Τι είναι τα κρυοβολικά;
Κρυογονικά φιαλίδια αποθήκευσηςείναι μικρά, πωματισμένα και κυλινδρικά δοχεία σχεδιασμένα για την αποθήκευση και τη συντήρηση δειγμάτων σε εξαιρετικά χαμηλές θερμοκρασίες. Αν και παραδοσιακά αυτά τα φιαλίδια κατασκευάζονταν από γυαλί, τώρα κατασκευάζονται πολύ πιο συχνά από πολυπροπυλένιο για λόγους ευκολίας και κόστους. Τα κρυοφιαλίδια έχουν σχεδιαστεί προσεκτικά ώστε να αντέχουν σε θερμοκρασίες έως και -196℃ και να φιλοξενούν μια μεγάλη ποικιλία κυτταρικών τύπων. Αυτά ποικίλλουν από διαγνωστικά βλαστοκύτταρα, μικροοργανισμούς, πρωτογενή κύτταρα έως καθιερωμένες κυτταρικές σειρές. Πέρα από αυτό, μπορεί επίσης να υπάρχουν μικροί πολυκύτταροι οργανισμοί που αποθηκεύονται μέσακρυογονικά φιαλίδια αποθήκευσης, καθώς και νουκλεϊκό οξύ και πρωτεΐνες που πρέπει να αποθηκεύονται σε επίπεδα θερμοκρασίας κρυογονικής αποθήκευσης.
Τα κρυογονικά φιαλίδια αποθήκευσης διατίθενται σε διάφορες μορφές και η εύρεση του σωστού τύπου που καλύπτει όλες τις ανάγκες σας θα διασφαλίσει ότι θα διατηρήσετε την ακεραιότητα του δείγματος χωρίς να πληρώσετε υπερβολικά. Διαβάστε το άρθρο μας για να μάθετε περισσότερα σχετικά με τις βασικές παραμέτρους αγοράς κατά την επιλογή του κατάλληλου κρυογονικού φιαλιδίου για την εργαστηριακή σας εφαρμογή.
Ιδιότητες του κρυογονικού φιαλιδίου που πρέπει να ληφθούν υπόψη
Εξωτερικά vs Εσωτερικά Νήματα
Οι άνθρωποι συχνά κάνουν αυτήν την επιλογή με βάση τις προσωπικές τους προτιμήσεις, αλλά στην πραγματικότητα υπάρχουν βασικές λειτουργικές διαφορές που πρέπει να ληφθούν υπόψη μεταξύ των δύο τύπων νημάτων.
Πολλά εργαστήρια συχνά επιλέγουν φιαλίδια με εσωτερικό σπείρωμα για να ελαχιστοποιήσουν τον χώρο αποθήκευσης των σωληναρίων και να επιτρέψουν την καλύτερη τοποθέτηση σε καταψύκτες. Παρόλα αυτά, μπορείτε να σκεφτείτε ότι η επιλογή με εξωτερικό σπείρωμα είναι η καλύτερη επιλογή για εσάς. Θεωρείται ότι ενέχουν χαμηλότερο κίνδυνο μόλυνσης, λόγω του σχεδιασμού τους, ο οποίος καθιστά ακόμη πιο δύσκολη την είσοδο οποιουδήποτε άλλου αντικειμένου εκτός από το δείγμα στο φιαλίδιο.
Τα φιαλίδια με εξωτερικό σπείρωμα προτιμώνται γενικά για γονιδιωματικές εφαρμογές, αλλά και οι δύο επιλογές θεωρούνται κατάλληλες για βιοτραπεζικές υπηρεσίες και άλλες εφαρμογές υψηλής απόδοσης.
Ένα τελευταίο πράγμα που πρέπει να λάβετε υπόψη σχετικά με την κοπή σπειρώματος – εάν το εργαστήριό σας χρησιμοποιεί αυτοματισμό, ίσως χρειαστεί να εξετάσετε ποιο σπείρωμα μπορεί να χρησιμοποιηθεί με τις λαβίδες οργάνων.
Όγκος αποθήκευσης
Τα κρυογονικά φιαλίδια διατίθενται σε ποικιλία μεγεθών για να καλύψουν τις περισσότερες ανάγκες, αλλά ως επί το πλείστον κυμαίνονται μεταξύ 1 mL και 5 mL.
Το κλειδί είναι να βεβαιωθείτε ότι το κρυοφιαλίδιο σας δεν είναι υπεργεμισμένο και ότι υπάρχει επιπλέον διαθέσιμος χώρος, σε περίπτωση που το δείγμα διογκωθεί κατά την κατάψυξη. Στην πράξη, αυτό σημαίνει ότι τα εργαστήρια επιλέγουν φιαλίδια του 1 mL όταν αποθηκεύουν δείγματα 0,5 mL κυττάρων σε αιώρηση σε κρυοπροστατευτικό και φιαλίδια των 2,0 mL για 1,0 mL δείγματος. Μια άλλη συμβουλή για να μην υπεργεμίζετε τα φιαλίδια σας είναι να χρησιμοποιείτε κρυοφιαλίδια με διαβαθμισμένες σημάνσεις, οι οποίες θα διασφαλίσουν ότι θα αποτρέψετε τυχόν διόγκωση που θα μπορούσε να προκαλέσει ρωγμές ή διαρροές.
