La micropipeta es probablemente la herramienta más utilizada en el laboratorio. La emplean científicos de diversos sectores, como el académico, el hospitalario y los laboratorios forenses, así como en el desarrollo de fármacos y vacunas, para transferir cantidades precisas y muy pequeñas de líquido.
Si bien puede ser molesto y frustrante detectar burbujas de aire en la punta de la pipeta desechable, si no se detectan o se ignoran, pueden tener un gran impacto en la confiabilidad y reproducibilidad de los resultados.
La buena noticia es que existen algunas medidas sencillas que puede tomar para evitar las burbujas de aire y mejorar la eficiencia del laboratorio, la satisfacción del operador y la precisión de los resultados.
A continuación, exploramos las consecuencias de tener una burbuja de aire en la punta de la pipeta y qué debes hacer a continuación.
La consecuencia de las burbujas en elPunta de pipeta
Incluso si utiliza las pipetas más precisas, de gama alta, bien mantenidas, revisadas y calibradas, la fiabilidad de sus resultados puede verse afectada por errores de laboratorio. Cuando entran burbujas en el...consejoPuede tener varios resultados.
● Cuando el usuario detecta la burbuja de aire, debe dedicar tiempo a dispensar adecuadamente el líquido aspirado, expulsar la punta y comenzar el proceso nuevamente.
● Las burbujas de aire no detectadas pueden generar una transferencia de volumen bajo, alterando así la concentración de las mezclas de reacción y dando lugar a experimentos fallidos y resultados cuestionables o poco confiables.
Estos resultados pueden tener varias consecuencias (1).
● Menor eficiencia del laboratorio: será necesario repetir pruebas y ensayos, lo que generará costos de mano de obra y materiales que pueden ser bastante sustanciales.
● Resultados de pruebas cuestionables o incorrectos: si se publican resultados incorrectos, puede haber consecuencias más graves, incluido un diagnóstico erróneo y malos resultados para los pacientes.
● Retirada de manuscritos de revistas: si los pares no logran replicar sus resultados debido a burbujas de aire que causan resultados inexactos, los artículos pueden ser retirados.
Mejores prácticas para prevenir las burbujas de aire
En la mayoría de los casos, las burbujas de aire en las puntas de las pipetas se deben a un error del operador. El problema subyacente suele ser una técnica deficiente, debida a una formación insuficiente o a la fatiga.
El pipeteo es una operación especializada que requiere un 110% de atención, capacitación adecuada y práctica para lograr resultados consistentes y precisos.
Si bien hay varias cosas que puede hacer para reducir los errores generales de pipeteo, a continuación destacamos algunas prácticas recomendadas que se pueden emplear para evitar burbujas de aire enpuntas de pipeta.
Mejorar la técnica del usuario
Pipetear lentamente
Si el émbolo se suelta demasiado rápido al aspirar, pueden formarse burbujas de aire en la punta. Esto puede ser especialmente problemático al transferir líquidos viscosos. Un efecto similar puede ocurrir si el émbolo se suelta demasiado rápido después de dispensar.
Para evitar burbujas de aire al aspirar, tenga cuidado de operar el pistón de las pipetas manuales de manera suave y regular, aplicando una fuerza constante.
Utilice la profundidad de inmersión correcta
Si no se sumerge la punta de la pipeta lo suficientemente profundo por debajo del menisco del depósito de líquido, puede producirse la aspiración de aire y, por lo tanto, la formación de burbujas.
Sin embargo, sumergir la punta demasiado profundamente puede aspirar más líquido debido al aumento de presión o pueden formarse gotas en el exterior de la punta, por lo que es importante sumergir la punta demasiado profundamente.punta de pipetaa la profundidad correcta.
La profundidad recomendada varía según el tamaño, tipo y marca de la pipeta. Si bien deben seguirse las recomendaciones del fabricante, aquí se presenta una guía general proporcionada por el Laboratorio Nacional de Física.
