A micropipeta é probablemente a ferramenta máis empregada no laboratorio. Científicos dunha ampla gama de sectores, como o ámbito académico, hospitalario e forense, así como o desenvolvemento de fármacos e vacinas, empregan esta ferramenta para transferir cantidades moi pequenas e precisas de líquido.
Aínda que pode ser molesto e frustrante detectar burbullas de aire na punta desbotable da pipeta se non se detectan ou se ignoran, pode ter un grande impacto na fiabilidade e reproducibilidade dos resultados.
A boa noticia é que existen algunhas medidas sinxelas que podes tomar para evitar burbullas de aire e mellorar a eficiencia do laboratorio, a satisfacción do operador, así como a precisión e a precisión dos resultados.
A continuación, exploramos as consecuencias de ter unha burbulla de aire na punta da pipeta e o que debes facer a continuación.
A consecuencia das burbullas nopunta de pipeta
Mesmo se empregas as pipetas máis precisas, de gama alta, ben mantidas, revisadas e calibradas, a fiabilidade dos teus resultados pode verse afectada por erros de laboratorio. Cando as burbullas entran nopropinapode ter varios resultados.
● Cando o usuario detecta a burbulla de aire, debe dedicar un tempo a dispensar o líquido aspirado axeitadamente, expulsar a punta e iniciar o proceso de novo.
● As burbullas de aire non detectadas poden provocar unha transferencia de baixo volume, alterando así a concentración das mesturas de reacción, o que leva a experimentos fallidos e a resultados cuestionables ou pouco fiables.
Estes resultados poden ter varias consecuencias (1).
● Menor eficiencia do laboratorio: haberá que repetir as probas e os ensaios, o que supón custos de man de obra e materiais, que poden ser bastante elevados.
● Resultados de probas cuestionables ou incorrectos: se se publican resultados incorrectos, pode haber consecuencias máis graves, como un diagnóstico erróneo e resultados deficientes para os pacientes.
● Retirada de manuscritos de revistas: se os compañeiros non replican os seus resultados debido a burbullas de aire que provocan resultados inexactos, os artigos poden ser retirados.
Boas prácticas para evitar burbullas de aire
Na maioría dos casos, as burbullas de aire nas puntas das pipetas débense a un erro do operador. O problema subxacente adoita ser unha técnica deficiente debido a unha formación insuficiente ou á fatiga.
O pipeteo é unha operación cualificada que require un 110 % de atención, unha formación axeitada e práctica para obter resultados consistentes e precisos.
Aínda que hai varias cousas que podes facer para reducir os erros xerais de pipeteo, a continuación destacamos algunhas das mellores prácticas que se poden empregar para evitar burbullas de aire enpuntas de pipeta.
Mellorar a técnica do usuario
Pipetear lentamente
Se o émbolo se solta demasiado rápido ao aspirar, poden entrar burbullas de aire na punta. Isto pode ser especialmente problemático ao transferir líquidos viscosos. Un efecto similar pode producirse se o émbolo se solta demasiado rápido despois da dispensación.
Para evitar burbullas de aire ao aspirar, procure operar o pistón das pipetas manuais dun xeito suave e regular, aplicando unha forza constante.
Usa a profundidade de inmersión correcta
Se a punta da pipeta non se mergulla o suficientemente profundamente por debaixo do menisco do depósito de líquido, pode provocar a aspiración de aire e, polo tanto, a formación de burbullas.
Non obstante, mergullar a punta demasiado profundamente pode aspirar máis líquido debido ao aumento da presión ou poden producirse pingas na parte exterior da punta, polo que é importante mergullar apunta de pipetaá profundidade correcta.
A profundidade recomendada varía segundo o tamaño, o tipo e a marca da pipeta. Aínda que se deben seguir as recomendacións do fabricante, aquí tes unha guía xeral proporcionada polo Laboratorio Nacional de Física.
