Laboratorní profesionálové mohou trávit každý den hodiny držením mikropipety a zlepšení efektivity pipetování a zajištění spolehlivých výsledků je často výzvou. Výběr správné mikropipety pro jakoukoli danou aplikaci je klíčem k úspěchu laboratorní práce; nejen zajišťuje provedení jakéhokoli experimentu, ale také zvyšuje efektivitu. Pochopení potřeb pipetovacího pracovního postupu umožňuje uživatelům vybrat přesné a opakovatelné pipety, ale existuje mnoho dalších faktorů, které je třeba zvážit pro zlepšení výsledků pipetování a zaručení úspěchu experimentů.
Kapaliny obecně spadají do tří hlavních kategorií: vodné, viskózní a těkavé. Většina kapalin je na bázi vody, takže pipety s výtlačným vzduchem jsou pro mnoho lidí první volbou. Zatímco většina kapalin s tímto typem pipety funguje dobře, při práci s velmi viskózními nebo těkavými kapalinami by se měly volit volumetrické pipety. Rozdíly mezi těmito typy pipet jsou znázorněny na obrázku 1. Pro dosažení vynikajících výsledků je také důležité používat správnou pipetovací techniku – bez ohledu na typ kapaliny.
Dva nejdůležitější parametry ovlivňující výsledky pipetování jsou přesnost a preciznost (obrázek 2). Pro dosažení maximální přesnosti, preciznosti a spolehlivosti pipetování je třeba mít na paměti několik kritérií. Obecně by si uživatel měl vždy vybrat nejmenší pipetu, která zvládne požadovaný přenesený objem. To je důležité, protože přesnost se snižuje s tím, jak se nastavený objem blíží minimálnímu objemu pipety. Například pokud dávkujete 50 µl pipetou o objemu 5 000 µl, výsledky mohou být špatné. Lepších výsledků lze dosáhnout s pipetami o objemu 300 µl, zatímco pipety o objemu 50 µl poskytují nejlepší výsledky. Navíc se objem nastavený na tradičních manuálních pipetách může během pipetování změnit v důsledku náhodného otočení pístu. Proto někteří výrobci pipet vyvinuli konstrukce s uzamykáním nastavení objemu, aby se zabránilo neúmyslným změnám během pipetování a dále se zajistila přesnost. Kalibrace je dalším důležitým aspektem, který pomáhá zaručit spolehlivé výsledky tím, že prokazuje přesnost a preciznost pipety. Tento proces by měl být pro uživatele snadný; Například některé elektronické pipety dokáží nastavit připomenutí kalibrace nebo ukládat historii kalibrace. Nejde jen o pipety, které je třeba zvážit. Pokud se špička pipety uvolní, propustí nebo spadne, může to způsobit řadu problémů. Tento běžný problém v laboratoři je často způsoben používáním univerzálních špiček pipet, které často vyžadují „poklepávání“. Tento proces natahuje okraj špičky pipety a může způsobit prosakování nebo ztrátu špičky, nebo dokonce úplné spadnutí špičky z pipety. Výběr vysoce kvalitní mikropipety navržené se specifickými špičkami zajišťuje bezpečnější spojení, což poskytuje vyšší úroveň spolehlivosti a lepší výsledky. Navíc něco tak jednoduchého, jako je barevné kódování pipet a špiček, může také pomoci uživatelům zajistit, aby pro jejich pipety byly vybrány správné špičky.
V prostředí s vysokou propustností je důležité být co nejefektivnější a zároveň zachovat spolehlivost a konzistenci procesu pipetování. Existuje mnoho způsobů, jak zlepšit efektivitu pipetování, včetně použití vícekanálových a/nebo elektronických pipet. Tyto všestranné přístroje často nabízejí několik různých režimů pipetování – například reverzní pipetování, variabilní dávkování, programované sériové ředění a další – pro zjednodušení procesu. Například postupy, jako je opakované dávkování, jsou ideální pro dávkování více alikvotních podílů stejného objemu bez nutnosti doplňování špičky. Používání jednokanálových pipet k přenosu vzorků mezi různými formáty laboratorního vybavení se může rychle stát velmi únavným a náchylným k chybám. Vícekanálové pipety umožňují přenos více vzorků najednou mrknutím oka. To nejen zvyšuje efektivitu, ale také pomáhá předcházet chybám při pipetování a poranění z opakovaného namáhání (RSI). Některé pipety mají dokonce možnost měnit rozteč špiček během pipetování, což umožňuje paralelní přenos více vzorků mezi různými velikostmi a formáty laboratorního vybavení, což šetří hodiny času (obrázek 3).
Laboratorní pracovníci obvykle tráví pipetováním hodiny denně. To může způsobit nepohodlí a v závažnějších případech dokonce i poranění rukou nebo paží. Nejlepší radou, jak se těmto potenciálním rizikům vyhnout, je co nejvíce zkrátit dobu držení pipety. Kromě toho by si uživatelé měli pro lepší stabilitu zvolit lehkou a dobře vyváženou mikropipetu s hmotností uprostřed. Pipeta by měla pohodlně padnout do rukou leváků i praváků, mít dobrý úchop a nastavovat objem co nejpohodlněji a nejrychleji, aby se zabránilo zbytečnému pohybu. Důležité jsou také špičky, protože vkládání a vyhazování špičky často vyžaduje větší sílu než pipetování a existuje potenciální riziko zranění, zejména při vysokých průtocích. Špičky pipet by měly zacvaknout na místo s minimální silou, poskytovat bezpečné spojení a měly by být stejně snadno vysouvatelné.
Při výběru správné mikropipety pro vaši aplikaci je důležité zvážit všechny aspekty vašeho pracovního postupu. Zvážením pipety, jejích vlastností, typu a objemu pipetované kapaliny a použitých špiček mohou vědci zaručit přesné, precizní a spolehlivé výsledky při zachování produktivity a minimalizaci rizika zranění.
V tomto vydání je výtěžnost základních analytů hodnocena pomocí HPLC-MS za použití mikrodestiček SPE se silnou kationtovou výměnou ve smíšeném režimu. Výhody SEC-MALLS v biofarmaceutických aplikacích…
International Labmate Limited Oak Court Business Centre Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH Spojené království
Čas zveřejnění: 10. června 2022