Vad är kryoflaskor?
Kryogena förvaringsflaskorär små, kapsylerade och cylindriska behållare avsedda för förvaring och konservering av prover vid ultralåga temperaturer. Även om dessa ampuller traditionellt har varit gjorda av glas, är de nu mycket vanligare gjorda av polypropen av bekvämlighets- och kostnadsskäl. Kryoampuller har noggrant utformats för att motstå temperaturer så låga som -196 ℃ och för att rymma en mängd olika celltyper. Dessa varierar från diagnostiska stamceller, mikroorganismer, primärceller till etablerade cellinjer. Utöver det kan det också finnas små flercelliga organismer som förvaras ikryogena förvaringsflaskor, såväl som nukleinsyror och proteiner som behöver förvaras vid kryogena lagringstemperaturnivåer.
Kryogena förvaringsflaskor finns i olika former, och att hitta rätt typ som uppfyller alla dina behov säkerställer att du bibehåller provets integritet utan att betala för mycket. Läs igenom vår artikel för att lära dig mer om de viktigaste köpövervägandena när du väljer rätt kryoflaska för din laboratorieapplikation.
Egenskaper hos kryogena flaskor att beakta
Externa vs. interna trådar
Människor gör ofta detta val baserat på personliga preferenser, men det finns faktiskt viktiga funktionella skillnader att beakta mellan de två typerna av tråd.
Många laboratorier väljer ofta invändigt gängade flaskor för att minimera förvaringsutrymmet för rören och ge dem bättre plats i fryslådor. Trots detta kan du överväga att det utvändigt gängade alternativet är det bättre alternativet för dig. De anses ha en lägre kontamineringsrisk på grund av designen som gör det ännu svårare för något annat än provet att komma in i flaskan.
Utvändigt gängade injektionsflaskor är generellt att föredra för genomiska tillämpningar, men båda alternativen anses lämpliga för biobankning och andra tillämpningar med hög genomströmning.
En sista sak att tänka på vid gängning – om ditt laboratorium använder automation kan du behöva överväga vilken gänga som kan användas med instrumentgriparna.
Lagringsvolym
Kryogena flaskor finns i en mängd olika storlekar för att täcka de flesta behov, men oftast varierar de i en kapacitet på mellan 1 ml och 5 ml.
Det viktiga är att se till att din kryoampull inte är överfylld och att det finns extra utrymme tillgängligt, ifall provet sväller under frysning. I praktiken innebär detta att laboratorier väljer 1 ml-ampuller när de förvarar prover med 0,5 ml celler suspenderade i kryoskyddsmedel, och 2 ml-ampuller för 1,0 ml prov. Ett annat tips för att inte överfylla dina ampuller är att använda kryoampuller med graderade markeringar, vilket säkerställer att du förhindrar svullnad som kan orsaka sprickbildning eller läckage.
Skruvkork kontra Flip-Top
Vilken typ av lock du väljer beror främst på om du kommer att använda flytande kvävefas eller inte. Om du gör det behöver du kryoflaskor med skruvkork. Detta säkerställer att de inte kan öppnas av misstag på grund av felaktig hantering eller temperaturförändringar. Dessutom möjliggör skruvkork enklare uttag från kryobehållare och effektivare förvaring.
Om du däremot inte använder flytande kvävgas och behöver ett mer praktiskt lock som är lättare att öppna, är ett fällbart lock det bättre alternativet. Detta sparar mycket tid eftersom det är mycket lättare att öppna, vilket gör det särskilt användbart vid högkapacitetsoperationer och de som använder batchprocesser.
Säkerhetstätning
Det bästa sättet att säkerställa en säker försegling är att se till att både ditt kryoampullslock och din flaska är tillverkade av samma material. Detta säkerställer att de krymper och expanderar samtidigt. Om de är tillverkade av olika material kommer de att krympa och expandera i olika takt när temperaturen förändras, vilket leder till glipor och potentiellt läckage och därmed kontaminering.
