Микропипетата е може би най-използваният инструмент в лабораторията. Тя се използва от учени в широк спектър от сектори, включително академични среди, болници и криминалистични лаборатории, както и при разработването на лекарства и ваксини, за прехвърляне на прецизни, много малки количества течност.
Въпреки че може да е досадно и разочароващо да забележите въздушни мехурчета във върха на пипетата за еднократна употреба, ако те не бъдат забелязани или игнорирани, това може да окаже огромно влияние върху надеждността и възпроизводимостта на резултатите.
Добрата новина е, че има някои прости мерки, които можете да предприемете, за да предотвратите образуването на въздушни мехурчета и да подобрите ефективността на лабораторията, удовлетвореността на оператора, както и точността и прецизността на резултатите.
По-долу разглеждаме последствията от попадането на въздушни мехурчета във върха на пипетата и какво трябва да направите след това.
Последиците от балончетата вВръх на пипетата
Дори и да използвате най-точните, първокласни, добре поддържани, обслужвани и калибрирани пипети, надеждността на вашите резултати може да бъде засегната от лабораторни грешки. Когато в пипетата попаднат мехурчета.бакшишможе да има няколко резултата.
● Когато потребителят забележи въздушното мехурче, той трябва да отдели време за правилно дозиране на аспирираната течност, да изхвърли накрайника и да започне процеса отново.
● Неоткритите въздушни мехурчета могат да доведат до нисък обемен трансфер, като по този начин променят концентрацията на реакционните смеси, което води до неуспешни експерименти и съмнителни или ненадеждни резултати.
Тези резултати могат да имат няколко последици (1).
● Намалена ефективност на лабораторията – Тестовете и анализите ще трябва да се повтарят, което води до значителни разходи за труд и материали.
● Съмнителни или неправилни резултати от тестове – Ако бъдат публикувани неправилни резултати, може да има по-сериозни последици, включително погрешна диагноза и лоши резултати за пациента.
● Оттегляне на ръкописи от списания – Ако колегите не успеят да възпроизведат вашите резултати поради въздушни мехурчета, причиняващи неточни резултати, статиите могат да бъдат оттеглени.
Най-добри практики за предотвратяване на въздушни мехурчета
В повечето случаи въздушните мехурчета в върховете на пипетите са причинени от грешка на оператора. Лошата техника, дължаща се на недостатъчно обучение или умора, обикновено е основният проблем.
Пипетирането е квалифицирана операция, която изисква 110% внимание, подходящо обучение и практика за постигане на постоянни и точни резултати.
Въпреки че има няколко неща, които можете да направите, за да намалите често срещаните грешки при пипетиране, по-долу сме изброили някои най-добри практики, които могат да се прилагат, за да се избегнат въздушни мехурчета внакрайници за пипети.
Подобряване на потребителската техника
Пипетирайте бавно
Ако буталото се освободи твърде бързо при аспириране, във върха могат да попаднат въздушни мехурчета. Това може да бъде особено проблематично при прехвърляне на вискозни течности. Подобен ефект може да възникне, ако буталото се освободи твърде бързо след дозиране.
За да избегнете образуването на въздушни мехурчета при аспириране, внимавайте да движите буталото на ръчните пипети плавно и равномерно, прилагайки постоянна сила.
Използвайте правилната дълбочина на потапяне
Ако върха на пипетата не се потопи достатъчно дълбоко под менискуса на резервоара за течност, това може да доведе до аспирация на въздух и по този начин до образуване на мехурчета.
Въпреки това, потапянето на върха твърде дълбоко може да аспирира повече течност поради повишено налягане или могат да се появят капчици от външната страна на върха, така че е важно да го потапятевръх на пипетадо правилната дълбочина.
Препоръчителната дълбочина варира в зависимост от размера, вида и марката на пипетата. Въпреки че трябва да се следват препоръките на производителя, ето общо ръководство, предоставено от Националната физическа лаборатория.
