Kutter du avpipettespissnår jeg pipetterer glyserol? Jeg gjorde det under doktorgraden min, men jeg måtte lære at dette øker unøyaktigheten og upresisheten i pipetteringen min. Og for å være ærlig, da jeg kuttet av spissen, kunne jeg også ha helt glyserolen direkte fra flasken og ned i røret. Så jeg endret teknikken min for å forbedre pipetteringsresultatene og få mer pålitelige og reproduserbare resultater når jeg arbeider med viskøse væsker.
En væskekategori som krever spesiell oppmerksomhet ved pipettering er viskøse væsker. Disse brukes ofte i laboratoriet, enten i ren form eller som bufferkomponenter. Kjente representanter for viskøse væsker i forskningslaboratorier er glyserol, Triton X-100 og Tween® 20. Men laboratorier som utfører kvalitetskontroll av matvarer, kosmetikk, legemidler og andre forbrukerprodukter, håndterer også viskøse løsninger daglig.
Viskositet angis enten som dynamisk eller kinematisk viskositet. I denne artikkelen konsentrerer jeg meg om den dynamiske viskositeten til væsker, siden den beskriver væskens bevegelse. Viskositetsgraden er spesifisert i millipascal per sekund (mPa*s). Flytende prøver rundt 200 mPa*s, som for eksempel 85 % glyserol, kan fortsatt overføres ved hjelp av en klassisk luftputepipette. Ved bruk av en spesiell teknikk, revers pipettering, reduseres aspirasjon av luftbobler eller rester i spissen kraftig, noe som fører til mer nøyaktige pipetteringsresultater. Men det er fortsatt ikke det beste vi kan gjøre for å forbedre pipettering av viskøse væsker (se fig. 1).
Når viskositeten øker, øker vanskelighetene. Middels viskøse løsninger opptil 1000 mPa*s er vanskeligere å overføre med klassiske luftputepipetter. På grunn av molekylenes høye indre friksjon har viskøse væsker en veldig langsom strømningsatferd, og pipettering må gjøres veldig sakte og forsiktig. Omvendt pipetteringsteknikk er ofte ikke nok for nøyaktig væskeoverføring, og mange veier prøvene sine. Denne strategien betyr også å ta hensyn til væskens tetthet samt laboratorieforhold som fuktighet og temperatur for å nøyaktig beregne det nødvendige væskevolumet i vekt. Derfor anbefales andre pipetteringsverktøy, såkalte positive fortrengningsverktøy. Disse har en spiss med et integrert stempel, akkurat som en sprøyte. Derfor kan væske lettere aspireres og dispenseres, samtidig som nøyaktig væskeoverføring gis. En spesiell teknikk er ikke nødvendig.
Likevel når også positive fortrengningsverktøy en grense med svært viskøse løsninger som flytende honning, hudkrem eller visse mekaniske oljer. Disse svært krevende væskene trenger et annet spesialverktøy som også bruker prinsippet om positiv fortrengning, men som i tillegg har en optimalisert design for å håndtere svært viskøse løsninger. Dette spesialverktøyet har blitt sammenlignet med eksisterende positive fortrengningsspisser for å oppnå en terskel der det er viktig å bytte fra en vanlig dispenseringsspiss til en spesialspiss for svært viskøse løsninger. Det ble vist at nøyaktigheten økes og kreftene som trengs for aspirasjon og dispensering reduseres når man bruker en spesialspiss for svært viskøse væsker. For mer detaljert informasjon og væskeeksempler, vennligst last ned applikasjonsnotat 376 om optimalisert ytelse for svært viskøse væsker.
Publisert: 23. januar 2023