Hvad er kryoflasker?
Kryogene opbevaringsflaskerer små, lukkede og cylindriske beholdere designet til opbevaring og konservering af prøver ved ultralave temperaturer. Selvom disse hætteglas traditionelt har været lavet af glas, er de nu meget mere almindeligt lavet af polypropylen af bekvemmeligheds- og omkostningsmæssige årsager. Kryohætteglas er omhyggeligt designet til at modstå temperaturer så lave som -196 ℃ og til at rumme en bred vifte af celletyper. Disse varierer fra diagnostiske stamceller, mikroorganismer, primære celler til etablerede cellelinjer. Derudover kan der også være små flercellede organismer, der opbevares ikryogene opbevaringsflasker, såvel som nukleinsyre og proteiner, som skal opbevares ved kryogene opbevaringstemperaturer.
Kryogene opbevaringsflasker findes i forskellige former, og ved at finde den rigtige type, der opfylder alle dine behov, sikrer du, at du bevarer prøvens integritet uden at betale for meget. Læs vores artikel for at lære mere om de vigtigste købsovervejelser, når du vælger det rigtige kryohætteglas til din laboratorieapplikation.
Egenskaber ved kryogen hætteglas, der skal overvejes
Eksterne vs. interne tråde
Folk træffer ofte dette valg baseret på personlig præference, men der er faktisk vigtige funktionelle forskelle at overveje mellem de to typer tråd.
Mange laboratorier vælger ofte hætteglas med indvendigt gevind for at minimere opbevaringspladsen til rørene og dermed bedre passe i frysebokse. På trods af dette kan du overveje, at den udvendigt gevindskårne løsning er den bedre løsning for dig. De anses for at have en lavere kontamineringsrisiko på grund af designet, der gør det endnu sværere for andet end prøven at komme ind i hætteglasset.
Udvendigt gevindskårne hætteglas foretrækkes generelt til genomiske anvendelser, men begge muligheder anses for egnede til biobanking og andre applikationer med høj kapacitet.
En sidste ting at overveje ved gevindskæring – hvis dit laboratorium bruger automatisering, skal du muligvis overveje, hvilken gevind der kan bruges med instrumentgriberne.
Lagringsvolumen
Kryogene hætteglas fås i en række forskellige størrelser for at dække de fleste behov, men oftest varierer de fra 1 ml til 5 ml.
Nøglen er at sikre, at dit kryohætteglas ikke er overfyldt, og at der er ekstra plads til rådighed, i tilfælde af at prøven svulmer op under frysning. I praksis betyder det, at laboratorier vælger 1 ml hætteglas, når de opbevarer prøver med 0,5 ml celler suspenderet i kryobeskyttelsesmiddel, og 2,0 ml hætteglas til 1,0 ml prøve. Et andet tip til ikke at overfylde dine hætteglas er at bruge kryohætteglas med graduerede markeringer, hvilket vil sikre, at du forhindrer hævelse, som kan forårsage revner eller lækage.
Skruelåg vs. Flip Top
Den type låg, du vælger, afhænger primært af, om du vil bruge flydende nitrogen eller ej. Hvis du gør det, skal du bruge kryohætteglas med skruelåg. Dette sikrer, at de ikke kan åbne sig ved et uheld på grund af forkert håndtering eller temperaturændringer. Derudover gør skruelåg det nemmere at tage dem ud af kryogene kasser og giver mere effektiv opbevaring.
Men hvis du ikke bruger flydende nitrogen og har brug for en mere praktisk låg, der er nemmere at åbne, så er et flip-låg den bedre løsning. Dette vil spare dig en masse tid, da det er meget nemmere at åbne, hvilket er særligt nyttigt i operationer med høj kapacitet og dem, der bruger batchprocesser.
Seglsikkerhed
Den bedste måde at sikre en sikker forsegling på er at sørge for, at både din kryovialkapsel og -flaske er lavet af samme materiale. Dette sikrer, at de krymper og udvider sig samtidig. Hvis de er lavet af forskellige materialer, vil de krympe og udvide sig med forskellige hastigheder, når temperaturen ændrer sig, hvilket fører til huller og potentiel lækage og deraf følgende kontaminering.
