مقدمة
لوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل، التي كانت عنصرًا أساسيًا في المختبرات لسنوات عديدة، أصبحت أكثر انتشارًا في البيئات الحديثة مع توسع المختبرات في إنتاجيتها واستخدامها المتزايد للأتمتة في سير عملها. قد يكون تحقيق هذه الأهداف مع الحفاظ على دقة وسلامة التجارب أمرًا صعبًا. ومن بين المجالات الشائعة التي قد تتسلل إليها الأخطاء هي إغلاقلوحات تفاعل البوليميراز المتسلسل، مع ضعف التقنية التي تسمح بتبخر العينات، وتغيير درجة الحموضة، وبالتالي تعطيل الوظائف الأنزيمية، وتشجيع التلوث. تعلم كيفية إغلاقلوحة تفاعل البوليميراز المتسلسليقضي بشكل صحيح على هذه المخاطر ويضمن نتائج قابلة للتكرار.
ابحث عن الختم المناسب للوحة PCR الخاصة بك
أغطية الألواح مقابل أختام الأفلام مقابل الأغطية
قبعاتتُعدّ الأغطية طريقةً جيدةً لإغلاق طبقك بإحكام، مع توفير المرونة اللازمة لفتحه وإعادة إغلاقه بسهولةٍ تامةٍ حسب الحاجة دون أي هدر. مع ذلك، للأغطية بعض العيوب الرئيسية.
أولاً، عليك شراء غطاء مُحدد مُتوافق، مما يجعلها غير مُتعددة الاستخدامات. تأكد من أن الغطاء الذي تختاره مُناسب للوحة، وهذا يعتمد على الشركة المُصنعة، واختر إما مُقببًا أو مُسطحًا بناءً على المُعالج الحراري المُستخدم.
ثانياً، قد يكون تركيب الأغطية على اللوحة عملية متكررة ومملة للغاية، مع وجود خطر التلوث المتبادل إذا وضعت الغطاء الخاطئ على البئر الخاطئ.
على الرغم من أن أختام الأفلام أقل مرونة من حيث الإزالة والاستبدال، إلا أنها متعددة الاستخدامات، إذ تناسب أي نوع من ألواح PCR، بغض النظر عن الشركة المصنعة. ويمكن قصها بسهولة لتناسب الحجم المطلوب، مما يجعلها فعالة للغاية.
خيار آخر هو غطاء لوحي. يوفر هذا الغطاء حماية أقل من الأغطية والأختام، ويُستخدم عادةً كغطاء قصير الأمد فقط لمنع التلوث.
الأختام البصرية مقابل الأختام المصنوعة من رقائق معدنية
سواء كنت بحاجة إلى ختم بصري واضح أوفيلم رقائق الألومنيوميتم تحديد إغلاق طبقك من خلال تنسيقك التجريبي.أفلام الختم البصريةشفافة تسمح بمراقبة العينات، مع حمايتها ومنع تبخرها. كما أنها مفيدة بشكل خاص في تجارب تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) التي تتضمن قياسات دقيقة للغاية للفلورسنت مباشرةً من الصفيحة، وفي هذه الحالة ستحتاج إلى غشاء عازل يُرشّح أقل قدر ممكن من الفلورسنت. من المهم التأكد من أن الختم أو الغطاء المستخدم يتمتع بمستوى عالٍ من الوضوح البصري لضمان دقة القراءات.
تُعدّ الأغشية الرقيقة مناسبةً لأي عينات حساسة للضوء أو تُخزّن في درجة حرارة أقل من 80 درجة مئوية. ولذلك، تتطلب معظم العينات المُخصّصة للتخزين طويل الأمد غشاءً رقيقًا. كما أن الأغشية الرقيقة قابلة للثقب، مما يُسهّل فحص الآبار الفردية، أو نقل العينات بالإبر. يُمكن إجراء ذلك يدويًا أو باستخدام منصة آلية.
ضع أيضًا في اعتبارك أن المواد العدوانية التي تحتوي على أحماض أو قواعد أو مذيبات سوف تتطلب ختمًا يمكنه تحملها، وفي هذه الحالة من المرجح أن يكون ختم الرقائق المعدنية أكثر ملاءمة.
اللاصق مقابل فيلم الختم الحراري
أختام الفيلم اللاصقسهلة الاستخدام ومباشرة. كل ما تحتاجه هو أن يضع المستخدم الختم على اللوحة، ثم يستخدم أداة تطبيق بسيطة للضغط عليها وتشكيل ختم محكم.
تُعدّ الأختام الحرارية أكثر تطورًا، حيث توفر ختمًا يدوم طويلًا مع معدلات تبخر أقل مقارنةً بالأختام اللاصقة التقليدية. يُعدّ هذا الخيار مناسبًا لتخزين العينات على المدى الطويل، مع أنه يتطلب معدات ختم ألواح إضافية.
كيفية إغلاق لوحة PCR
طريقة ختم اللوحة
ذاتية اللصق
1. تأكد من أنك تعمل على سطح عمل مستوٍ ومستقر
2. قم بإزالة الفيلم من عبوته، ثم قم بإزالة الغطاء الخلفي
3. ضع الختم بعناية على اللوحة، مع التأكد من تغطية جميع الآبار
٤. استخدم أداة تطبيق للضغط على اللوحة. ابدأ من أحد الطرفين وانتقل إلى الطرف الآخر، مع الضغط بالتساوي.
5. كرر هذا عدة مرات
6. قم بتمرير أداة التطبيق حول الآبار الخارجية، للتأكد من أنها مغلقة بشكل صحيح أيضًا.
أختام الحرارة
تعمل أختام الحرارة عن طريق إذابة الغشاء على حافة كل بئر، باستخدام مانع تسرب صفائحي. لتشغيل مانع التسرب الحراري، يُرجى مراجعة تعليمات الشركة المصنعة للمعدات. تأكد من أن الشركة المصنعة التي تشتري منها معداتك تتمتع بسمعة طيبة، فمن المهم جدًا أن يكون المانع سليمًا وفعالًا ومحكمًا ضد تسرب الماء.
نصائح حول إغلاق الألواح
أ. عند الضغط على الختم، قم بالضغط في الاتجاهين الأفقي والرأسي لضمان إحكام الختم.
ب. من الجيد دائمًا إجراء اختبار تشغيلي لأي شيء تفعله، ولا يختلف الأمر مع إغلاق الألواح. اختبره بلوح فارغ قبل استخدام لوح مع عينات.
ج. عند الاختبار، انزع الختم وتأكد من التصاق اللاصق جيدًا دون أي فجوات. يوجد تمثيل مرئي لذلك في الوثيقة المرجعية الأولى. إذا لم تُغلِق اللوحة جيدًا، فستظهر فجوات عند إزالة الختم حيث لم يلتصق اللاصق باللوحة تمامًا.
د. عند شحن ونقل العينات، قد يكون من المفيد وضع ختم بلاستيكي فوق ختم الرقائق المعدنية لمزيد من الحماية (خاصةً من الثقب).
هـ. تأكد دائمًا من عدم وجود نتوءات أو تجاعيد عند وضع الفيلم، فقد يؤدي ذلك إلى حدوث تسربات وتبخر.
وقت النشر: ٢٣ نوفمبر ٢٠٢٢