Micropipeta este probabil cel mai utilizat instrument în laborator. Sunt folosite de oamenii de știință dintr-o gamă largă de sectoare, inclusiv mediul academic, spitalele și laboratoarele criminalistice, precum și dezvoltarea de medicamente și vaccinuri, pentru a transfera cantități precise, foarte mici, de lichid.
Deși poate fi enervant și frustrant să observi bule de aer în vârful pipetei de unică folosință dacă acestea nu sunt observate sau ignorate, acest lucru poate avea un impact uriaș asupra fiabilității și reproductibilității rezultatelor.
Vestea bună este că există câteva măsuri simple pe care le puteți lua pentru a preveni bulele de aer și a îmbunătăți eficiența laboratorului, satisfacția operatorilor, precum și acuratețea și precizia rezultatelor.
Mai jos, explorăm consecințele apariției unei bule de aer în vârful pipetei și ce ar trebui să faceți în continuare.
Consecința bulelor înVârf de pipetă
Chiar dacă utilizați cele mai precise, de top, bine întreținute, reparate și calibrate pipete, fiabilitatea rezultatelor poate fi afectată de erorile de laborator. Când bulele intră însfatpoate avea mai multe rezultate.
● Când utilizatorul observă bula de aer, trebuie să petreacă timp eliberând lichidul aspirat în mod corespunzător, să ejecteze vârful și să reia procesul.
● Bulele de aer nedetectate pot duce la un transfer de volum mic, modificând astfel concentrația amestecurilor de reacție, ceea ce duce la experimente eșuate și rezultate discutabile sau nesigure.
Aceste rezultate pot avea mai multe consecințe (1).
● Eficiență redusă a laboratorului – Testele și analizele vor trebui repetate, ceea ce va genera costuri cu forța de muncă și materialele, care pot fi destul de substanțiale.
● Rezultate ale testelor discutabile sau incorecte – Dacă sunt publicate rezultate incorecte, pot exista consecințe mai grave, inclusiv diagnostice greșite și rezultate slabe pentru pacienți.
● Retragerea manuscriselor din reviste – Dacă colegii nu reușesc să reproducă rezultatele dumneavoastră din cauza bulelor de aer care cauzează rezultate inexacte, lucrările pot fi retrase.
Cele mai bune practici pentru prevenirea bulelor de aer
În majoritatea cazurilor, bulele de aer din vârfurile pipetelor sunt cauzate de o eroare a operatorului. Problema fundamentală este, de obicei, o tehnică deficitară cauzată de o pregătire insuficientă sau de oboseală.
Pipetarea este o operațiune calificată care necesită 110% atenție, instruire adecvată și practică pentru a obține rezultate consistente și precise.
Deși există mai multe lucruri pe care le puteți face pentru a reduce erorile generale de pipetare, mai jos am evidențiat câteva dintre cele mai bune practici care pot fi utilizate pentru a evita bulele de aer învârfuri de pipetă.
Îmbunătățiți tehnica utilizatorului
Pipetați încet
Dacă pistonul este eliberat prea repede în timpul aspirării, pot intra bule de aer în vârf. Acest lucru poate fi problematic în special la transferul de lichide vâscoase. Un efect similar poate apărea dacă pistonul este eliberat prea repede după distribuire.
Pentru a evita bulele de aer la aspirare, aveți grijă să acționați pistonul pipetelor manuale într-un mod lin și uniform, aplicând o forță constantă.
Folosiți adâncimea corectă de imersie
Dacă vârful pipetei nu este introdus suficient de adânc sub meniscul rezervorului de lichid, poate duce la aspirarea aerului și, prin urmare, la formarea de bule.
Totuși, scufundarea vârfului prea adânc poate aspira mai mult lichid din cauza presiunii crescute sau pot apărea picături pe exteriorul vârfului, așa că este important să scufundați vârful.vârful pipeteila adâncimea corectă.
Adâncimea recomandată variază în funcție de dimensiunea, tipul și marca pipetei. Deși recomandările producătorului trebuie respectate, iată un ghid general furnizat de Laboratorul Național de Fizică.
Ghid pentru adâncimea de imersie a vârfului
Volumul pipetei (µl) și adâncimea de imersie (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-umidificareVârfuri de pipetă
La pipetarea volumelor mai mari de 10 µlvârfuri de pipetăsunt de obicei umezite în prealabil prin umplerea lor de mai multe ori cu lichidul distribuit și expulzarea acestuia pentru a îmbunătăți precizia.
