Čo sú kryoviálky?
Kryogénne skladovacie fľaštičkysú malé, uzatvárateľné a valcovité nádoby určené na skladovanie a konzerváciu vzoriek pri ultranízkych teplotách. Hoci sa tieto fľaštičky tradične vyrábali zo skla, v súčasnosti sa oveľa častejšie vyrábajú z polypropylénu z dôvodov pohodlia a nákladov. Kryonádobky boli starostlivo navrhnuté tak, aby odolali teplotám až do -196 ℃ a aby sa do nich zmestila široká škála typov buniek. Tie sa pohybujú od diagnostických kmeňových buniek, mikroorganizmov, primárnych buniek až po zavedené bunkové línie. Okrem toho sa v nich môžu uchovávať aj malé mnohobunkové organizmy.kryogénne skladovacie fľaštičky, ako aj nukleové kyseliny a proteíny, ktoré je potrebné skladovať pri kryogénnych teplotách.
Kryogénne skladovacie fľaštičky sa dodávajú v rôznych formách a nájdenie správneho typu, ktorý spĺňa všetky vaše potreby, zabezpečí zachovanie integrity vzorky bez preplatenia. Prečítajte si náš článok a dozviete sa viac o kľúčových faktoroch, ktoré treba zvážiť pri výbere správnej kryo fľaštičky pre vaše laboratórne použitie.
Vlastnosti kryogénnej fľaštičky, ktoré je potrebné zvážiť
Vonkajšie vs. vnútorné závity
Ľudia sa často rozhodujú na základe osobných preferencií, ale v skutočnosti existujú kľúčové funkčné rozdiely, ktoré treba zvážiť medzi týmito dvoma typmi nití.
Mnohé laboratóriá sa často rozhodujú pre fľaštičky s vnútorným závitom, aby minimalizovali úložný priestor na skúmavky a umožnili lepšie uloženie v mraziacich boxoch. Napriek tomu môžete zvážiť, že možnosť s vonkajším závitom je pre vás lepšou voľbou. Predpokladá sa, že predstavujú nižšie riziko kontaminácie vďaka konštrukcii, ktorá ešte viac sťažuje vstup čohokoľvek iného ako vzorky do fľaštičky.
Pre genomické aplikácie sa vo všeobecnosti uprednostňujú liekovky s vonkajším závitom, ale obe možnosti sa považujú za vhodné pre biobanky a iné aplikácie s vysokou priepustnosťou.
Ešte jedna vec, ktorú treba zvážiť pri závitovaní – ak vaše laboratórium používa automatizáciu, možno budete musieť zvážiť, aký závit je možné použiť s chápadlami nástrojov.
Objem úložiska
Kryogénne fľaštičky sú dostupné v rôznych veľkostiach, aby pokryli väčšinu potrieb, ale väčšinou sa pohybujú medzi 1 ml a 5 ml.
Kľúčom je zabezpečiť, aby vaša kryoampuľka nebola preplnená a aby bol k dispozícii dostatok miesta pre prípad, že by vzorka počas mrazenia napučala. V praxi to znamená, že laboratóriá používajú 1 ml ampulky na skladovanie vzoriek s 0,5 ml buniek suspendovaných v kryoprotektante a 2,0 ml ampulky na skladovanie 1,0 ml vzorky. Ďalším tipom, ako nepreplniť ampulky, je používať kryoampuľky so stupnicou, ktorá zabráni akémukoľvek napučaniu, ktoré by mohlo spôsobiť prasknutie alebo únik.
Skrutkovací uzáver verzus odklopný vrchnák
Typ uzáveru, ktorý si vyberiete, závisí hlavne od toho, či budete používať kvapalný dusík alebo nie. Ak áno, budete potrebovať kryoampuľky so skrutkovacím uzáverom. To zabezpečí, že sa nemôžu náhodne otvoriť v dôsledku nesprávnej manipulácie alebo zmien teploty. Skrutkovacie uzávery navyše umožňujú jednoduchšie vyberanie z kryogénnych boxov a efektívnejšie skladovanie.
Ak však nepoužívate kvapalný dusík a potrebujete pohodlnejší uzáver, ktorý sa ľahšie otvára, potom je lepšou voľbou odklápací uzáver. Ušetrí vám to veľa času, pretože sa oveľa ľahšie otvára, čo ho robí obzvlášť užitočným pri prevádzkach s vyššou priepustnosťou a pri tých, ktoré používajú dávkové procesy.
Zabezpečenie pečate
Najlepším spôsobom, ako zabezpečiť bezpečné utesnenie, je uistiť sa, že uzáver kryoampule aj fľaša sú vyrobené z rovnakého materiálu. Tým sa zabezpečí, že sa budú zmršťovať a rozťahovať súčasne. Ak sú vyrobené z rôznych materiálov, budú sa zmršťovať a rozťahovať rôznou rýchlosťou pri zmene teploty, čo povedie k vzniku medzier a možnému úniku a následnej kontaminácii.
