Net als een chef-kok die een mes gebruikt, heeft een wetenschapper pipetteervaardigheden nodig. Een ervaren chef-kok kan misschien een wortel in reepjes snijden, schijnbaar gedachteloos, maar het kan nooit kwaad om enkele pipetteerrichtlijnen in gedachten te houden – hoe ervaren de wetenschapper ook is. Hier geven drie experts hun beste tips.
"Je moet de juiste techniek hanteren bij het handmatig doseren van vloeistof", zegt Magali Gaillard, senior manager portefeuillebeheer bij MLH Business Line, Gilson (Villiers-le-Bel, Frankrijk). "Enkele van de meest voorkomende pipetteerfouten houden verband met onzorgvuldig gebruik van pipetpunten, inconsistente ritmes of timing, en onjuiste bediening van de pipet."
Soms kiest een wetenschapper zelfs de verkeerde pipet. Zoals Rishi Porecha, wereldwijd productmanager bijRaininInstruments (Oakland, CA) zegt: "Een aantal veelvoorkomende fouten bij het pipetteren zijn onder meer het niet gebruiken van de juiste volumepipet voor een specifieke taak en het gebruiken van een luchtverplaatsingspipet voor het verwerken van niet-waterige vloeistoffen." Bij viskeuze vloeistoffen moet altijd een positieve-verplaatsingspipet worden gebruikt.
Voordat we ingaan op specifieke pipetteerprocedures, moeten we enkele algemene concepten overwegen. "Elke keer dat pipetgebruikers aan de slag gaan, moeten ze bedenken welk experiment ze uitvoeren, met welke vloeistoffen ze werken en welke doorvoer ze willen voordat ze een pipet kiezen", zegt Porecha. "Realistisch gezien beschikt geen enkel lab over alle pipetten die een gebruiker zou kunnen wensen, maar als een gebruiker kijkt naar de beschikbare hulpmiddelen in het lab en op de afdeling, krijgt hij mogelijk een beter idee van welke bestaande pipetten hij in een assay kan gebruiken of welke pipetten hij eventueel wil aanschaffen."
De functies van de huidige pipetten reiken verder dan het apparaat zelf. Dankzij de vooruitgang in vloeistofverwerking kunnen gebruikers hun pipet nu verbinden met de cloud. Dankzij deze connectiviteit kan een gebruiker protocollen downloaden of aangepaste protocollen maken. Pipetteergegevens kunnen zelfs in de cloud worden vastgelegd, wat een manier is om fouten te identificeren en het pipetteerproces te verbeteren, met name door de voortdurende nauwkeurigheid, of het gebrek daaraan, te volgen.
Met de juiste uitrusting bij de hand is de volgende uitdaging het correct uitvoeren van de stappen.
Sleutel tot succes
Met een luchtverplaatsingspipet vergroten de volgende stappen de kans op het nauwkeurig en herhaaldelijk meten van een specifiek volume:
- Stel het volume in op de pipet.
- Druk de zuiger in.
- Dompel de punt tot de juiste diepte in (deze diepte kan variëren, afhankelijk van de pipet en de punt) en laat de zuiger vervolgens rustig naar de rustpositie zakken.
- Wacht ongeveer een seconde totdat de vloeistof in detip.
- Plaats de pipet, onder een hoek van 10-45 graden, tegen de wand van de ontvangstkamer en druk de zuiger geleidelijk in tot aan de eerste stop.
- Wacht één seconde en druk de zuiger vervolgens tot de tweede stop in.
- Schuif de punt langs de wand van het vat omhoog om de pipet te verwijderen.
- Laat de zuiger terugkeren naar de rustpositie.
Plaatsingstijd: 12-12-2022