Doğru mikropipeti mi kullanıyorsunuz? - 3 Şubat 2021 – Lukas Keller – Yaşam Bilimleri Haber Makalesi

Laboratuvar profesyonelleri her gün bir mikropipet tutarak saatler harcayabilir ve pipetleme verimliliğini artırmak ve güvenilir sonuçlar sağlamak genellikle bir zorluktur. Herhangi bir uygulama için doğru mikropipeti seçmek, laboratuvar çalışmalarının başarısı için anahtardır; yalnızca herhangi bir deneyin performansını sağlamakla kalmaz, aynı zamanda verimliliği de artırır. Pipetleme iş akışının ihtiyaçlarını anlamak, kullanıcıların doğru ve tekrarlanabilir pipetler seçmesini sağlar, ancak pipetleme sonuçlarını iyileştirmek ve deneylerin başarısını garantilemek için dikkate alınması gereken birçok başka faktör vardır.
Genel olarak sıvılar üç ana kategoriye ayrılır: sulu, viskoz ve uçucu. Çoğu sıvı su bazlıdır ve bu da hava deplasmanlı pipetleri birçok kişi için ilk tercih haline getirir. Çoğu sıvı bu pipet tipiyle iyi çalışsa da, çok viskoz veya uçucu sıvılarla çalışırken hacimsel pipetler seçilmelidir. Bu pipet tipleri arasındaki farklar Şekil 1'de gösterilmiştir. Mükemmel sonuçlar için sıvı türünden bağımsız olarak doğru pipetleme tekniğini kullanmak da önemlidir.
Pipetleme sonuçlarını etkileyen en kritik iki parametre doğruluk ve hassasiyettir (Şekil 2). Maksimum pipetleme doğruluğu, hassasiyeti ve güvenilirliği elde etmek için birkaç kriter akılda tutulmalıdır. Genel bir kural olarak, kullanıcı her zaman istenen transfer hacmini kaldırabilecek en küçük pipeti seçmelidir. Bu önemlidir, çünkü ayarlanan hacim pipetin minimum hacmine yaklaştıkça doğruluk azalır. Örneğin, 5.000 µl pipetle 50 µl dağıtırsanız sonuçlar zayıf olabilir. 300 µl pipetlerle daha iyi sonuçlar elde edilebilirken, 50 µl pipetler en iyi sonuçları sağlar. Ek olarak, geleneksel manuel pipetlerde ayarlanan hacim, pistonun yanlışlıkla dönmesi nedeniyle pipetleme sırasında değişebilir. Bu nedenle bazı pipet üreticileri, doğruluğu daha da sağlamak için pipetleme sırasında yanlışlıkla değişiklikleri önlemek amacıyla kilitleme hacim ayarlama tasarımları geliştirmiştir. Kalibrasyon, pipetin doğruluğunu ve hassasiyetini göstererek güvenilir sonuçları garantilemeye yardımcı olan bir diğer önemli husustur. Bu süreç kullanıcı için kolay olmalıdır; örneğin, bazı elektronik pipetler kalibrasyon hatırlatıcıları ayarlayabilir veya kalibrasyon geçmişini kaydedebilir. Sadece pipetleri dikkate almamalıyız. Bir pipet ucu gevşerse, sızdırırsa veya düşerse çeşitli sorunlara neden olabilir. Laboratuvardaki bu yaygın sorun genellikle "vurma" gerektiren genel amaçlı pipet uçlarının kullanılmasından kaynaklanır. Bu işlem pipet ucunun kenarını gerer ve ucun sızdırmasına veya yanlış yere yerleştirilmesine veya hatta ucun pipetten tamamen düşmesine neden olabilir. Belirli uçlarla tasarlanmış yüksek kaliteli bir mikropipet seçmek daha güvenli bir bağlantı sağlayarak daha yüksek düzeyde güvenilirlik ve daha iyi sonuçlar sağlar. Ek olarak, pipetleri ve uçları renk kodlamak kadar basit bir şey de kullanıcıların pipetleri için doğru uçların seçildiğinden emin olmalarına yardımcı olabilir.
Yüksek verimli bir ortamda, pipetleme işleminin güvenilirliğini ve tutarlılığını korurken mümkün olduğunca verimli olmak önemlidir. Pipetleme verimliliğini artırmanın çok sayıda yolu vardır; bunlar arasında çok kanallı ve/veya elektronik pipetler bulunur. Bu çok yönlü cihazlar genellikle işlemi basitleştirmek için ters pipetleme, değişken dağıtım, programlanmış seri seyreltmeler ve daha fazlası gibi birkaç farklı pipetleme modu sunar. Örneğin, tekrarlanan dağıtım gibi prosedürler, ucu yeniden doldurmadan aynı hacimdeki birden fazla alikotu dağıtmak için idealdir. Numuneleri farklı formatlardaki laboratuvar malzemeleri arasında aktarmak için tek kanallı pipetler kullanmak hızla çok sıkıcı ve hataya açık hale gelebilir. Çok kanallı pipetler, birden fazla numunenin göz açıp kapayıncaya kadar aynı anda aktarılmasını sağlar. Bu yalnızca verimliliği artırmakla kalmaz, aynı zamanda pipetleme hatalarını ve tekrarlayan zorlanma yaralanmasını (RSI) önlemeye de yardımcı olur. Bazı pipetler pipetleme sırasında uç aralığını değiştirme yeteneğine bile sahiptir; bu sayede farklı laboratuvar malzemesi boyutları ve formatları arasında birden fazla numunenin paralel olarak aktarılmasına olanak tanır ve saatlerce zamandan tasarruf sağlar (Şekil 3).
Laboratuvar profesyonelleri genellikle günde saatlerce pipetleme yaparlar. Bu durum rahatsızlığa ve daha ciddi durumlarda el veya kol yaralanmalarına bile neden olabilir. Bu olası risklerden kaçınmak için verilebilecek en iyi tavsiye, pipeti tutma sürenizi mümkün olan en kısa süreye indirmektir. Buna ek olarak, kullanıcılar daha iyi stabilite için ortada kütle bulunan hafif ve dengeli bir mikropipet seçmelidir. Pipet, sol ve sağ elini kullanan kullanıcıların ellerine rahatça oturmalı, iyi bir kavrama tasarımına sahip olmalı ve gereksiz hareketleri önlemek için sesi olabildiğince rahat ve hızlı bir şekilde ayarlamalıdır. Ayrıca, uçlar önemlidir, çünkü uç yükleme ve çıkarma işlemi genellikle pipetleme işleminden daha fazla güç gerektirir ve özellikle yüksek verimli ortamlarda potansiyel yaralanma riski vardır. Pipet uçları minimum güçle yerine oturmalı, güvenli bir bağlantı sağlamalı ve çıkarılması da aynı derecede kolay olmalıdır.
Uygulamanız için doğru mikropipeti seçerken, iş akışınızın her yönüne bakmanız önemlidir. Bilim insanları, pipeti, özelliklerini, pipetlenen sıvının türünü ve hacmini ve kullanılan uçları göz önünde bulundurarak, üretkenliği korurken ve yaralanma riskini en aza indirirken doğru, kesin ve güvenilir sonuçları garanti edebilirler.
Bu baskıda, temel analitlerin geri kazanımı, karma modlu güçlü katyon değişim SPE mikro plakaları kullanılarak HPLC-MS ile değerlendirilmektedir. SEC-MALLS'ın biyofarmasötik uygulamalardaki faydaları…
International Labmate Limited Oak Court İş Merkezi Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH Birleşik Krallık


Gönderi zamanı: 10-Haz-2022