Niektoré spoločnosti ponúkajú dvojité podložky a prírubu pre najvyššiu úroveň bezpečnosti vzorky na kryoampuľkách s vonkajším závitom. Kryoampuľky s O-krúžkom sa považujú za najspoľahlivejšie pre kryoampuľky s vnútorným závitom.
Sklo vs. plast
Z bezpečnostných a praktických dôvodov mnohé laboratóriá používajú namiesto tepelne uzatvárateľných sklenených ampúl plast, zvyčajne polypropylén. Sklenené ampuly sa v súčasnosti považujú za zastaranú voľbu, pretože počas procesu uzatvárania sa môžu vytvoriť neviditeľné dierky, ktoré po rozmrazení po skladovaní v tekutom dusíku môžu spôsobiť ich explóziu. Tiež nie sú vhodné na moderné techniky označovania, ktoré sú kľúčové pre zabezpečenie sledovateľnosti vzoriek.
Samostatne stojace vs. zaoblené dno
Kryogénne fľaštičky sú dostupné ako samostatne stojace s hviezdicovým dnom alebo so zaobleným dnom. Ak potrebujete fľaštičky umiestniť na povrch, vyberte si samostatne stojaci variant.
Sledovateľnosť a sledovanie vzoriek
Táto oblasť kryogénneho skladovania sa často prehliada, ale sledovanie a sledovateľnosť vzoriek je kľúčovým aspektom, ktorý treba zvážiť. Kryogénne vzorky sa môžu skladovať mnoho rokov, počas ktorých sa môže personál meniť a bez riadne vedených záznamov sa môžu stať neidentifikovateľnými.
Uistite sa, že vyberáte fľaštičky, ktoré čo najviac uľahčujú identifikáciu vzorky. Na čo si treba dať pozor:
Veľké plochy na písanie na zaznamenanie dostatočných podrobností, aby sa záznamy dali nájsť, ak sa ampulka nachádza na nesprávnom mieste – zvyčajne postačuje identita bunky, dátum zmrazenia a iniciály zodpovednej osoby.
Čiarové kódy na pomoc systémom správy a sledovania vzoriek
Farebné čiapky
Poznámka do budúcnosti – vyvíjajú sa čipy odolné voči ultranízkym teplotám, ktoré by po umiestnení do jednotlivých kryoskúmaviek mohli potenciálne uchovávať podrobnú tepelnú históriu, ako aj podrobné informácie o šaržiach, výsledky testov a ďalšiu relevantnú dokumentáciu o kvalite.
Okrem zváženia rôznych špecifikácií dostupných liekoviek je potrebné zvážiť aj technický proces skladovania kryoaplikácií v tekutom dusíku.
Skladovacia teplota
Existuje niekoľko metód kryogénneho skladovania vzoriek, pričom každá pracuje pri špecifickej teplote. Možnosti a teploty, pri ktorých pracujú, zahŕňajú:
Kvapalná fáza LN2: udržiavajte teplotu -196 ℃
Plynové LN2: sú schopné prevádzky pri špecifických teplotných rozsahoch od -135 °C do -190 °C v závislosti od modelu.
Mrazničky s dusíkovou parou: -20 °C až -150 °C
Typ skladovaných buniek a preferovaná metóda skladovania výskumníka určia, ktorú z troch dostupných možností vaše laboratórium použije.
Avšak kvôli extrémne nízkym použitým teplotám nie všetky skúmavky alebo prevedenia budú vhodné alebo bezpečné. Materiály sa môžu pri extrémne nízkych teplotách stať extrémne krehkými, použitie liekovky, ktorá nie je vhodná na použitie pri zvolenej teplote, môže spôsobiť rozbitie alebo prasknutie nádoby počas skladovania alebo rozmrazovania.
Starostlivo si prečítajte odporúčania výrobcu týkajúce sa správneho použitia, pretože niektoré kryogénne fľaštičky sú vhodné pre teploty až -175 °C, niektoré -150 °C, iné len 80 °C.
Za zmienku tiež stojí, že mnohí výrobcovia uvádzajú, že ich kryogénne fľaštičky nie sú vhodné na ponorenie do kvapalnej fázy. Ak sa tieto fľaštičky po ochladení na izbovú teplotu skladujú v kvapalnej fáze, môžu sa tieto fľaštičky alebo ich uzávery rozbiť v dôsledku rýchleho nárastu tlaku spôsobeného malými únikmi.
Ak sa bunky majú skladovať v kvapalnej fáze tekutého dusíka, zvážte skladovanie buniek vo vhodných kryogénnych fľaštičkách tepelne uzavretých v kryoflexných trubiciach alebo skladovanie buniek v hermeticky uzavretých sklenených ampulkách.
Čas uverejnenia: 25. novembra 2022