Hva er kryoampuller?
Kryogene oppbevaringsampullerer små, korkede og sylindriske beholdere designet for oppbevaring og konservering av prøver ved ultralave temperaturer. Selv om disse hetteglassene tradisjonelt har vært laget av glass, er de nå mye mer vanlig laget av polypropylen av bekvemmelighets- og kostnadsgrunner. Kryohetteglass har blitt nøye designet for å tåle temperaturer så lave som -196 ℃, og for å imøtekomme et bredt utvalg av celletyper. Disse varierer fra diagnostiske stamceller, mikroorganismer, primærceller til etablerte cellelinjer. Utover det kan det også være små flercellede organismer som lagres ikryogene oppbevaringsflasker, samt nukleinsyre og proteiner som må lagres ved kryogene lagringstemperaturnivåer.
Kryogene oppbevaringsampuller finnes i mange forskjellige former, og å finne riktig type som oppfyller alle dine behov vil sikre at du opprettholder prøveintegriteten uten å betale for mye. Les gjennom artikkelen vår for å lære mer om de viktigste kjøpsfaktorene når du velger riktig kryoampulle til laboratoriebruken din.
Egenskaper ved kryogen ampulle å vurdere
Eksterne vs. interne tråder
Folk tar ofte dette valget basert på personlige preferanser, men det er faktisk viktige funksjonelle forskjeller å vurdere mellom de to trådtypene.
Mange laboratorier velger ofte innvendige gjengede ampuller for å minimere oppbevaringsplassen til rørene og dermed bedre passe inn i frysebokser. Til tross for dette kan du vurdere at det utvendige gjengede alternativet er det bedre alternativet for deg. De anses å ha lavere kontamineringsrisiko på grunn av designet som gjør det enda vanskeligere for noe annet enn prøven å komme inn i ampullen.
Utvendig gjengede ampuller er vanligvis foretrukket for genomiske applikasjoner, men begge alternativene anses som egnet for biobankvirksomhet og andre applikasjoner med høy gjennomstrømning.
En siste ting å vurdere når det gjelder gjenging – hvis laboratoriet ditt bruker automatisering, må du kanskje vurdere hvilke gjenger som kan brukes med instrumentgriperne.
Lagringsvolum
Kryogene ampuller er tilgjengelige i en rekke størrelser for å dekke de fleste behov, men vanligvis varierer de med en kapasitet på mellom 1 ml og 5 ml.
Nøkkelen er å sørge for at kryoampullen ikke er overfylt, og at det er ekstra plass tilgjengelig, i tilfelle prøven sveller under frysing. I praksis betyr dette at laboratorier velger 1 ml-ampuller når de oppbevarer prøver på 0,5 ml celler suspendert i kryobeskyttelsesmiddel, og 2,0 ml-ampuller for 1,0 ml prøve. Et annet tips for å ikke overfylle ampullene er å bruke kryoampuller med graderte markeringer, noe som vil sikre at du forhindrer hevelse som kan forårsake sprekker eller lekkasje.
Skrukork vs. vippekork
Hvilken type lokk du velger avhenger hovedsakelig av om du skal bruke flytende nitrogen eller ikke. I så fall trenger du kryohette med skrukork. Dette sikrer at de ikke kan åpne seg ved et uhell på grunn av feil håndtering eller temperaturendringer. I tillegg gjør skrukorkene det enklere å ta dem ut av kryogenbokser og gir mer effektiv lagring.
Men hvis du ikke bruker flytende nitrogen og trenger en mer praktisk kork som er enklere å åpne, er en vippekork et bedre alternativ. Dette vil spare deg mye tid siden den er mye enklere å åpne, noe som gjør den spesielt nyttig i operasjoner med høy gjennomstrømning og de som bruker batchprosesser.
Sealsikkerhet
Den beste måten å sikre en sikker forsegling på er å sørge for at kryohetten og flasken er laget av samme materiale. Dette vil sikre at de krymper og utvider seg samtidig. Hvis de er laget av forskjellige materialer, vil de krympe og utvide seg med ulik hastighet når temperaturen endres, noe som fører til hull og potensiell lekkasje og påfølgende forurensning.