Βιδωτό καπάκι vs Flip Top
Ο τύπος του καπακιού που θα επιλέξετε εξαρτάται κυρίως από το αν θα χρησιμοποιήσετε άζωτο υγρής φάσης ή όχι. Εάν χρησιμοποιείτε, τότε θα χρειαστείτε κρυοφιαλίδια με βιδωτό καπάκι. Αυτό διασφαλίζει ότι δεν μπορούν να ανοίξουν κατά λάθος λόγω κακού χειρισμού ή αλλαγών θερμοκρασίας. Επιπλέον, τα βιδωτά καπάκια επιτρέπουν την ευκολότερη ανάκτηση από κρυογονικά κουτιά και την πιο αποτελεσματική αποθήκευση.
Ωστόσο, εάν δεν χρησιμοποιείτε άζωτο υγρού σταδίου και χρειάζεστε ένα πιο βολικό καπάκι που ανοίγει πιο εύκολα, τότε ένα αναδιπλούμενο καπάκι είναι η καλύτερη επιλογή. Αυτό θα σας εξοικονομήσει πολύ χρόνο, καθώς ανοίγει πολύ πιο εύκολα, γεγονός που το καθιστά ιδιαίτερα χρήσιμο σε λειτουργίες υψηλότερης απόδοσης και σε εκείνες που χρησιμοποιούν διαδικασίες παρτίδας.
Ασφάλεια σφραγίδων
Ο καλύτερος τρόπος για να διασφαλίσετε μια ασφαλή σφράγιση είναι να βεβαιωθείτε ότι το κρυοβολικό καπάκι και η φιάλη σας είναι κατασκευασμένα από το ίδιο υλικό. Αυτό θα διασφαλίσει ότι συρρικνώνονται και διαστέλλονται ταυτόχρονα. Εάν είναι κατασκευασμένα με διαφορετικά υλικά, τότε θα συρρικνώνονται και θα διαστέλλονται με διαφορετικούς ρυθμούς καθώς αλλάζει η θερμοκρασία, με αποτέλεσμα κενά και πιθανή διαρροή και επακόλουθη μόλυνση.
Ορισμένες εταιρείες προσφέρουν διπλές ροδέλες και φλάντζα για το υψηλότερο επίπεδο ασφάλειας δειγμάτων σε κρυοφιαλίδια με εξωτερικό σπείρωμα. Τα κρυοφιαλίδια με δακτύλιο Ο θεωρούνται τα πιο αξιόπιστα για κρυοφιαλίδια με εσωτερικό σπείρωμα.
Γυαλί vs Πλαστικό
Για λόγους ασφάλειας και ευκολίας, πολλά εργαστήρια χρησιμοποιούν πλέον πλαστικό, συνήθως πολυπροπυλένιο, αντί για θερμοκολλήσιμες γυάλινες αμπούλες. Οι γυάλινες αμπούλες θεωρούνται πλέον ξεπερασμένη επιλογή, καθώς κατά τη διαδικασία σφράγισης ενδέχεται να δημιουργηθούν αόρατες διαρροές από μικροσκοπικές οπές, οι οποίες όταν αποψυχθούν μετά από αποθήκευση σε υγρό άζωτο μπορεί να προκαλέσουν έκρηξή τους. Επίσης, δεν είναι τόσο κατάλληλες για τις σύγχρονες τεχνικές επισήμανσης, κάτι που είναι κλειδί για τη διασφάλιση της ιχνηλασιμότητας των δειγμάτων.
Αυτοστηριζόμενα έναντι στρογγυλεμένων πάτων
Τα κρυογονικά φιαλίδια διατίθενται είτε ως αυτοστηριζόμενα με πυθμένα σε σχήμα αστεριού είτε ως στρογγυλεμένα πυθμένα. Εάν χρειάζεται να τοποθετήσετε τα φιαλίδια σας σε μια επιφάνεια, φροντίστε να επιλέξετε τα αυτοστηριζόμενα.
Ιχνηλασιμότητα και Παρακολούθηση Δείγματος
Αυτός ο τομέας της κρυογονικής αποθήκευσης συχνά παραβλέπεται, αλλά η παρακολούθηση και η ιχνηλασιμότητα των δειγμάτων είναι μια κρίσιμη πτυχή που πρέπει να ληφθεί υπόψη. Τα κρυογονικά δείγματα μπορούν να αποθηκευτούν για πολλά χρόνια, κατά τη διάρκεια της οποίας το προσωπικό μπορεί να αλλάξει και χωρίς σωστά τηρούμενα αρχεία μπορεί να καταστούν μη αναγνωρίσιμα.