Nogle virksomheder tilbyder dobbelte skiver og flange for det højeste niveau af prøvesikkerhed på kryohætteglas med udvendigt gevind. O-ring-kryohætteglas betragtes som de mest pålidelige til kryohætteglas med indvendigt gevind.
Glas vs. plastik
Af sikkerheds- og bekvemmelighedsmæssige årsager bruger mange laboratorier nu plastik, normalt polypropylen, i stedet for varmeforseglelige glasampuller. Glasampuller betragtes nu som et forældet valg, da der under forseglingsprocessen kan opstå usynlige lækager af nålehuller, som kan få dem til at eksplodere, når de optøs efter opbevaring i flydende nitrogen. De er heller ikke lige så velegnede til moderne mærkningsteknikker, hvilket er nøglen til at sikre sporbarhed af prøver.
Selvstående vs. afrundede bunde
Kryogene hætteglas fås både som selvstående med stjerneformet bund eller som afrundet bund. Hvis du har brug for at placere dine hætteglas på en overflade, skal du sørge for at vælge den selvstående.
Sporbarhed og prøveopfølgning
Dette område inden for kryogen opbevaring overses ofte, men sporbarhed af prøver er et afgørende aspekt at overveje. Kryogene prøver kan opbevares i mange år, og i løbet af denne periode kan personalet skifte, og uden korrekt vedligeholdte optegnelser kan de blive uidentificerbare.
Sørg for at vælge hætteglas, der gør prøveidentifikation så nem som muligt. Ting, du bør være opmærksom på, inkluderer:
Store skriveområder til at registrere tilstrækkelige detaljer, så optegnelser kan findes, hvis et hætteglas er placeret et forkert sted – normalt er celleidentitet, nedfrysningsdato og initialer på den ansvarlige person tilstrækkeligt.
Stregkoder til hjælp ved prøvehåndtering og sporingssystemer
Farvede kasketter
En bemærkning til fremtiden – der udvikles ultrakuldebestandige chips, som, når de monteres i individuelle kryohætteglas, potentielt kan lagre en detaljeret termisk historik samt detaljerede batchoplysninger, testresultater og anden relevant kvalitetsdokumentation.
Ud over at overveje de forskellige specifikationer for tilgængelige hætteglas, skal der også gøres en del overvejelser om den tekniske proces til opbevaring af kryohætteglas i flydende nitrogen.
Opbevaringstemperatur
Der findes adskillige opbevaringsmetoder til kryogen opbevaring af prøver, som hver især opererer ved en specifik temperatur. Mulighederne og den temperatur, de opererer ved, omfatter:
Flydende fase LN2: opretholdelse af en temperatur på -196 ℃
Dampfase LN2: kan fungere ved specifikke temperaturområder mellem -135 °C og -190 °C afhængigt af modellen.
Nitrogendampfrysere: -20°C til -150°C
Den type celler, der opbevares, og en forskers foretrukne opbevaringsmetode vil afgøre, hvilken af de tre tilgængelige muligheder dit laboratorium bruger.
På grund af de ekstremt lave temperaturer, der anvendes, vil ikke alle rør eller designs dog være egnede eller sikre. Materialer kan blive ekstremt sprøde ved ekstremt lave temperaturer, og brug af et hætteglas, der ikke er egnet til brug ved den valgte temperatur, kan få beholderen til at splintre eller revne under opbevaring eller optøning.
Tjek producentens anbefalinger for korrekt brug omhyggeligt, da nogle kryogene hætteglas er egnede til temperaturer helt ned til -175 °C, nogle -150 °C, andre kun 80 °C.
Det er også værd at bemærke, at mange producenter angiver, at deres kryogene hætteglas ikke er egnede til nedsænkning i væskefasen. Hvis disse hætteglas opbevares i væskefasen, når de vender tilbage til stuetemperatur, kan disse hætteglas eller deres forseglinger splintres på grund af en hurtig trykopbygning forårsaget af små lækager.
Hvis cellerne skal opbevares i den flydende fase af flydende nitrogen, bør man overveje at opbevare cellerne i egnede kryogene hætteglas, der er varmeforseglet i cryoflex-slanger, eller at opbevare cellerne i glasampuller, der er hermetisk lukkede.
Opslagstidspunkt: 25. november 2022