Mikropipeta je vjerovatno najčešće korišten alat u laboratoriji. Koriste je naučnici u širokom spektru sektora, uključujući akademske ustanove, bolnice i forenzičke laboratorije, kao i razvoj lijekova i vakcina, za prenos preciznih, vrlo malih količina tečnosti.
Iako može biti dosadno i frustrirajuće uočiti mjehuriće zraka na vrhu pipete za jednokratnu upotrebu, ako se ne uoče ili ignoriraju, to može imati ogroman utjecaj na pouzdanost i ponovljivost rezultata.
Dobra vijest je da postoje neke jednostavne mjere koje možete poduzeti kako biste spriječili stvaranje mjehurića zraka i poboljšali efikasnost laboratorije, zadovoljstvo operatera, kao i tačnost i preciznost rezultata.
U nastavku istražujemo posljedice pojave mjehurića zraka u vrhu pipete i šta biste trebali učiniti sljedeće.
Posljedice mjehurića uVrh pipete
Čak i ako koristite najpreciznije, najkvalitetnije, dobro održavane, servisirane i kalibrirane pipete, pouzdanost vaših rezultata može biti pogođena laboratorijskim greškama. Kada mjehurići uđu u...napojnicato može imati nekoliko ishoda.
● Kada korisnik uoči mjehurić zraka, mora provesti neko vrijeme pravilno istiskujući aspiriranu tekućinu, izbaciti vrh i ponovo započeti proces.
● Neotkriveni mjehurići zraka mogu rezultirati malim prijenosom volumena, mijenjajući tako koncentraciju reakcijskih smjesa, što dovodi do neuspjelih eksperimenata i upitnih ili nepouzdanih rezultata.
Ovi ishodi mogu imati nekoliko posljedica (1).
● Smanjena efikasnost laboratorije – Testovi i analize će se morati ponavljati, što će uzrokovati troškove rada i materijala, koji mogu biti prilično značajni.
● Sumnjivi ili netačni rezultati testova – Ako se objave netačni rezultati, mogu postojati ozbiljnije posljedice, uključujući pogrešnu dijagnozu i loše ishode liječenja pacijenata.
● Povlačenje rukopisa iz časopisa – Ako kolege ne uspiju replicirati vaše rezultate zbog mjehurića zraka koji uzrokuju netačne rezultate, radovi mogu biti povučeni.
Najbolje prakse za sprječavanje stvaranja mjehurića zraka
U većini slučajeva, mjehurići zraka u vrhovima pipeta uzrokovani su greškom operatera. Loša tehnika zbog nedovoljne obuke ili umora obično je osnovni problem.
Pipetiranje je vješt postupak koji zahtijeva 110% pažnje, odgovarajuću obuku i praksu kako bi se postigli konzistentni i tačni rezultati.
Iako postoji nekoliko stvari koje možete učiniti kako biste smanjili opće greške pri pipetiranju, u nastavku smo istakli neke najbolje prakse koje se mogu primijeniti kako biste izbjegli mjehuriće zraka uvrhovi pipeta.
Poboljšajte korisničku tehniku
Polako pipetirajte
Ako se klip prebrzo otpusti prilikom aspiracije, mjehurići zraka mogu ući u vrh. To može biti posebno problematično prilikom prenosa viskoznih tekućina. Sličan efekat se može javiti ako se klip prebrzo otpusti nakon doziranja.
Da biste izbjegli stvaranje mjehurića zraka prilikom aspiracije, pazite da klip ručnih pipeta pomičete glatko i ravnomjerno, primjenjujući konzistentnu silu.
Koristite ispravnu dubinu uranjanja
Ako se vrh pipete ne uroni dovoljno duboko ispod meniskusa rezervoara za tečnost, to može dovesti do aspiracije vazduha i time stvaranja mjehurića.
Međutim, previše duboko uranjanje vrha može usisati više tekućine zbog povećanog pritiska ili se kapljice mogu pojaviti na vanjskoj strani vrha, stoga je važno uronitivrh pipetedo tačne dubine.
Preporučena dubina varira ovisno o veličini, vrsti i marki pipete. Iako se treba pridržavati preporuka proizvođača, evo općeg vodiča koji je dao Nacionalni fizički laboratorij.