Βεβαιωθείτε ότι επιλέγετε φιαλίδια που διευκολύνουν την αναγνώριση των δειγμάτων. Στα σημεία που πρέπει να προσέξετε περιλαμβάνονται τα εξής:
Μεγάλες περιοχές γραφής για την καταγραφή επαρκών λεπτομερειών, ώστε να μπορούν να βρεθούν τα αρχεία εάν ένα φιαλίδιο βρίσκεται σε λανθασμένη θέση – συνήθως επαρκούν η ταυτότητα του κυττάρου, η ημερομηνία κατάψυξης και τα αρχικά του υπεύθυνου ατόμου.
Γραμμωτοί κώδικες για την υποβοήθηση της διαχείρισης δειγμάτων και των συστημάτων παρακολούθησης
Χρωματιστά καπέλα
Μια σημείωση για το μέλλον – αναπτύσσονται τσιπ εξαιρετικά ανθεκτικά στο κρύο, τα οποία, όταν τοποθετηθούν σε μεμονωμένα κρυοφιαλίδια, θα μπορούσαν ενδεχομένως να αποθηκεύσουν ένα λεπτομερές θερμικό ιστορικό καθώς και λεπτομερείς πληροφορίες παρτίδας, αποτελέσματα δοκιμών και άλλη σχετική τεκμηρίωση ποιότητας.
Εκτός από την εξέταση των διαφορετικών προδιαγραφών των διαθέσιμων φιαλιδίων, πρέπει επίσης να ληφθεί υπόψη η τεχνική διαδικασία αποθήκευσης κρυοφιαλιδίων σε υγρό άζωτο.
Θερμοκρασία αποθήκευσης
Υπάρχουν διάφορες μέθοδοι αποθήκευσης για την κρυογονική αποθήκευση δειγμάτων, καθεμία από τις οποίες λειτουργεί σε συγκεκριμένη θερμοκρασία. Οι επιλογές και η θερμοκρασία στην οποία λειτουργούν περιλαμβάνουν:
Υγρή φάση LN2: διατηρήστε θερμοκρασία -196℃
Φάση ατμού LN2: είναι ικανά να λειτουργούν σε συγκεκριμένα εύρη θερμοκρασίας μεταξύ -135°C και -190°C ανάλογα με το μοντέλο.
Καταψύκτες ατμών αζώτου: -20°C έως -150°C
Ο τύπος των κυττάρων που αποθηκεύονται και η προτιμώμενη μέθοδος αποθήκευσης του ερευνητή θα καθορίσουν ποια από τις τρεις διαθέσιμες επιλογές θα χρησιμοποιήσει το εργαστήριό σας.
Ωστόσο, λόγω των εξαιρετικά χαμηλών θερμοκρασιών που χρησιμοποιούνται, δεν είναι όλα τα σωληνάρια ή τα σχέδια κατάλληλα ή ασφαλή. Τα υλικά μπορεί να γίνουν εξαιρετικά εύθραυστα σε εξαιρετικά χαμηλές θερμοκρασίες, ενώ η χρήση φιαλιδίου που δεν είναι κατάλληλο για χρήση στην επιλεγμένη θερμοκρασία θα μπορούσε να προκαλέσει θραύση ή ράγισμα του δοχείου κατά την αποθήκευση ή την απόψυξη.
Ελέγξτε προσεκτικά τις συστάσεις του κατασκευαστή σχετικά με την ορθή χρήση, καθώς ορισμένα κρυογονικά φιαλίδια είναι κατάλληλα για θερμοκρασίες έως και -175°C, ορισμένα -150°C, άλλα μόνο 80°C.
Αξίζει επίσης να σημειωθεί ότι πολλοί κατασκευαστές δηλώνουν ότι τα κρυογονικά φιαλίδια τους δεν είναι κατάλληλα για εμβάπτιση στην υγρή φάση. Εάν αυτά τα φιαλίδια αποθηκευτούν στην υγρή φάση κατά την επιστροφή τους σε θερμοκρασία δωματίου, αυτά τα φιαλίδια ή οι σφραγίδες των καπακιών τους ενδέχεται να θρυμματιστούν λόγω της ταχείας συσσώρευσης πίεσης που προκαλείται από μικρές διαρροές.
Εάν τα κύτταρα πρόκειται να αποθηκευτούν στην υγρή φάση υγρού αζώτου, εξετάστε το ενδεχόμενο αποθήκευσης των κυττάρων σε κατάλληλα κρυογονικά φιαλίδια, θερμικά σφραγισμένα σε κρυοευκίνητους σωλήνες ή αποθήκευσης των κυττάρων σε γυάλινες αμπούλες που είναι ερμητικά κλειστές.
Ώρα δημοσίευσης: 25 Νοεμβρίου 2022