Die Mikropipette ist wahrscheinlich das am häufigsten verwendete Werkzeug im Labor. Sie wird von Wissenschaftlern in den unterschiedlichsten Bereichen eingesetzt, darunter in der Wissenschaft, in Krankenhäusern und forensischen Laboren sowie in der Arzneimittel- und Impfstoffentwicklung, um präzise, sehr kleine Flüssigkeitsmengen zu übertragen.
Obwohl es ärgerlich und frustrierend sein kann, Luftblasen in der Spitze einer Einwegpipette zu entdecken, kann es, wenn man sie nicht entdeckt oder ignoriert, enorme Auswirkungen auf die Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit der Ergebnisse haben.
Die gute Nachricht ist, dass Sie mit einigen einfachen Maßnahmen Luftblasen vermeiden und die Effizienz des Labors, die Zufriedenheit der Bediener sowie die Genauigkeit und Präzision der Ergebnisse verbessern können.
Nachfolgend untersuchen wir die Folgen einer Luftblase in Ihrer Pipettenspitze und was Sie als Nächstes tun sollten.
Die Folgen von Blasen imPipettenspitze
Selbst wenn Sie die genauesten, hochwertigsten, gut gewarteten und kalibrierten Pipetten verwenden, kann die Zuverlässigkeit Ihrer Ergebnisse durch Laborfehler beeinträchtigt werden. Wenn Blasen in dieTippes kann mehrere Ergebnisse haben.
● Wenn der Benutzer die Luftblase entdeckt, muss er sich Zeit nehmen, die angesaugte Flüssigkeit richtig abzugeben, die Spitze abzuwerfen und den Vorgang erneut zu starten.
● Unbemerkte Luftblasen können zu einer geringen Volumenübertragung führen und so die Konzentration der Reaktionsmischungen verändern, was wiederum zu fehlgeschlagenen Experimenten und fragwürdigen oder unzuverlässigen Ergebnissen führen kann.
Diese Ergebnisse können verschiedene Konsequenzen haben (1).
● Geringere Laboreffizienz – Tests und Untersuchungen müssen wiederholt werden, wodurch Arbeits- und Materialkosten entstehen, die ganz erheblich sein können.
● Fragwürdige oder falsche Testergebnisse – Wenn falsche Ergebnisse veröffentlicht werden, kann dies schwerwiegendere Folgen haben, darunter Fehldiagnosen und schlechte Patientenergebnisse.
● Rücknahme von Manuskripten aus Zeitschriften – Wenn es Fachkollegen nicht gelingt, Ihre Ergebnisse zu reproduzieren, weil Luftblasen zu ungenauen Ergebnissen führen, können die Artikel zurückgezogen werden.
Bewährte Methoden zur Vermeidung von Luftblasen
Luftblasen in Pipettenspitzen entstehen in den meisten Fällen durch Bedienfehler. Schlechte Technik aufgrund mangelnder Übung oder Ermüdung ist meist die Ursache.
Das Pipettieren ist eine anspruchsvolle Tätigkeit, die volle Aufmerksamkeit, entsprechendes Training und Übung erfordert, um gleichbleibende und genaue Ergebnisse zu erzielen.
Obwohl es mehrere Möglichkeiten gibt, allgemeine Pipettierfehler zu reduzieren, haben wir im Folgenden einige bewährte Vorgehensweisen hervorgehoben, die zur Vermeidung von Luftblasen inPipettenspitzen.
Verbessern Sie die Benutzertechnik
Langsam pipettieren
Wird der Kolben beim Ansaugen zu schnell losgelassen, können Luftblasen in die Spitze gelangen. Dies kann insbesondere beim Transfer viskoser Flüssigkeiten problematisch sein. Ein ähnlicher Effekt kann auftreten, wenn der Kolben nach dem Dispensieren zu schnell losgelassen wird.
Um Luftblasen beim Ansaugen zu vermeiden, achten Sie bei manuellen Pipetten auf eine gleichmäßige und gleichmäßige Kolbenbewegung mit konstanter Kraft.
Verwenden Sie die richtige Eintauchtiefe
Wird die Pipettenspitze nicht tief genug unter den Meniskus des Flüssigkeitsreservoirs eingetaucht, kann es zum Ansaugen von Luft und damit zur Blasenbildung kommen.
Wenn Sie die Spitze jedoch zu tief eintauchen, kann es aufgrund des erhöhten Drucks zu einer stärkeren Flüssigkeitsaufnahme kommen oder es können sich Tröpfchen an der Außenseite der Spitze bilden. Daher ist es wichtig, die SpitzePipettenspitzeauf die richtige Tiefe.
