La micropipette est probablement l'outil le plus utilisé en laboratoire. Elle est utilisée par des scientifiques de secteurs très variés, notamment les universités, les hôpitaux et les laboratoires médico-légaux, ainsi que dans le développement de médicaments et de vaccins, pour transférer avec précision de très petites quantités de liquide.
Bien qu'il puisse être ennuyeux et frustrant de repérer des bulles d'air dans la pointe de la pipette jetable si elles ne sont pas repérées ou ignorées, cela peut avoir un impact énorme sur la fiabilité et la reproductibilité des résultats.
La bonne nouvelle est qu’il existe des mesures simples que vous pouvez prendre pour éviter les bulles d’air et améliorer l’efficacité du laboratoire, la satisfaction de l’opérateur ainsi que l’exactitude et la précision des résultats.
Ci-dessous, nous explorons les conséquences de la présence d’une bulle d’air dans la pointe de votre pipette et ce que vous devez faire ensuite.
Les conséquences des bulles dans lepointe de pipette
Même si vous utilisez des pipettes très précises, haut de gamme, bien entretenues, révisées et calibrées, la fiabilité de vos résultats peut être affectée par des erreurs de laboratoire. Lorsque des bulles pénètrent dans leconseilcela peut avoir plusieurs conséquences.
● Lorsque l'utilisateur repère la bulle d'air, il doit prendre le temps de distribuer le liquide aspiré de manière appropriée, d'éjecter la pointe et de recommencer le processus.
● Des bulles d'air non détectées peuvent entraîner un transfert de faible volume, modifiant ainsi la concentration des mélanges réactionnels, conduisant à des expériences ratées et à des résultats douteux ou peu fiables.
Ces résultats peuvent avoir plusieurs conséquences (1).
● Diminution de l’efficacité du laboratoire – Les tests et les analyses devront être répétés, ce qui entraînera des coûts de main-d’œuvre et de matériel qui peuvent être assez substantiels.
● Résultats de tests douteux ou incorrects – Si des résultats incorrects sont publiés, les conséquences peuvent être plus graves, notamment un mauvais diagnostic et de mauvais résultats pour les patients.
● Rétractation des manuscrits des revues – Si les pairs ne parviennent pas à reproduire vos résultats en raison de bulles d’air provoquant des résultats inexacts, les articles peuvent être retirés.
Meilleures pratiques pour éviter les bulles d'air
Dans la plupart des cas, les bulles d'air dans les pointes de pipettes sont dues à une erreur de l'opérateur. Une mauvaise technique due à un manque de formation ou à la fatigue est généralement à l'origine du problème.
Le pipetage est une opération qualifiée qui nécessite une attention de 110 %, une formation adéquate et de la pratique pour obtenir des résultats cohérents et précis.
Bien qu'il existe plusieurs choses que vous pouvez faire pour réduire les erreurs générales de pipetage, nous avons mis en évidence ci-dessous certaines bonnes pratiques qui peuvent être utilisées pour éviter les bulles d'air danspointes de pipette.
Améliorer la technique de l'utilisateur
Pipeter lentement
Si le piston est relâché trop rapidement lors de l'aspiration, des bulles d'air peuvent s'introduire dans l'embout. Cela peut être particulièrement problématique lors du transfert de liquides visqueux. Un effet similaire peut se produire si le piston est relâché trop rapidement après la distribution.
Pour éviter les bulles d'air lors de l'aspiration, veillez à actionner le piston des pipettes manuelles de manière douce et régulière, en appliquant une force constante.
Utilisez la profondeur d'immersion correcte
Si la pointe de la pipette n'est pas immergée suffisamment profondément sous le ménisque du réservoir de liquide, cela peut entraîner l'aspiration d'air et donc la formation de bulles.
Cependant, immerger la pointe trop profondément peut aspirer plus de liquide en raison d'une pression accrue ou des gouttelettes peuvent se former à l'extérieur de la pointe, il est donc important d'immerger la pointe.pointe de pipetteà la bonne profondeur.
La profondeur recommandée varie selon la taille, le type et la marque de la pipette. Bien que les recommandations du fabricant soient à suivre, voici un guide général fourni par le National Physical Laboratory.
