マイクロピペットは、おそらく実験室で最もよく使われるツールです。学術機関、病院、法医学研究所、さらには医薬品やワクチンの開発など、幅広い分野の科学者が、非常に微量の液体を正確に移送するために使用しています。
使い捨てピペットのチップに気泡を見つけるのは面倒でイライラするかもしれませんが、気泡に気づかなかったり無視したりすると、結果の信頼性と再現性に大きな影響を与える可能性があります。
幸いなことに、気泡を防ぎ、研究室の効率、オペレーターの満足度、結果の正確さと精度を向上させるために実行できる簡単な対策がいくつかあります。
以下では、ピペットの先端に気泡が入ってしまった場合の影響と、次に何をすべきかについて説明します。
バブルの結末ピペットチップ
最も正確で、最高級で、適切にメンテナンスされ、点検・校正されたピペットを使用していても、実験室でのエラーによって結果の信頼性が損なわれる可能性があります。ヒントいくつかの結果が考えられます。
● ユーザーは気泡に気付いた場合、吸引した液体を適切に吐出し、チップを取り出し、プロセスを再度開始するのに時間を費やす必要があります。
● 気泡が検出されないと、転送量が少なくなり、反応混合物の濃度が変化して実験が失敗し、疑わしい結果や信頼できない結果が生じる可能性があります。
これらの結果にはいくつかの意味合いがある(1)。
● 研究室の効率の低下 – テストと分析を繰り返す必要があり、人件費と材料費がかなりかかる可能性があります。
● 疑わしいまたは不正確な検査結果 – 不正確な結果が発表されると、誤診や患者の転帰不良など、より深刻な結果を招く可能性があります。
● ジャーナルからの論文の撤回 – 気泡が原因で不正確な結果が生じ、同僚があなたの結果を再現できない場合は、論文が撤回されることがあります。
気泡を防ぐためのベストプラクティス
ピペットチップ内の気泡は、ほとんどの場合、操作者のミスが原因です。多くの場合、訓練不足や疲労による不適切な操作が根本的な問題となります。
ピペッティングは熟練した操作であり、一貫した正確な結果を得るためには 110% の注意、適切なトレーニング、練習が必要です。
一般的なピペッティングエラーを減らすためにできることはいくつかありますが、以下に気泡の発生を防ぐために実践できるベストプラクティスをいくつか紹介します。ピペットチップ.
ユーザーテクニックの向上
ゆっくりピペットで吸い取る
吸引時にプランジャーを急激に離すと、チップ内に気泡が入り込む可能性があります。これは特に粘性の高い液体を移送する際に問題となる可能性があります。吐出後にプランジャーを急激に離した場合にも同様の影響が生じる可能性があります。
吸引時に気泡が発生しないように、手動ピペットのピストンを一定の力で滑らかかつ規則的に操作するように注意してください。
適切な浸水深度を使用する
ピペットの先端を液体リザーバーのメニスカスの下に十分深く浸さないと、空気が吸い込まれ、気泡が発生する可能性があります。
しかし、先端を深く浸しすぎると、圧力が上昇してより多くの液体を吸引したり、先端の外側に液滴が発生したりする可能性がありますので、ピペットチップ正しい深さまで。
推奨される深さはピペットのサイズ、種類、メーカーによって異なります。メーカーの推奨に従う必要がありますが、国立物理学研究所が提供する一般的なガイドを以下に示します。
先端浸漬深さガイド
ピペット容量(µl)と浸漬深さ(mm)
- 1~100:2~3
- 100~1,000:2~4
- 1,000~5,000:2~5
プレウェットピペットチップ
10µlを超える容量をピペッティングする場合ピペットチップ通常、精度を向上させるために、吐出する液体を数回注入し、それを廃棄することで事前に湿らせます。
事前にチップを濡らさないと、特に粘性液体や疎水性液体を使用する場合に気泡が発生する可能性があります。気泡を防ぐため、10µlを超える容量でピペッティングを行う際は、必ずチップを事前に濡らしてください。
適切な場合はリバースピペッティング技術を使用する
粘性物質: タンパク質や核酸溶液、グリセロール、Tween 20/40/60/80 などの粘性物質をピペッティングする場合によく発生する問題は、フォワード ピペッティング テクニックを使用すると頻繁に気泡が発生することです。
逆ピペッティング法を使用してゆっくりとピペッティングすると、粘性のある溶液を移すときに気泡が発生するリスクが軽減されます。
ELISA法
少量をピペッティングする場合にもリバースピペッティングが推奨されます。96ウェルマイクロテストプレートELISA法では、試薬添加時に気泡がピペット内に吸い込まれたり、ウェル内に分注されたりすると、光学密度の値や結果に影響を与える可能性があります。この問題を最小限に抑える、または完全に排除するために、リバースピペッティングが推奨されます。
人間工学に基づいたピペットを使用する
人間工学に基づいて設計されていない旧式のピペットは、より多くの体力を必要とし、疲労感を伴い、ピペッティング技術が雑になり、不十分になります。プランジャーの急なリリースなどの前述のエラーが頻繁に発生する可能性があります。
より人間工学的なソリューションに投資することで、優れた技術を維持し、不十分な技術による気泡の発生を防ぐことができます。
スタッフのトレーニングに時間をかける
ピペッティング技術についてスタッフを定期的にトレーニングし、評価することで、オペレーターのエラーや気泡の発生を減らすことができます。
より自動化されたソリューションを検討する
前述の通り、気泡のほとんどは作業者によって発生します。電動ピペットや、以下のようなフレキシブルな液体処理プラットフォームを使用することで、作業者のミスや作業快適性を低減できる可能性があります。Agilent Bravo リキッドハンドリングロボット.
良質のものを使用するピペットチップ
マイクロピペットは通常、慎重に購入されますが、使い捨てピペットチップの品質についてはあまり考慮されていません。チップはピペッティング結果に影響を与えるため、ISO 8655規格では、異なるメーカーのピペットとチップを使用する場合、追加の校正が義務付けられています。
これは、多くの安価なチップは最初は問題ないように見えても、注意深く調べると、フラッシュ、突起、傷、気泡があったり、曲がっていたり、不純物が含まれていたりする可能性があるためです。
高品質のポリプロピレン製の良質のチップを購入すると、気泡の発生を減らすことができます。
結論として
ピペットチップに気泡が入ると、実験室の効率性が低下するだけでなく、結果の精度や正確性にも影響します。気泡の侵入を防ぐためにできることをいくつかご紹介します。ピペットチップ.
しかし、品質が悪い場合はピペットチップピペットチップに気泡が入り込む原因となっている場合は、当社のユニバーサルフィットが役立ちます。ピペットチップ最高水準で製造されており、最高級の純粋なポリプロピレンで作られています。
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投稿日時: 2022年12月29日
