Precis som en kock som använder en kniv behöver en forskare pipetteringskunskaper. En erfaren kock kanske kan skära en morot i band, till synes utan att tänka, men det skadar aldrig att ha några pipetteringsriktlinjer i åtanke – oavsett hur erfaren forskaren är. Här ger tre experter sina bästa tips.
”Man måste vara noga med att använda rätt teknik när man manuellt dispenserar vätska”, säger Magali Gaillard, senior manager, portföljhantering, MLH Business Line, Gilson (Villiers-le-bel, Frankrike). ”Några av de vanligaste pipetteringsfelen är relaterade till slarvig användning av pipettspetsar, inkonsekvent rytm eller timing, och felaktig hantering av pipetten.”
Ibland väljer en forskare till och med fel pipett. Som Rishi Porecha, global produktchef påRaininInstruments (Oakland, Kalifornien) säger: ”Några vanliga fel vid pipettering inkluderar att inte använda rätt volympipett för en specifik uppgift och att använda en luftförträngningspipett för att hantera icke-vattenhaltig vätska.” Med viskösa vätskor bör alltid en positiv förträngningspipett användas.
Innan man går vidare till specifika pipetteringsprocedurer bör man beakta några allmänna koncept. ”Varje gång pipettanvändare börjar arbeta för dagen bör de fundera över vilket experiment de gör, vilka vätskor de arbetar med och vilken genomströmning de önskar innan de väljer en pipett”, säger Porecha. ”Realistiskt sett har inget laboratorium alla pipetter som en användare kan önska sig, men om en användare tittar på vilka verktyg som finns tillgängliga i labbet och på avdelningen kan de få en bättre uppfattning om vilka befintliga pipetter som ska användas i en analys eller vilka pipetter de kan tänkas vilja köpa.”
Funktionerna som finns tillgängliga i dagens pipetter sträcker sig bortom själva enheten. Framsteg inom vätskehantering har gjort det möjligt för användare att ansluta sin pipett till molnet. Med denna anslutning kan en användare ladda ner protokoll eller skapa anpassade. Pipetteringsdata kan till och med samlas in i molnet, vilket är ett sätt att identifiera eventuella felsteg och förbättra pipetteringsprocessen, särskilt genom att spåra den pågående noggrannheten, eller bristen på den.
Med rätt utrustning till hands är nästa utmaning att få stegen rätt.
Nyckeln till framgång
Med en luftförträngningspipett ökar följande steg sannolikheten för att mäta en specifik volym noggrant och upprepade gånger:
- Ställ in volymen på pipetten.
- Tryck ner kolven.
- Sänk ner spetsen till rätt djup, vilket kan variera beroende på pipett och spets, och låt kolven försiktigt gå till sitt viloläge.
- Vänta ungefär en sekund tills vätskan har runnit in idricks.
- Placera pipetten – hållen i 10–45 grader – mot mottagningskammarens vägg och tryck försiktigt ner kolven till det första stoppet.
- Vänta en sekund och tryck sedan ner kolven till det andra stoppet.
- Skjut spetsen upp längs kärlväggen för att ta bort pipetten.
- Låt kolven återgå till sitt viloläge.
Publiceringstid: 12 december 2022