Мікропіпетка, ймовірно, є найбільш використовуваним інструментом у лабораторії. Її використовують вчені в широкому спектрі секторів, включаючи академічні кола, лікарні та судово-медичні лабораторії, а також розробку ліків та вакцин для точного перенесення дуже малих кількостей рідини.
Хоча виявлення бульбашок повітря в наконечнику одноразової піпетки може бути неприємним та неприємним, якщо їх не помітити або ігнорувати, це може мати величезний вплив на надійність та відтворюваність результатів.
Гарна новина полягає в тому, що існують деякі прості заходи, які ви можете вжити, щоб запобігти утворенню повітряних бульбашок та підвищити ефективність роботи лабораторії, задоволеність операторів, а також точність і прецизійність результатів.
Нижче ми розглянемо наслідки потрапляння бульбашки повітря в наконечник піпетки та що робити далі.
Наслідки появи бульбашок уНаконечник піпетки
Навіть якщо ви використовуєте найточніші, найвищого класу, добре доглянуті, обслуговувані та калібровані піпетки, надійність ваших результатів може бути порушена лабораторними помилками. Коли бульбашки потрапляють учайовіце може мати кілька наслідків.
● Коли користувач помічає повітряну бульбашку, він повинен витратити час на належне дозування відібраної рідини, виштовхнути наконечник і розпочати процес знову.
● Невиявлені бульбашки повітря можуть призвести до перенесення низького об'єму, змінюючи таким чином концентрацію реакційних сумішей, що призведе до невдалих експериментів та сумнівних або ненадійних результатів.
Ці результати можуть мати кілька наслідків (1).
● Зниження ефективності лабораторії – тести та аналізи доведеться повторювати, що призведе до значних витрат на робочу силу та матеріали.
● Сумнівні або неправильні результати тестів – Оприлюднення неправильних результатів може мати серйозніші наслідки, зокрема неправильний діагноз та погані результати лікування пацієнтів.
● Відкликання рукописів із журналів – Якщо колеги не зможуть відтворити ваші результати через бульбашки повітря, що спричиняють неточність результатів, статті можуть бути відкликані.
Найкращі методи запобігання утворенню повітряних бульбашок
У більшості випадків бульбашки повітря в наконечниках піпеток спричинені помилкою оператора. Зазвичай основною проблемою є погана техніка через недостатню підготовку або втому.
Піпетування – це кваліфікована операція, яка вимагає 110% уваги, належної підготовки та практики для досягнення стабільних і точних результатів.
Хоча існує кілька способів зменшити загальні помилки піпетування, нижче ми виділили деякі найкращі практики, які можна застосовувати, щоб уникнути появи бульбашок повітря внаконечники піпеток.
Покращення техніки користувача
Повільно піпетуйте
Якщо під час аспірації відпустити поршень занадто швидко, у наконечник можуть потрапити бульбашки повітря. Це може бути особливо проблематично під час перекачування в'язких рідин. Подібний ефект може виникнути, якщо поршень відпустити занадто швидко після дозування.
Щоб уникнути утворення повітряних бульбашок під час аспірації, слідкуйте за тим, щоб поршень ручних піпеток рухався плавно та рівномірно, застосовуючи рівномірне зусилля.
Використовуйте правильну глибину занурення
Недостатньо глибоке занурення кінчика піпетки нижче меніска резервуара для рідини може призвести до аспірації повітря та, таким чином, утворення бульбашок.
Однак, занадто глибоке занурення наконечника може призвести до аспірації більшої кількості рідини через підвищений тиск, або на зовнішній стороні наконечника можуть утворюватися краплі, тому важливо занурювати йогокінчик піпеткина потрібну глибину.
Рекомендована глибина залежить від розміру, типу та виробника піпетки. Хоча слід дотримуватися рекомендацій виробника, ось загальні рекомендації, надані Національною фізичною лабораторією.
