クライオバイアルとは何ですか?
極低温保存バイアルは、超低温でサンプルを保管および保存するために設計された、キャップ付きの小型の円筒形の容器です。これらのバイアルは伝統的にガラスで作られてきましたが、現在では利便性とコストの理由からポリプロピレンで作られることがはるかに一般的です。クライオバイアルは、-196℃ の低温に耐え、さまざまな種類の細胞に対応できるように慎重に設計されています。これらは、診断用幹細胞、微生物、初代細胞から確立された細胞株まで多岐にわたります。さらに、内部に保存されている小さな多細胞生物も存在する可能性があります。極低温保存バイアル、極低温保管温度レベルで保管する必要がある核酸やタンパク質も同様です。
極低温保存バイアルにはさまざまな形式があり、すべてのニーズを満たす適切なタイプを見つけることで、過剰な費用を支払うことなくサンプルの完全性を確実に維持できます。研究室用途に適したクライオバイアルを選択する際の重要な購入考慮事項について詳しくは、この記事をお読みください。
考慮すべき極低温バイアルの特性
雄ネジと雌ネジ
多くの場合、個人の好みに基づいてこの選択を行いますが、実際には、2 つのタイプのスレッド間には考慮すべき重要な機能上の違いがあります。
多くの研究室では、チューブの保管スペースを最小限に抑えてフリーザーボックスにうまく収まるように、雌ネジ付きバイアルを選択することがよくあります。それにもかかわらず、外部ネジ付きオプションがより良いオプションであると考えるかもしれません。サンプル以外のものがバイアルに入りにくい設計になっているため、汚染リスクが低いと考えられています。
一般にゲノムアプリケーションには外ねじ付きバイアルが好まれますが、どちらのオプションもバイオバンキングやその他のハイスループットアプリケーションに適していると考えられています。
ねじ切りに関して最後に考慮すべき点が 1 つあります。研究室で自動化を使用している場合は、機器グリッパーでどのようなねじを使用できるかを検討する必要があるかもしれません。
ストレージボリューム
極低温バイアルは、ほとんどのニーズに対応できるようさまざまなサイズが用意されていますが、ほとんどの場合、容量は 1 mL ～ 5 mL です。
重要なのは、クライオバイアルが満たされすぎていないことと、凍結中にサンプルが膨張した場合に備えて余分なスペースがあることを確認することです。実際には、これは、研究室が凍結保護剤に懸濁した細胞 0.5 mL のサンプルを保存する場合は 1 mL バイアルを選択し、1.0 mL のサンプルの場合は 2.0 mL バイアルを選択することを意味します。バイアルを過剰に充填しないためのもう 1 つのヒントは、目盛りが付いているクライオバイアルを使用することです。これにより、亀裂や漏れの原因となる膨張を確実に防ぐことができます。
スクリューキャップとフリップトップ
選択するトップのタイプは主に、液相窒素を使用するかどうかによって決まります。その場合は、ネジ蓋付きクライオバイアルが必要になります。これにより、誤った取り扱いや温度変化によって誤って開くことがなくなります。さらに、スクリューキャップにより、極低温ボックスからの取り出しが容易になり、より効率的に保管できます。
ただし、液体ステージ窒素を使用せず、より簡単に開けられる便利なトップが必要な場合は、フリップトップの方が良い選択肢です。これにより、開くのがはるかに簡単になるため、時間を大幅に節約できます。これは、高スループットの操作やバッチ プロセスを使用する操作で特に役立ちます。
シールセキュリティ
確実なシールを確保する最善の方法は、クライオバイアルのキャップとボトルが両方とも同じ材料で作られていることを確認することです。こうすることで、確実に同時に収縮と拡張が行われます。異なる材料を使用して作られている場合、温度の変化に応じて異なる速度で収縮および膨張し、隙間が生じ、漏れが発生し、その結果として汚染が生じる可能性があります。
一部の企業は、外ねじクライオバイアルで最高レベルのサンプル安全性を実現するために、デュアルワッシャーとフランジを提供しています。O リング クライオバイアルは、雌ねじ付きクライオバイアルとして最も信頼性が高いと考えられています。
ガラス vs プラスチック
安全性と利便性を考慮して、多くの研究室では現在、ヒートシール可能なガラス製アンプルの代わりにプラスチック、通常はポリプロピレンを使用しています。ガラスアンプルは、密封プロセス中に目に見えないピンホール漏れが発生する可能性があり、液体窒素中で保管した後に解凍すると爆発を引き起こす可能性があるため、現在では時代遅れの選択肢であると考えられています。また、サンプルのトレーサビリティを確保する上で重要な最新のラベル付け技術にも適していません。
自立式 vs 丸い底
極低温バイアルは、星形の底を備えた自立型または丸い底の両方でご利用いただけます。バイアルを表面に置く必要がある場合は、必ず自立型のものを選択してください。
トレーサビリティとサンプル追跡
極低温保管のこの分野は見落とされがちですが、サンプルの追跡とトレーサビリティは考慮すべき重要な側面です。極低温サンプルは何年にもわたって保存でき、その期間を過ぎるとスタッフが変わる可能性があり、適切に維持された記録がなければ身元が特定できなくなる可能性があります。
サンプルの識別ができるだけ簡単になるバイアルを必ず選択してください。注意すべき点は次のとおりです。
バイアルが間違った場所に置かれている場合に記録を見つけることができるように、十分な詳細を記録するための大きな書き込み領域 - 通常、細胞の ID、凍結された日付、および責任者のイニシャルが適切です。
サンプル管理および追跡システムを支援するバーコード
カラーキャップ
将来へのメモ – 超耐寒性チップが開発されており、個別のクライオバイアル内に取り付けると、詳細な熱履歴、詳細なバッチ情報、テスト結果、その他の関連品質文書を保存できる可能性があります。
利用可能なバイアルのさまざまな仕様を考慮することに加えて、凍結バイアルを液体窒素中で保管する技術的プロセスについても考慮する必要があります。
保管温度
サンプルの極低温保管にはいくつかの保管方法があり、それぞれが特定の温度で動作します。オプションとその動作温度には次のものがあります。
液相LN2: -196℃の温度を維持
蒸気相 LN2: モデルに応じて、-135°C ～ -190°C の特定の温度範囲で動作できます。
窒素蒸気冷凍庫: -20°C ～ -150°C
保存する細胞の種類と研究者が好む保存方法によって、研究室が 3 つの利用可能なオプションのうちどれを使用するかが決まります。
ただし、極度に低い温度が使用されるため、すべてのチューブや設計が適切または安全であるとは限りません。材料は極度の低温では非常に脆くなる可能性があり、選択した温度での使用に適していないバイアルを使用すると、保管または解凍中に容器が粉砕したり亀裂が入ったりする可能性があります。
一部の極低温バイアルは -175°C、-150°C、その他はわずか 80°C の温度に適しているため、適切な使用に関するメーカーの推奨事項を注意深く確認してください。
多くのメーカーが、自社の極低温バイアルは液相への浸漬には適さないと述べていることも注目に値します。これらのバイアルを液相で保管し、室温に戻すと、小さな漏れによる圧力の急激な上昇により、バイアルまたはキャップのシールが割れる可能性があります。
細胞を液体窒素の液相で保存する場合は、クライオフレックスチューブでヒートシールされた適切な極低温バイアルに細胞を保存するか、密閉されたガラスアンプルに細胞を保存することを検討してください。
投稿日時: 2022 年 11 月 25 日