Guide sur la profondeur d'immersion de la pointe
Volume de la pipette (µl) et profondeur d'immersion (mm)
- 1 – 100 : 2 – 3
- 100 – 1 000 : 2 – 4
- 1 000 – 5 000 : 2 – 5
Pré-mouillerEmbouts de pipette
Lors du pipetage de volumes supérieurs à 10 µlpointes de pipettesont généralement pré-humidifiés en les remplissant plusieurs fois avec le liquide distribué et en l'expulsant vers les déchets pour améliorer la précision.
L'absence de préhumidification peut entraîner la formation de bulles d'air, notamment lors de l'utilisation de liquides visqueux ou hydrophobes. Pour éviter ces bulles, veillez à préhumidifier les pointes lors du pipetage d'un volume supérieur à 10 µl.
Utiliser des techniques de pipetage inversé si nécessaire
Substances visqueuses : Un problème courant lors du pipetage de substances visqueuses telles que des solutions de protéines ou d'acides nucléiques, du glycérol et du Tween 20/40/60/80 est la formation fréquente de bulles lorsque la technique de pipetage direct est utilisée.
Le pipetage lent, en utilisant la technique de pipetage inversé, réduit le risque de formation de bulles lors du transfert de solutions visqueuses.
Technique ELISA
Le pipetage inversé est également recommandé lors du pipetage de petits volumes dansPlaques de micro-test à 96 puitsPour les techniques ELISA. L'aspiration de bulles d'air dans la pipette ou leur distribution dans les puits lors de l'ajout de réactifs peut influencer les valeurs de densité optique et les résultats. Le pipetage inversé est recommandé pour minimiser, voire éliminer, ce problème.
Utiliser des pipettes ergonomiques
Les pipettes anciennes, non ergonomiques, nécessitent un effort physique plus important, fatiguent et rendent la technique de pipetage plus imprécise. Les erreurs mentionnées ci-dessus, comme le relâchement rapide du piston, peuvent être plus fréquentes.
En investissant dans une solution plus ergonomique, vous pourrez conserver une excellente technique et éviter la formation de bulles d’air dues à une mauvaise technique.
Prenez le temps de former le personnel
Une formation et une évaluation régulières du personnel aux techniques de pipetage peuvent garantir que les erreurs de l’opérateur et la formation de bulles d’air sont réduites.
Envisager des solutions plus automatisées
Comme indiqué précédemment, la plupart des bulles d'air sont causées par l'opérateur. L'utilisation de pipettes électroniques ou d'une plateforme flexible de manipulation des liquides, telle que laRobot de manipulation de liquides Agilent Bravo.
Utilisez une bonne qualitéEmbouts de pipette
Les micropipettes sont généralement achetées avec soin, mais la qualité de la pointe jetable est souvent négligée. En raison de l'influence de la pointe sur les résultats de pipetage, la norme ISO 8655 exige un étalonnage supplémentaire si des pipettes et des pointes de fabricants différents sont utilisées.
Cela peut être dû au fait que de nombreux embouts bon marché peuvent sembler corrects au départ, mais lorsque vous les étudiez attentivement, ils peuvent présenter des éclats, des saillies, des rayures et des bulles d'air, ou être pliés ou contenir des impuretés.
L’achat d’embouts de bonne qualité fabriqués en polypropylène de haute qualité peut réduire l’apparition de bulles d’air.
Pour conclure
La présence de bulles d'air dans l'embout de votre pipette a un impact sur l'efficacité du laboratoire et peut entraîner des résultats inexacts et imprécis. Nous avons répertorié plusieurs mesures à prendre pour éviter la pénétration de bulles d'air dans l'embout.pointe de pipette.
Cependant, si la qualité est mauvaisepointes de pipetteprovoquent la pénétration de bulles d'air dans la pointe de votre pipette, vous serez heureux de savoir que notre ajustement universelpointes de pipettesont fabriqués selon les normes les plus élevées et sont fabriqués avec du polypropylène pur de première qualité.
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Date de publication : 29 décembre 2022