Guía para a profundidade de inmersión da punta
Volume da pipeta (µl) e profundidade de inmersión (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-humedecidoPuntas de pipeta
Ao pipetear volumes superiores a 10 µlpuntas de pipetaadoitan humedecerse previamente enchendoas varias veces co líquido que se dispensa e expulsándoo para mellorar a precisión.
Se non se humedecen previamente, poden producirse burbullas de aire, especialmente ao usar líquidos viscosos ou hidrófobos. Para evitar burbullas de aire, asegúrese de humedecer previamente as puntas ao pipetear un volume superior a 10 µl.
Empregar técnicas de pipeteado inverso se é apropiado
Substancias viscosas: Un problema común ao pipetear substancias viscosas como solucións de proteínas ou ácidos nucleicos, glicerol e Tween 20/40/60/80 é a frecuente formación de burbullas cando se usa a técnica de pipeteado directo.
Pipetear lentamente, usando a técnica de pipeteado inverso, reduce o risco de formación de burbullas ao transferir solucións viscosas.
Técnica ELISA
Tamén se recomenda o pipeteado inverso ao pipetear pequenos volumes enPlacas de proba de micropozos de 96 pozospara técnicas ELISA. Cando se introducen burbullas de aire na pipeta ou se dispensan nos pozos ao engadir reactivos, isto pode influír nos valores de densidade óptica e nos resultados. Recoméndase o pipeteado inverso para minimizar ou eliminar este problema.
Usar pipetas ergonómicas
As pipetas de estilo antigo que non foron deseñadas tendo en conta a ergonomía requiren máis esforzo físico, cánsao e a técnica de pipeteado vólvese descoidada e deficiente. Os erros mencionados anteriormente, como a liberación rápida do émbolo, poden producirse con máis frecuencia.
Ao investir nunha solución máis ergonómica, poderás manter unha técnica excelente e evitar a formación de burbullas de aire debido a unha técnica deficiente.
Tómate o tempo para formar o persoal
A formación e a avaliación regulares do persoal nas técnicas de pipeteado poden garantir que se reduza o erro do operador e a formación de burbullas de aire.
Considere solucións máis automatizadas
Como se indicou anteriormente, a maioría das burbullas de aire son causadas polo operador. É posible reducir o erro do operador e a comodidade empregando pipetas electrónicas ou unha plataforma flexible para a manipulación de líquidos como aRobot de manipulación de líquidos Agilent Bravo.
Usar boa calidadePuntas de pipeta
As micropipetas adoitan mercarse con coidado, pero a miúdo non se pensa moito na calidade da punta de pipeta desbotable. Debido á influencia que unha punta ten nos resultados da pipetaxe, a norma ISO 8655 require unha calibración adicional se se usan pipetas e puntas de diferentes fabricantes.
Isto podería deberse a que moitas puntas baratas poden parecer ben ao principio, pero cando as estudas con atención poden ter reflexos, protuberancias, rabuñaduras e burbullas de aire, ou estar dobradas ou conter impurezas.
Mercar puntas de boa calidade feitas de polipropileno de alta calidade pode reducir a aparición de burbullas de aire.
Para concluír
A entrada de burbullas de aire na punta da pipeta afecta á eficiencia do laboratorio, así como á inexactitude e imprecisión dos resultados. Indicamos varias cousas que podes facer para evitar que entren burbullas de aire napunta de pipeta.
Non obstante, se a calidade é deficientepuntas de pipetaestán a causar que entren burbullas de aire na punta da pipeta, alegrarache saber que o noso axuste universalpuntas de pipetaestán fabricados cos máis altos estándares e están feitos con polipropileno puro de primeira calidade.
Empresa biomédica Suzhou Aceproducen puntas de pipeta universais de alta calidade con volumes de 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 e 1250 µL, 96 puntas/gradilha. Durabilidade excepcional: todas as gradillas de puntas ACE cumpren as esixencias de uso con pipetas multicanle. Estériles, con filtro, libres de RNase/DNase e apiroxénicas.
Benvido a consultarnos para obter máis detalles.
Data de publicación: 29 de decembro de 2022