

a. Prilikom pritiskanja na zaptivku, pritiskajte je i u horizontalnom i u vertikalnom smjeru kako biste osigurali pravilno zaptivanje.

b. Uvijek je dobra praksa provesti probni rad svega što radite, a to nije drugačije i kod zatvaranja ploča. Testirajte s praznom pločom prije upotrebe one s uzorcima.

c. Prilikom testiranja, skinite zaštitnu foliju i provjerite da li se ljepilo pravilno zalijepilo, bez praznina. Vizuelni prikaz ovoga nalazi se u prvom referentnom dokumentu. Ako niste pravilno zatvorili ploču, kada uklonite zaštitnu foliju, ostat će praznina tamo gdje se ljepilo nije u potpunosti vezalo za ploču.

d. Za otpremu i transport uzoraka, možda će vam biti korisno postaviti plastični pečat preko folije radi dodatne zaštite (posebno od probijanja).

e. Uvijek pazite da nema neravnina ili nabora prilikom postavljanja folije – to će uzrokovati curenje i isparavanje