Guía para la profundidad de inmersión de la punta
Volumen de la pipeta (µl) y profundidad de inmersión (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Pre-humedecerPuntas de pipeta
Al pipetear volúmenes superiores a 10 µlpuntas de pipetaGeneralmente se humedecen previamente llenándolos varias veces con el líquido que se va a dispensar y expulsándolo para mejorar la precisión.
Si no se humedecen previamente, pueden formarse burbujas de aire, especialmente al usar líquidos viscosos o hidrófobos. Para evitar las burbujas de aire, asegúrese de humedecer previamente las puntas al pipetear un volumen superior a 10 µl.
Utilice técnicas de pipeteo inverso si corresponde
Sustancias viscosas: un problema común al pipetear sustancias viscosas como soluciones de proteínas o ácidos nucleicos, glicerol y Tween 20/40/60/80 es la formación frecuente de burbujas cuando se utiliza la técnica de pipeteo hacia adelante.
Pipetear lentamente, utilizando la técnica de pipeteo inverso, reduce el riesgo de formación de burbujas al transferir soluciones viscosas.
Técnica ELISA
También se recomienda el pipeteo inverso cuando se pipetean pequeños volúmenes enPlacas de prueba micro de 96 pocillosPara técnicas ELISA. Cuando se introducen burbujas de aire en la pipeta o se dispensan en los pocillos al añadir reactivos, esto puede afectar los valores de densidad óptica y los resultados. Se recomienda el pipeteo inverso para minimizar o eliminar este problema.
Utilice pipetas ergonómicas
Las pipetas antiguas, que no se diseñaron pensando en la ergonomía, requieren mayor esfuerzo físico, causan cansancio y la técnica de pipeteo se vuelve descuidada y deficiente. Los errores mencionados, como la liberación rápida del émbolo, pueden ocurrir con mayor frecuencia.
Al invertir en una solución más ergonómica podrá mantener una técnica excelente y evitar la formación de burbujas de aire debido a una mala técnica.
Tómese el tiempo para capacitar al personal
La capacitación y evaluación periódica del personal en técnicas de pipeteo pueden garantizar que se reduzcan los errores del operador y la formación de burbujas de aire.
Considere soluciones más automatizadas
Como se mencionó anteriormente, la mayoría de las burbujas de aire son causadas por el operador. Es posible reducir los errores del operador y aumentar su comodidad mediante el uso de pipetas electrónicas o una plataforma flexible de manejo de líquidos, como laRobot de manipulación de líquidos Agilent Bravo.
Utilice buena calidadPuntas de pipeta
Las micropipetas suelen adquirirse con cuidado, pero a menudo se presta poca atención a la calidad de la punta desechable. Debido a la influencia de la punta en los resultados del pipeteo, la norma ISO 8655 exige una calibración adicional si se utilizan pipetas y puntas de diferentes fabricantes.
Esto podría deberse a que muchas boquillas baratas pueden parecer buenas inicialmente, pero cuando las estudias con cuidado pueden tener rebabas, protuberancias, rayones y burbujas de aire, o estar dobladas o contener impurezas.
Comprar puntas de buena calidad hechas de polipropileno de alto grado puede reducir la aparición de burbujas de aire.
Para concluir
La presencia de burbujas de aire en la punta de la pipeta afecta la eficiencia del laboratorio, así como la inexactitud e imprecisión de los resultados. Hemos indicado varias medidas que puede tomar para evitar la entrada de burbujas de aire en la pipeta.punta de pipeta.
Sin embargo, si la calidad es malapuntas de pipetaSi están provocando que entren burbujas de aire en la punta de su pipeta, le complacerá saber que nuestro ajuste universalpuntas de pipetaEstán fabricados con los más altos estándares y están hechos con polipropileno puro de primera calidad.
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Hora de publicación: 29 de diciembre de 2022