Шта су криовиале?
Криогене бочице за складиштењесу мале, цилиндричне посуде са поклопцем, дизајниране за складиштење и очување узорака на ултраниским температурама. Иако су традиционално ове бочице биле направљене од стакла, сада се много чешће праве од полипропилена због практичности и трошкова. Криовиале су пажљиво дизајниране да издрже температуре и до -196℃ и да приме широк спектар типова ћелија. Оне варирају од дијагностичких матичних ћелија, микроорганизама, примарних ћелија до успостављених ћелијских линија. Поред тога, могу постојати и мали вишећелијски организми који се чувају унутра.криогене бочице за складиштење, као и нуклеинске киселине и протеини који се морају чувати на криогеним температурама складиштења.
Криогене бочице за складиштење долазе у различитим облицима, а проналажење правог типа који испуњава све ваше потребе осигураће да одржите интегритет узорка без преплаћивања. Прочитајте наш чланак да бисте сазнали више о кључним разматрањима куповине при избору праве криовице за вашу лабораторијску примену.
Особине криогене бочице које треба узети у обзир
Спољашњи наспрам унутрашњих навоја
Људи често бирају на основу личних преференција, али заправо постоје кључне функционалне разлике које треба узети у обзир између ове две врсте навоја.
Многе лабораторије се често одлучују за бочице са унутрашњим навојем како би смањиле простор за складиштење епрувета и омогућиле боље уклапање у кутије за замрзавање. Упркос томе, можете сматрати да је опција са спољашњим навојем боља опција за вас. Сматра се да носе мањи ризик од контаминације, због дизајна који још више отежава улазак било чега осим узорка у бочицу.
Спољне навојне бочице су генерално пожељније за геномске примене, али се обе опције сматрају погодним за биобанкинг и друге примене високог протока.
Још једна ствар коју треба узети у обзир у вези са навојем – ако ваша лабораторија користи аутоматизацију, можда ћете морати да размотрите који навој се може користити са хватачима инструмената.
Запремина складишта
Криогене бочице су доступне у различитим величинама како би покриле већину потреба, али углавном се крећу између 1 мл и 5 мл.
Кључно је осигурати да ваша криовијала није препуњена и да има додатног простора, у случају да узорак набубри током замрзавања. У пракси, то значи да се лабораторије одлучују за бочице од 1 мл када чувају узорке од 0,5 мл ћелија суспендованих у криопротектанту и бочице од 2,0 мл за 1,0 мл узорка. Још један савет да не препуните бочице је да користите криовијале са градуисаним ознакама, што ће осигурати да спречите било какво отицање које би могло изазвати пуцање или цурење.
Завртајући поклопац наспрам преклопног поклопца
Врста поклопца коју одаберете зависи углавном од тога да ли ћете користити течни азот или не. Ако га користите, онда ће вам бити потребне криовиоле са затварачем на завртање. Ово осигурава да се не могу случајно отворити због неправилног руковања или промена температуре. Поред тога, затварачи на завртање омогућавају лакше вађење из криогених кутија и ефикасније складиштење.
Међутим, ако не користите течни азот и потребан вам је практичнији поклопац који се лакше отвара, онда је поклопац на преклапање боља опција. Ово ће вам уштедети много времена јер се много лакше отвара, што га чини посебно корисним у операцијама са већим протоком и онима које користе серијске процесе.
Безбедност печата
Најбољи начин да осигурате сигурно заптивање јесте да се уверите да су и поклопац криовиале и боца направљени од истог материјала. Ово ће осигурати да се скупљају и шире усклађено. Ако су направљени од различитих материјала, онда ће се скупљати и ширити различитим брзинама како се температура мења, што ће довести до празнина и потенцијалног цурења и последичне контаминације.
Неке компаније нуде двоструке подлошке и прирубницу за највиши ниво безбедности узорка на криовиолама са спољашњим навојем. Криовиола са О-прстеном се сматрају најпоузданијим за криовиола са унутрашњим навојем.
Стакло наспрам пластике
Ради безбедности и практичности, многе лабораторије сада користе пластику, обично полипропилен, уместо ампула од стакла које се могу затварати топлотом. Стаклене ампуле се сада сматрају застарелим избором јер се током процеса затварања могу појавити невидљиве рупице, које приликом одмрзавања након складиштења у течном азоту могу проузроковати њихову експлозију. Такође нису толико погодне за модерне технике обележавања, што је кључно за обезбеђивање следљивости узорка.
Самостојеће наспрам заобљених дну
Криогене бочице су доступне и као самостојеће са дном у облику звезде или као заобљене. Ако треба да поставите бочице на површину, обавезно изаберите самостојећу верзију.
Праћење и праћење узорака
Ова област криогеног складиштења се често занемарује, али праћење узорака и следљивост су кључни аспекти које треба узети у обзир. Криогени узорци се могу чувати годинама, током којих се особље може мењати и без правилно вођених евиденција могу постати неидентификовани.
Обавезно изаберите бочице које што више олакшавају идентификацију узорка. Ствари на које треба обратити пажњу укључују:
Велики простори за писање за бележење довољно детаља како би се записи могли пронаћи ако се бочица налази на погрешној локацији – обично су идентитет ћелије, датум замрзавања и иницијали одговорне особе довољни.
Баркодови за помоћ у системима за управљање узорцима и праћење
Капе у боји
Напомена за будућност – развијају се ултра-отпорни чипови који, када се уграде у појединачне криовиоле, потенцијално могу да сачувају детаљну термичку историју, као и детаљне информације о серији, резултате испитивања и другу релевантну документацију о квалитету.
Поред разматрања различитих спецификација доступних бочица, потребно је размотрити и технички процес складиштења криовиала у течном азоту.
Температура складиштења
Постоји неколико метода криогеног складиштења узорака, свака од њих ради на одређеној температури. Опције и температура на којој раде укључују:
Течна фаза LN2: одржавати температуру од -196℃
Гасна фаза LN2: способни су за рад у одређеним температурним опсезима између -135°C и -190°C, у зависности од модела.
Замрзивачи са азотним парама: -20°C до -150°C
Врста ћелија које се чувају и преферирани метод складиштења истраживача одредиће коју од три доступне опције ваша лабораторија користи.
Међутим, због изузетно ниских температура које се користе, нису све епрувете или дизајни погодни или безбедни. Материјали могу постати изузетно крти на изузетно ниским температурама, а коришћење бочице која није погодна за употребу на изабраној температури може довести до ломљења или пуцања посуде током складиштења или одмрзавања.
Пажљиво проверите препоруке произвођача о правилној употреби, јер су неке криогене бочице погодне за температуре и до -175°C, неке -150°C, друге само 80°C.
Такође је вредно напоменути да многи произвођачи наводе да њихове криогене бочице нису погодне за урањање у течну фазу. Ако се ове бочице чувају у течној фази када се врате на собну температуру, ове бочице или њихови поклопци могу се поломити због брзог нагомилавања притиска изазваног малим цурењима.
Ако ћелије треба чувати у течној фази течног азота, размотрите чување ћелија у одговарајућим криогеним бочицама термички затвореним у криофлекс цевима или чување ћелија у стакленим ампулама које су херметички затворене.
Време објаве: 25. новембар 2022.