Vissa företag erbjuder dubbla brickor och flänsar för högsta möjliga provsäkerhet på utvändigt gängade kryorör. O-ringskryor anses vara de mest tillförlitliga för invändigt gängade kryorör.
Glas kontra plast
För säkerhets skull och bekvämlighet använder många laboratorier nu plast, vanligtvis polypropen, istället för värmeförseglingsbara glasampuller. Glasampuller anses nu vara ett föråldrat val eftersom osynliga nålhålsläckor kan uppstå under förseglingsprocessen, vilka kan få dem att explodera när de tinas upp efter förvaring i flytande kväve. De är inte heller lika lämpliga för moderna märkningstekniker, vilket är avgörande för att säkerställa provspårbarhet.
Fristående vs rundade bottnar
Kryogena flaskor finns tillgängliga både som fristående med stjärnformade botten eller som rundade botten. Om du behöver placera dina flaskor på en yta, se till att välja den fristående.
Spårbarhet och provspårning
Detta område inom kryogen lagring förbises ofta, men spårning och spårbarhet av prover är en viktig aspekt att beakta. Kryogena prover kan lagras i många år, under vilken tid personalen kan bytas ut och utan korrekt förda register kan de bli oidentifierbara.
Se till att välja flaskor som gör providentifiering så enkel som möjligt. Saker du bör vara uppmärksam på inkluderar:
Stora skrivytor för att registrera tillräckliga detaljer så att journaler kan hittas om en injektionsflaska placeras på fel plats – vanligtvis räcker det med cellidentitet, frysningsdatum och initialer för den ansvariga personen.
Streckkoder för att underlätta provhantering och spårningssystem
Färgade kepsar
En anmärkning för framtiden – ultraköldbeständiga chips utvecklas som, när de monteras i individuella kryoflaskor, potentiellt skulle kunna lagra en detaljerad termisk historik samt detaljerad batchinformation, testresultat och annan relevant kvalitetsdokumentation.
Förutom att beakta de olika specifikationerna för tillgängliga flaskor, behöver man också tänka på den tekniska processen för att förvara kryoflaskor i flytande kväve.
Förvaringstemperatur
Det finns flera lagringsmetoder för kryogen lagring av prover, och var och en arbetar vid en specifik temperatur. Alternativen och den temperatur de arbetar vid inkluderar:
Flytande fas LN2: bibehåll en temperatur på -196 ℃
Ångfas LN2: kan arbeta vid specifika temperaturintervall mellan -135 °C och -190 °C beroende på modell.
Kväveångfrysar: -20°C till -150°C
Den typ av celler som lagras och forskarens föredragna lagringsmetod avgör vilket av de tre tillgängliga alternativen ditt laboratorium använder.
På grund av de extremt låga temperaturerna som används är dock inte alla rör eller utföranden lämpliga eller säkra. Material kan bli extremt spröda vid extremt låga temperaturer, och om man använder en ampull som inte är lämplig för användning vid den valda temperaturen kan behållaren spricka eller spricka under förvaring eller upptining.
Kontrollera noggrant tillverkarens rekommendationer för korrekt användning eftersom vissa kryogena ampuller är lämpliga för temperaturer så låga som -175 °C, vissa -150 °C andra bara 80 °C.
Det är också värt att notera att många tillverkare uppger att deras kryogena ampuller inte är lämpliga för nedsänkning i vätskefas. Om dessa ampuller förvaras i vätskefas när de återgår till rumstemperatur kan dessa ampuller eller deras försegling splittras på grund av en snabb tryckökning orsakad av små läckor.
Om celler ska förvaras i flytande fas av flytande kväve, överväg att förvara celler i lämpliga kryogena flaskor värmeförseglade i cryoflexslangar eller förvara celler i glasampuller som är hermetiskt tillslutna.
Publiceringstid: 25 november 2022