Neumezirea prealabilă a vârfurilor poate duce la formarea de bule de aer, în special atunci când se utilizează lichide vâscoase sau hidrofobe. Pentru a evita bulele de aer, asigurați-vă că umeziți în prealabil vârfurile atunci când pipetați un volum mai mare de 10 µl.
Utilizați tehnici de pipetare inversă, dacă este cazul
Substanțe vâscoase: O problemă frecventă la pipetarea substanțelor vâscoase, cum ar fi soluțiile de proteine sau acizi nucleici, glicerol și Tween 20/40/60/80, este formarea frecventă a bulelor atunci când se utilizează tehnica de pipetare directă.
Pipetarea lentă, folosind tehnica de pipetare inversă, reduce riscul formării de bule la transferul soluțiilor vâscoase.
Tehnica ELISA
Pipetarea inversă este, de asemenea, recomandată la pipetarea volumelor mici înPlăci de testare cu 96 de godeuripentru tehnicile ELISA. Atunci când bulele de aer sunt aspirate în pipetă sau distribuite în godeuri la adăugarea reactivilor, acestea pot influența valorile densității optice și rezultatele. Se recomandă pipetarea inversă pentru a minimiza sau elimina această problemă.
Folosiți pipete ergonomice
Pipetele vechi, care nu au fost proiectate având în vedere ergonomia, necesită mai mult efort fizic, obosești, iar tehnica de pipetare devine neglijentă și deficitară. Erorile menționate mai sus, cum ar fi eliberarea rapidă a pistonului, pot apărea mai frecvent.
Investind într-o soluție mai ergonomică, veți putea menține o tehnică excelentă și veți preveni formarea bulelor de aer din cauza unei tehnici deficitare.
Acordați-vă timp pentru instruirea personalului
Instruirea și evaluarea regulată a personalului în tehnicile de pipetare poate asigura reducerea erorilor operatorului și a formării bulelor de aer.
Luați în considerare mai multe soluții automatizate
După cum s-a menționat mai sus, majoritatea bulelor de aer sunt cauzate de operator. Este posibil să se reducă eroarea operatorului și confortul prin utilizarea de pipete electronice sau a unei platforme flexibile de manipulare a lichidelor, cum ar fiRobot de manipulare a lichidelor Agilent Bravo.
Folosește calitate bunăVârfuri de pipetă
Micropipetele sunt de obicei achiziționate cu grijă, dar adesea se acordă puțină atenție calității vârfului de pipetă de unică folosință. Datorită influenței pe care o are un vârf asupra rezultatelor pipetării, standardul ISO 8655 impune o calibrare suplimentară dacă se utilizează pipete și vârfuri de la diferiți producători.
Acest lucru s-ar putea datora faptului că multe vârfuri ieftine pot părea bune inițial, dar atunci când le studiezi cu atenție, acestea pot avea umflături, proeminențe, zgârieturi și bule de aer, pot fi îndoite sau pot conține impurități.
Cumpărarea de vârfuri de bună calitate, fabricate din polipropilenă de înaltă calitate, poate reduce apariția bulelor de aer.
Pentru a concluziona
Bulele de aer în vârful pipetei au un impact asupra eficienței laboratorului, precum și asupra inexactității și impreciziei rezultatelor. Am menționat câteva lucruri pe care le puteți face pentru a evita pătrunderea bulelor de aer învârful pipetei.
Totuși, dacă este de calitate slabăvârfuri de pipetăcauzează pătrunderea bulelor de aer în vârful pipetei, veți fi încântați să aflați că potrivirea noastră universalăvârfuri de pipetăsunt fabricate la cele mai înalte standarde și sunt fabricate din polipropilenă pură de calitate premium.
Compania biomedicală Suzhou AceProduc vârfuri de pipetă universale de înaltă calitate cu volume de 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 și 1250 µL, 96 de vârfuri/rack. Durabilitate excepțională - toate rack-urile pentru vârfuri ACE rezistă cerințelor de utilizare cu pipete multicanal. Sterile, cu filtru, fără RNază/DNază și apirogene.
Bine ați venit să ne contactați pentru mai multe detalii.
Data publicării: 29 decembrie 2022