La micropipetta è probabilmente lo strumento più utilizzato in laboratorio. Viene utilizzata da scienziati in una vasta gamma di settori, tra cui il mondo accademico, ospedaliero e forense, nonché nello sviluppo di farmaci e vaccini, per trasferire quantità precise e molto piccole di liquido.
Anche se può essere fastidioso e frustrante individuare bolle d'aria nella punta della pipetta monouso se non vengono individuate o ignorate, ciò può avere un impatto enorme sull'affidabilità e sulla riproducibilità dei risultati.
La buona notizia è che è possibile adottare alcune semplici misure per prevenire la formazione di bolle d'aria e migliorare l'efficienza del laboratorio, la soddisfazione degli operatori, nonché l'accuratezza e la precisione dei risultati.
Di seguito analizzeremo le conseguenze della formazione di una bolla d'aria nella punta della pipetta e cosa fare successivamente.
Le conseguenze delle bolle nelPunta della pipetta
Anche se si utilizzano le pipette più precise, di alta gamma, ben manutenute, revisionate e calibrate, l'affidabilità dei risultati può essere influenzata da errori di laboratorio. Quando le bolle entrano nelmanciapuò avere diversi esiti.
● Quando l'utente individua la bolla d'aria, deve dedicare del tempo all'erogazione appropriata del liquido aspirato, espellere la punta e ricominciare il processo.
● Le bolle d'aria non rilevate possono causare un trasferimento di volume basso, alterando così la concentrazione delle miscele di reazione, dando luogo a esperimenti falliti e a risultati discutibili o inaffidabili.
Questi risultati possono avere diverse conseguenze (1).
● Riduzione dell'efficienza di laboratorio: test e analisi dovranno essere ripetuti, con conseguenti costi di manodopera e materiali che possono essere piuttosto ingenti.
● Risultati dei test discutibili o errati: se vengono pubblicati risultati errati, le conseguenze potrebbero essere più gravi, tra cui diagnosi errate e scarsi risultati per i pazienti.
● Ritiro dei manoscritti dalle riviste: se i colleghi non riescono a replicare i risultati a causa di bolle d'aria che causano risultati imprecisi, gli articoli potrebbero essere ritirati.
Le migliori pratiche per prevenire le bolle d'aria
Nella maggior parte dei casi, le bolle d'aria nei puntali delle pipette sono causate da errori dell'operatore. Il problema principale è solitamente una tecnica inadeguata dovuta a formazione insufficiente o affaticamento.
Il pipettaggio è un'operazione complessa che richiede attenzione al 110%, formazione adeguata e pratica per ottenere risultati costanti e accurati.
Sebbene ci siano diverse cose che puoi fare per ridurre gli errori generali di pipettaggio, di seguito abbiamo evidenziato alcune buone pratiche che possono essere impiegate per evitare bolle d'aria inpunte per pipette.
Migliorare la tecnica dell'utente
Pipettare lentamente
Se lo stantuffo viene rilasciato troppo rapidamente durante l'aspirazione, potrebbero formarsi bolle d'aria nella punta. Questo può essere particolarmente problematico nel trasferimento di liquidi viscosi. Un effetto simile può verificarsi se lo stantuffo viene rilasciato troppo rapidamente dopo l'erogazione.
Per evitare la formazione di bolle d'aria durante l'aspirazione, fare attenzione a azionare lo stantuffo delle pipette manuali in modo fluido e regolare, applicando una forza costante.
Utilizzare la corretta profondità di immersione
Se la punta della pipetta non viene immersa sufficientemente al di sotto del menisco del serbatoio del liquido, si può verificare l'aspirazione di aria e quindi la formazione di bolle.
Tuttavia, immergere la punta troppo in profondità può aspirare più liquido a causa dell'aumento della pressione o possono formarsi goccioline sulla parte esterna della punta, quindi è importante immergere lapunta della pipettaalla profondità corretta.
La profondità consigliata varia a seconda delle dimensioni, del tipo e della marca della pipetta. Sebbene sia opportuno seguire le raccomandazioni del produttore, ecco una guida generale fornita dal National Physical Laboratory.