Ръководство за дълбочина на потапяне на върха
Обем на пипетата (µl) и дълбочина на потапяне (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1000: 2 – 4
- 1000 – 5000: 2 – 5
Предварително намокрянеНакрайници за пипети
При пипетиране на обеми по-големи от 10µlнакрайници за пипетиобикновено се намокрят предварително, като се напълнят няколко пъти с дозираната течност и се изхвърлят в отпадъците, за да се подобри точността.
Ако не ги намокрите предварително, това може да доведе до образуване на въздушни мехурчета, особено при използване на вискозни или хидрофобни течности. За да избегнете образуването на въздушни мехурчета, уверете се, че предварително намокряте върховете, когато пипетирате обем по-голям от 10 µl.
Използвайте техники за обратно пипетиране, ако е уместно
Вискозни вещества: Често срещан проблем при пипетиране на вискозни вещества, като например разтвори на протеини или нуклеинови киселини, глицерол и Tween 20/40/60/80, е честото образуване на мехурчета, когато се използва техниката на пипетиране напред.
Бавното пипетиране, използвайки техниката на обратно пипетиране, намалява риска от образуване на мехурчета при прехвърляне на вискозни разтвори.
ELISA техника
Обратното пипетиране се препоръчва и при пипетиране на малки обеми в96-ямкови микротестови плакиза ELISA техники. Когато въздушните мехурчета се всмучат в пипетата или се разпределят в ямките при добавяне на реагенти, това може да повлияе на стойностите на оптичната плътност и резултатите. Препоръчва се обратно пипетиране, за да се сведе до минимум или елиминира този проблем.
Използвайте ергономични пипети
Пипетите от стар модел, които не са проектирани с ергономичност, изискват повече физически усилия, човек се уморява и техниката му на пипетиране става небрежна и лоша. Гореспоменатите грешки, като например бързото освобождаване на буталото, може да се появяват по-често.
Като инвестирате в по-ергономично решение, ще можете да поддържате отлична техника и да предотвратите образуването на въздушни мехурчета поради лоша техника.
Отделете време за обучение на персонала
Редовното обучение и оценка на персонала по техники за пипетиране може да гарантира намаляване на грешките на оператора и образуването на въздушни мехурчета.
Помислете за повече автоматизирани решения
Както бе отбелязано по-горе, повечето въздушни мехурчета са причинени от оператора. Възможно е да се намалят грешките на оператора и да се постигне комфорт чрез използване на електронни пипети или гъвкава платформа за работа с течности, като напримерРобот за обработка на течности Agilent Bravo.
Използвайте добро качествоНакрайници за пипети
Микропипетите обикновено се купуват внимателно, но често се обръща малко внимание на качеството на върха на пипетата за еднократна употреба. Поради влиянието, което накрайникът оказва върху резултатите от пипетирането, стандартът ISO 8655 изисква допълнително калибриране, ако се използват пипети и накрайници от различни производители.
Това може да се дължи на факта, че много евтини накрайници могат да изглеждат добре в началото, но когато ги разгледате внимателно, те може да имат пролуки, издатини, драскотини и въздушни мехурчета, или да са огънати или да съдържат примеси.
Купуването на качествени накрайници, изработени от висококачествен полипропилен, може да намали появата на въздушни мехурчета.
В заключение
Попадането на въздушни мехурчета във върха на пипетата ви оказва влияние върху ефективността на лабораторията, както и върху неточността и непрецизността на резултатите. Отбелязахме няколко неща, които можете да направите, за да избегнете попадането на въздушни мехурчета въввръх на пипета.
Ако обаче качеството е лошонакрайници за пипетипричиняват навлизането на въздушни мехурчета във върха на пипетата ви, ще се радвате да знаете, че нашата универсална форманакрайници за пипетиса изработени по най-високите стандарти и са изработени от първокласен чист полипропилен.
Биомедицинска компания Суджоу ЕйсПроизвеждат висококачествени универсални накрайници за пипети с обем 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 и 1250 µL, 96 накрайника/стойка. Изключителна издръжливост – всички стойки за накрайници ACE отговарят на изискванията за употреба с многоканални пипети. Стерилни, филтрирани, без RNase/DNase и апирогенни.
Добре дошли да ни попитате за повече подробности.
Време на публикуване: 29 декември 2022 г.