Vodič za dubinu uranjanja vrha
Zapremina pipete (µl) i dubina uranjanja (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1.000: 2 – 4
- 1.000 – 5.000: 2 – 5
Prethodno mokroVrhovi pipeta
Prilikom pipetiranja volumena većih od 10 µlvrhovi pipetaobično se prethodno navlaže tako što se nekoliko puta napune tekućinom koja se ispušta i istisnu u otpad radi poboljšanja preciznosti.
Ako ih prethodno ne navlažite, može doći do stvaranja mjehurića zraka, posebno pri korištenju viskoznih ili hidrofobnih tekućina. Da biste izbjegli stvaranje mjehurića zraka, obavezno prethodno navlažite vrhove kada pipetirate volumen veći od 10 µl.
Koristite tehnike obrnutog pipetiranja ako je prikladno
Viskozne supstance: Uobičajen problem pri pipetiranju viskoznih supstanci kao što su rastvori proteina ili nukleinskih kiselina, glicerol i Tween 20/40/60/80 je često stvaranje mjehurića kada se koristi tehnika pipetiranja naprijed.
Sporo pipetiranje, korištenjem tehnike obrnutog pipetiranja, smanjuje rizik od stvaranja mjehurića prilikom prenosa viskoznih otopina.
ELISA tehnika
Obrnuto pipetiranje se također preporučuje prilikom pipetiranja malih volumena uMikrotitarske ploče sa 96 jažicaza ELISA tehnike. Kada se mjehurići zraka uvlače u pipetu ili ispuštaju u jažice prilikom dodavanja reagensa, to može utjecati na vrijednosti optičke gustoće i rezultate. Preporučuje se obrnuto pipetiranje kako bi se ovaj problem smanjio ili eliminirao.
Koristite ergonomske pipete
Stare pipete koje nisu dizajnirane imajući na umu ergonomiju zahtijevaju više fizičkog napora, umarate se i vaša tehnika pipetiranja postaje aljkava i loša. Gore navedene greške, poput brzog otpuštanja klipa, mogu se češće javljati.
Ulaganjem u ergonomskije rješenje moći ćete održavati odličnu tehniku i spriječiti stvaranje mjehurića zraka zbog loše tehnike.
Odvojite vrijeme za obuku osoblja
Redovna obuka i procjena osoblja u tehnikama pipetiranja može osigurati smanjenje grešaka operatera i stvaranja mjehurića zraka.
Razmotrite više automatiziranih rješenja
Kao što je gore navedeno, većinu mjehurića zraka uzrokuje operater. Moguće je smanjiti greške operatera i povećati udobnost korištenjem elektronskih pipeta ili fleksibilne platforme za rukovanje tekućinama, kao što jeAgilent Bravo robot za rukovanje tekućinama.
Koristite dobar kvalitetVrhovi pipeta
Mikropipete se obično kupuju s pažnjom, ali se često malo razmišlja o kvalitetu vrha pipete za jednokratnu upotrebu. Zbog utjecaja koji vrh ima na rezultate pipetiranja, standard ISO 8655 zahtijeva dodatnu kalibraciju ako se koriste pipete i vrhovi različitih proizvođača.
To bi moglo biti zato što mnogi jeftini vrhovi mogu u početku izgledati dobro, ali kada ih pažljivo proučite, mogu imati izbočine, ogrebotine i mjehuriće zraka, ili mogu biti savijeni ili sadržavati nečistoće.
Kupovina kvalitetnih nastavaka napravljenih od visokokvalitetnog polipropilena može smanjiti pojavu mjehurića zraka.
Zaključak
Prisustvo mjehurića zraka u vrhu pipete utiče na efikasnost laboratorije, kao i na netačnost i nepreciznost rezultata. Naveli smo nekoliko stvari koje možete učiniti kako biste spriječili ulazak mjehurića zraka u...vrh pipete.
Međutim, ako je loše kvalitetevrhovi pipetauzrokuju ulazak mjehurića zraka u vrh vaše pipete, bit će vam drago znati da naša univerzalna veličina odgovaravrhovi pipetaIzrađeni su po najvišim standardima i izrađeni su od čistog polipropilena vrhunskog kvaliteta.
Biomedicinska kompanija Suzhou AceProizvode visokokvalitetne univerzalne vrhove za pipete zapremina 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 i 1250 µL, 96 vrhova/stalak. Izuzetna izdržljivost – svi ACE nosači vrhova ispunjavaju zahtjeve upotrebe s višekanalnim pipetorima. Sterilni, filter, bez RNaze/DNaze i apirogeni.
Dobrodošli da nas pitate za više detalja.
Vrijeme objave: 29. decembar 2022.