Guida alla profondità di immersione della punta
Volume della pipetta (µl) e profondità di immersione (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-bagnatoPuntali per pipette
Quando si pipettano volumi superiori a 10 µlpunte per pipettevengono solitamente pre-inumiditi riempiendoli più volte con il liquido da erogare ed espellendolo negli scarti per migliorarne la precisione.
La mancata pre-inumidimento può causare la formazione di bolle d'aria, soprattutto quando si utilizzano liquidi viscosi o idrofobi. Per evitare la formazione di bolle d'aria, assicurarsi di pre-inumidire i puntali quando si pipettano volumi superiori a 10 µl.
Utilizzare tecniche di pipettaggio inverso se appropriato
Sostanze viscose: un problema comune durante il pipettaggio di sostanze viscose come soluzioni di proteine o acidi nucleici, glicerolo e Tween 20/40/60/80 è la frequente formazione di bolle quando si utilizza la tecnica di pipettaggio diretto.
Pipettando lentamente, utilizzando la tecnica del pipettaggio inverso, si riduce il rischio di formazione di bolle durante il trasferimento di soluzioni viscose.
Tecnica ELISA
Si consiglia anche il pipettaggio inverso quando si pipettano piccoli volumi inPiastre per microtest a 96 pozzettiPer le tecniche ELISA. Quando bolle d'aria vengono aspirate nella pipetta o distribuite nei pozzetti durante l'aggiunta dei reagenti, possono influenzare i valori di densità ottica e i risultati. Si raccomanda il pipettaggio inverso per ridurre al minimo o eliminare questo problema.
Utilizzare pipette ergonomiche
Le pipette di vecchia generazione, non progettate tenendo conto dell'ergonomia, richiedono maggiore sforzo fisico, causano stanchezza e la tecnica di pipettaggio diventa imprecisa e poco precisa. Gli errori sopra menzionati, come il rilascio rapido dello stantuffo, possono verificarsi più frequentemente.
Investendo in una soluzione più ergonomica, potrai mantenere una tecnica eccellente e prevenire la formazione di bolle d'aria dovute a una tecnica scadente.
Prenditi del tempo per formare il personale
La formazione e la valutazione regolari del personale sulle tecniche di pipettaggio possono garantire la riduzione degli errori degli operatori e della formazione di bolle d'aria.
Considerare soluzioni più automatizzate
Come accennato in precedenza, la maggior parte delle bolle d'aria è causata dall'operatore. È possibile ridurre l'errore dell'operatore e il comfort utilizzando pipette elettroniche o una piattaforma flessibile per la manipolazione dei liquidi comeRobot per la manipolazione dei liquidi Agilent Bravo.
Usa buona qualitàPuntali per pipette
Le micropipette vengono solitamente acquistate con cura, ma spesso si presta poca attenzione alla qualità del puntale monouso. A causa dell'influenza che il puntale ha sui risultati del pipettaggio, la norma ISO 8655 richiede una calibrazione aggiuntiva se si utilizzano pipette e puntali di produttori diversi.
Ciò potrebbe essere dovuto al fatto che molte punte economiche possono sembrare buone a primo impatto, ma se le si esamina attentamente potrebbero presentare sbavature, sporgenze, graffi e bolle d'aria, oppure potrebbero essere piegate o contenere impurità.
L'acquisto di punte di buona qualità, realizzate in polipropilene di alta qualità, può ridurre la formazione di bolle d'aria.
Per concludere
La presenza di bolle d'aria nella punta della pipetta influisce sull'efficienza del laboratorio, oltre a compromettere l'accuratezza e l'imprecisione dei risultati. Abbiamo evidenziato diverse misure che è possibile adottare per evitare che le bolle d'aria entrino nella punta della pipetta.punta della pipetta.
Tuttavia, se la qualità è scarsapunte per pipettecausano la penetrazione di bolle d'aria nella punta della pipetta, sarai felice di sapere che la nostra vestibilità universalepunte per pipettesono realizzati secondo i più elevati standard qualitativi e sono realizzati in polipropilene puro di prima qualità.
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Data di pubblicazione: 29 dicembre 2022