Die empfohlene Tiefe variiert je nach Pipettengröße, -typ und -marke. Die Herstellerempfehlungen sollten befolgt werden. Hier finden Sie eine allgemeine Richtlinie des National Physical Laboratory.
Leitfaden zur Eintauchtiefe der Spitze
Pipettenvolumen (µl) und Eintauchtiefe (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
VornässenPipettenspitzen
Beim Pipettieren von Volumina größer als 10µlPipettenspitzenwerden normalerweise vorbefeuchtet, indem sie mehrmals mit der abzugebenden Flüssigkeit gefüllt und in den Abfall abgegeben werden, um die Genauigkeit zu verbessern.
Werden die Spitzen nicht vorbefeuchtet, können sich Luftblasen bilden, insbesondere bei viskosen oder hydrophoben Flüssigkeiten. Um Luftblasen zu vermeiden, sollten Sie die Spitzen vorbefeuchten, wenn Sie Volumen über 10 µl pipettieren.
Verwenden Sie gegebenenfalls umgekehrte Pipettiertechniken
Viskose Substanzen: Ein häufiges Problem beim Pipettieren viskoser Substanzen wie Protein- oder Nukleinsäurelösungen, Glycerin und Tween 20/40/60/80 ist die häufige Blasenbildung bei Verwendung der Vorwärtspipettiertechnik.
Durch langsames Pipettieren mit der umgekehrten Pipettiertechnik wird das Risiko einer Blasenbildung beim Übertragen viskoser Lösungen verringert.
ELISA-Technik
Das umgekehrte Pipettieren wird auch beim Pipettieren kleiner Mengen in96-Well-Mikrotestplattenfür ELISA-Techniken. Wenn beim Hinzufügen von Reagenzien Luftblasen in die Pipette gelangen oder in die Vertiefungen abgegeben werden, kann dies die optischen Dichtewerte und die Ergebnisse beeinflussen. Um dieses Problem zu minimieren oder zu vermeiden, wird umgekehrtes Pipettieren empfohlen.
Verwenden Sie ergonomische Pipetten
Ältere Pipetten, die nicht ergonomisch gestaltet sind, erfordern mehr körperliche Anstrengung, ermüden und die Pipettiertechnik wird schlampig und ungenau. Die oben genannten Fehler, wie z. B. ein zu schnelles Loslassen des Kolbens, können häufiger auftreten.
Durch die Investition in eine ergonomischere Lösung können Sie eine hervorragende Technik beibehalten und die Bildung von Luftblasen aufgrund schlechter Technik verhindern.
Nehmen Sie sich Zeit für die Schulung Ihrer Mitarbeiter
Durch regelmäßige Schulung und Beurteilung der Pipettiertechniken des Personals kann sichergestellt werden, dass Bedienerfehler und die Bildung von Luftblasen reduziert werden.
Erwägen Sie automatisiertere Lösungen
Wie bereits erwähnt, werden die meisten Luftblasen vom Bediener verursacht. Durch den Einsatz elektronischer Pipetten oder einer flexiblen Plattform zur Handhabung von Flüssigkeiten wie derAgilent Bravo Liquid-Handling-Roboter.
Verwenden Sie gute QualitätPipettenspitzen
Mikropipetten werden in der Regel mit Bedacht gekauft, doch die Qualität der Einweg-Pipettenspitze wird oft wenig beachtet. Aufgrund des Einflusses der Spitze auf die Pipettierergebnisse verlangt die Norm ISO 8655 eine zusätzliche Kalibrierung, wenn Pipetten und Spitzen verschiedener Hersteller verwendet werden.
Dies könnte daran liegen, dass viele billige Spitzen zunächst gut aussehen, bei genauer Betrachtung jedoch Grate, Vorsprünge, Kratzer und Luftblasen aufweisen oder verbogen sein oder Verunreinigungen enthalten können.
Der Kauf hochwertiger Spitzen aus hochwertigem Polypropylen kann die Entstehung von Luftblasen verringern.
Fazit
Luftblasen in der Pipettenspitze beeinträchtigen die Effizienz des Labors und können zu ungenauen Ergebnissen führen. Wir haben einige Tipps zusammengestellt, wie Sie das Eindringen von Luftblasen in die Pipettenspitze verhindern können.Pipettenspitze.
Wenn jedoch schlechte QualitätPipettenspitzenverursachen Luftblasen in Ihrer Pipettenspitze, werden Sie erfreut sein zu hören, dass unsere universelle PassformPipettenspitzenwerden nach den höchsten Standards hergestellt und bestehen aus reinem Polypropylen der Premiumklasse.
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Veröffentlichungszeit: 29.12.2022