Přerušili jstešpička pipetypři pipetování glycerolu?Během doktorátu jsem to udělal, ale musel jsem se naučit, že to zvyšuje nepřesnost a nepřesnost mého pipetování.A abych byl upřímný, když jsem uřízl špičku, mohl jsem také nalít glycerol přímo z lahvičky do tuby.Změnil jsem tedy svou techniku, abych zlepšil výsledky pipetování a získal spolehlivější a reprodukovatelnější výsledky při práci s viskózními kapalinami.
Kategorie kapalin, která vyžaduje zvláštní pozornost při pipetování, jsou viskózní kapaliny.Ty se často používají v laboratoři, buď v čisté formě, nebo jako složky pufru.Slavnými zástupci viskózních kapalin ve výzkumných laboratořích jsou glycerol, Triton X-100 a Tween® 20. Ale také laboratoře provádějící kontrolu kvality potravin, kosmetiky, léčiv a dalších spotřebních produktů se viskózními roztoky denně zabývají.
Viskozita se uvádí buď jako dynamická nebo kinematická viskozita.V tomto článku se soustředím na dynamickou viskozitu kapalin, protože popisuje pohyb kapaliny.Stupeň viskozity se udává v milipascalech za sekundu (mPa*s).Spíše tekuté vzorky kolem 200 mPa*s, jako je 85% glycerol, lze stále přenášet pomocí klasické pipety se vzduchovým polštářem.Při použití speciální techniky je reverzní pipetování, aspirace vzduchových bublin nebo zbytků ve špičce výrazně snížena a vede k přesnějším výsledkům pipetování.Přesto to není to nejlepší, co můžeme udělat pro zlepšení pipetování viskózních kapalin (viz obr. 1).
Když se viskozita zvýší, potíže narostou.Středně viskózní roztoky do 1000 mPa*s se obtížněji přenášejí klasickými vzduchovými polštářky.Vzhledem k vysokému vnitřnímu tření molekul mají viskózní kapaliny velmi pomalé tokové chování a pipetování se musí provádět velmi pomalu a opatrně.Technika reverzního pipetování často nestačí k přesnému přenosu kapaliny a mnoho lidí své vzorky váží.Tato strategie také znamená vzít v úvahu hustotu kapaliny a také laboratorní podmínky, jako je vlhkost a teplota, aby bylo možné přesně vypočítat potřebný objem kapaliny v hmotnosti.Proto se doporučují jiné pipetovací nástroje, tzv. pozitivní displacement tools.Ty mají hrot s integrovaným pístem, stejně jako injekční stříkačka.Proto lze kapalinu snadněji nasávat a vydávat, zatímco je zajištěn přesný přenos kapaliny.Speciální technika není nutná.
Nicméně i objemové nástroje dosahují limitu u velmi viskózních roztoků, jako je tekutý med, pleťový krém nebo některé mechanické oleje.Tyto velmi náročné kapaliny potřebují další speciální nástroj, který také využívá princip pozitivního výtlaku, ale navíc má optimalizovanou konstrukci pro řešení vysoce viskózních roztoků.Tento speciální nástroj byl porovnán s existujícími objemovými koncovkami, aby se dosáhlo prahu, při kterém je důležité přejít z normální dávkovací koncovky na speciální koncovku pro vysoce viskózní roztoky.Bylo prokázáno, že při použití speciální špičky pro vysoce viskózní kapaliny se zvyšuje přesnost a snižují se síly potřebné pro nasávání a dávkování.Pro další podrobné informace a příklady kapalin si stáhněte aplikační poznámku 376 o optimalizovaném výkonu pro vysoce viskózní kapaliny.
Čas odeslání: 23. ledna 2023