Посібник з глибини занурення наконечника
Об'єм піпетки (мкл) та глибина занурення (мм)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1000: 2 – 4
- 1000 – 5000: 2 – 5
Попереднє змочуванняНаконечники для піпеток
При піпетуванні об'ємів більше 10 мклнаконечники піпетокзазвичай попередньо зволожують, кілька разів наповнюючи їх рідиною, що подається, та зливаючи її у відходи для підвищення точності.
Недотримання попереднього зволоження може призвести до утворення бульбашок повітря, особливо під час використання в'язких або гідрофобних рідин. Щоб уникнути утворення бульбашок повітря, обов'язково попередньо зволожуйте наконечники під час піпетування об'ємом понад 10 мкл.
Використовуйте методи зворотного піпетування, якщо це доречно
В'язкі речовини: Поширеною проблемою під час піпетування в'язких речовин, таких як розчини білків або нуклеїнових кислот, гліцерин та Tween 20/40/60/80, є часте утворення бульбашок при використанні техніки прямого піпетування.
Повільне піпетування з використанням техніки зворотного піпетування зменшує ризик утворення бульбашок під час перенесення в'язких розчинів.
Методика ІФА
Зворотне піпетування також рекомендується під час піпетування невеликих об'ємів у96-лункові мікропланшети для тестуваннядля методів ІФА. Коли бульбашки повітря втягуються в піпетку або розподіляються в лунки під час додавання реагентів, це може вплинути на значення оптичної густини та результати. Для мінімізації або усунення цієї проблеми рекомендується зворотне піпетування.
Використовуйте ергономічні піпетки
Піпетки старого зразка, розроблені без урахування ергономіки, вимагають більше фізичних зусиль, ви втомлюєтеся, а техніка піпетування стає недбалою та неякісною. Згадані вище помилки, такі як швидке відпускання плунжера, можуть траплятися частіше.
Інвестуючи в більш ергономічне рішення, ви зможете підтримувати відмінну техніку та запобігати утворенню бульбашок повітря через неправильну техніку виконання.
Приділіть час навчанню персоналу
Регулярне навчання та оцінювання персоналу з техніки піпетування може забезпечити зменшення помилок оператора та утворення бульбашок повітря.
Розгляньте більше автоматизованих рішень
Як зазначалося вище, більшість повітряних бульбашок утворюються з вини оператора. Зменшити помилки оператора та підвищити комфорт можна, використовуючи електронні піпетки або гнучку платформу для роботи з рідинами, таку якРобот для обробки рідин Agilent Bravo.
Використовуйте гарну якістьНаконечники для піпеток
Мікропіпетки зазвичай купують з обережністю, але часто мало уваги приділяється якості одноразового наконечника піпетки. Через вплив наконечника на результати піпетування, стандарт ISO 8655 вимагає додаткового калібрування, якщо використовуються піпетки та наконечники від різних виробників.
Це може бути пов'язано з тим, що багато дешевих наконечників спочатку виглядають добре, але якщо уважно їх вивчити, вони можуть мати виступи, подряпини та бульбашки повітря, бути зігнутими або містити домішки.
Купівля якісних наконечників, виготовлених з високоякісного поліпропілену, може зменшити появу повітряних бульбашок.
На завершення
Попадання бульбашок повітря в наконечник піпетки впливає на ефективність роботи лабораторії, а також на неточність і неточність результатів. Ми зазначили кілька речей, які ви можете зробити, щоб уникнути потрапляння бульбашок повітря вкінчик піпетки.
Однак, якщо погана якістьнаконечники піпетокспричиняють потрапляння бульбашок повітря у наконечник піпетки, вам буде приємно дізнатися, що наш універсальний розмірнаконечники піпетоквиготовлені за найвищими стандартами та з чистого поліпропілену преміум-класу.
Біомедична компанія Сучжоу АсеВиробляємо високоякісні універсальні наконечники для піпеток об'ємом 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 та 1250 мкл, 96 наконечників/штатив. Виняткова довговічність – усі штативи для наконечників ACE витримують вимоги використання з багатоканальними піпетками. Стерильні, з фільтром, без РНКази/ДНКази та апірогенні.
Ласкаво просимо звернутися до нас для отримання додаткової інформації.
Час публікації: 29 грудня 2022 р.