Noen selskaper tilbyr doble skiver og flens for høyeste nivå av prøvesikkerhet på utvendig gjengede kryoglass. O-ring-kryoglass regnes som de mest pålitelige for innvendig gjengede kryoglass.
Glass vs. plast
Av sikkerhets- og bekvemmelighetsgrunner bruker mange laboratorier nå plast, vanligvis polypropylen, i stedet for varmeforseglingsbare glassampuller. Glassampuller anses nå for å være et utdatert valg, da det kan oppstå usynlige nålehullslekkasjer under forseglingsprosessen, som kan føre til at de eksploderer når de tines etter lagring i flytende nitrogen. De er heller ikke like egnet for moderne merketeknikker, noe som er nøkkelen til å sikre sporbarhet av prøver.
Selvstående vs. avrundede bunner
Kryogeniske ampuller er tilgjengelige både som frittstående med stjerneformet bunn eller som avrundet bunn. Hvis du trenger å plassere ampullene dine på en overflate, sørg for å velge den frittstående.
Sporbarhet og prøvesporing
Dette området med kryogen lagring blir ofte oversett, men sporing og sporbarhet av prøver er et viktig aspekt å vurdere. Kryogene prøver kan lagres i mange år, og i løpet av denne perioden kan personalet endres, og uten skikkelig vedlikeholdte registre kan de bli uidentifiserbare.
Sørg for å velge hetteglass som gjør prøveidentifikasjon så enkel som mulig. Ting du bør se etter inkluderer:
Store skriveflater for å registrere tilstrekkelige detaljer, slik at journaler kan finnes igjen hvis et hetteglass befinner seg på feil sted – vanligvis er celleidentitet, frysedato og initialer til den ansvarlige personen tilstrekkelig.
Strekkoder for å hjelpe prøvehåndtering og sporingssystemer
Fargede luer
En merknad for fremtiden – ultrakuldebestandige brikker er under utvikling som, når de monteres i individuelle kryorør, potensielt kan lagre en detaljert termisk historikk samt detaljert batchinformasjon, testresultater og annen relevant kvalitetsdokumentasjon.
I tillegg til å ta hensyn til de ulike spesifikasjonene for tilgjengelige hetteglass, må man også tenke på den tekniske prosessen med å oppbevare kryohetteglass i flytende nitrogen.
Lagringstemperatur
Det finnes flere lagringsmetoder for kryogen lagring av prøver, og hver metode opererer ved en spesifikk temperatur. Alternativer og temperaturer de opererer ved inkluderer:
Flytende fase LN2: opprettholde en temperatur på -196 ℃
Dampfase LN2: kan operere ved spesifikke temperaturområder mellom -135 °C og -190 °C, avhengig av modell.
Nitrogendampfrysere: -20 °C til -150 °C
Celletypen som lagres og forskers foretrukne lagringsmetode vil avgjøre hvilket av de tre tilgjengelige alternativene laboratoriet ditt bruker.
På grunn av de ekstremt lave temperaturene som brukes, vil imidlertid ikke alle rør eller design være egnet eller trygge. Materialer kan bli ekstremt sprø ved ekstremt lave temperaturer, og bruk av et hetteglass som ikke er egnet for bruk ved den valgte temperaturen kan føre til at beholderen knuses eller sprekker under lagring eller tining.
Sjekk produsentens anbefalinger for riktig bruk nøye, da noen kryogeniske ampuller er egnet for temperaturer så lave som -175 °C, noen -150 °C, andre bare 80 °C.
Det er også verdt å merke seg at mange produsenter oppgir at deres kryogeniske ampuller ikke er egnet for nedsenking i væskefasen. Hvis disse ampullene oppbevares i væskefasen når de går tilbake til romtemperatur, kan disse ampullene eller forseglingene knuses på grunn av rask trykkoppbygging forårsaket av små lekkasjer.
Hvis cellene skal lagres i flytende fase av flytende nitrogen, bør man vurdere å lagre celler i egnede kryogene ampuller varmeforseglet i cryoflex-slanger eller lagre celler i glassampuller som er hermetisk lukket.
Publisert: 25. november 2022