Что такое криопробирки?
Криогенные флаконы для хранениянебольшие, закрытые и цилиндрические контейнеры, предназначенные для хранения и консервации образцов при сверхнизких температурах. Хотя традиционно эти флаконы изготавливались из стекла, сейчас их гораздо чаще делают из полипропилена из соображений удобства и стоимости. Криопробирки были тщательно разработаны, чтобы выдерживать температуры до -196℃ и вмещать самые разные типы клеток. Они варьируются от диагностических стволовых клеток, микроорганизмов, первичных клеток до установленных клеточных линий. Помимо этого, могут также быть небольшие многоклеточные организмы, которые хранятся внутрикриогенные флаконы для хранения, а также нуклеиновые кислоты и белки, которые необходимо хранить при температурах криогенного хранения.
Криогенные флаконы для хранения бывают разных форм, и поиск правильного типа, который соответствует всем вашим потребностям, гарантирует, что вы сохраните целостность образца, не переплачивая. Прочтите нашу статью, чтобы узнать больше о ключевых моментах покупки при выборе правильной криопробирки для вашего лабораторного применения.
Свойства криогенной пробирки, которые следует учитывать
Внешняя и внутренняя резьба
Люди часто делают этот выбор, основываясь на личных предпочтениях, но на самом деле между этими двумя типами нитей существуют ключевые функциональные различия, которые следует учитывать.
Многие лаборатории часто выбирают флаконы с внутренней резьбой, чтобы минимизировать пространство для хранения пробирок и обеспечить лучшее размещение в морозильных коробках. Несмотря на это, вы можете решить, что вариант с внешней резьбой — лучший для вас. Считается, что они несут меньший риск загрязнения из-за конструкции, которая еще больше затрудняет попадание во флакон чего-либо, кроме образца.
Флаконы с внешней резьбой обычно предпочтительны для геномных приложений, но любой из вариантов считается подходящим для биобанкинга и других приложений с высокой пропускной способностью.
Последнее, что следует учесть при заправке резьбы: если в вашей лаборатории используется автоматизация, вам, возможно, придется подумать, какую резьбу можно использовать с захватами инструментов.
Объем хранения
Криогенные флаконы доступны в различных размерах, чтобы удовлетворить большинство потребностей, но в основном их емкость составляет от 1 мл до 5 мл.
Главное — убедиться, что ваша криопробирка не переполнена и что есть дополнительное место на случай, если образец разбухнет при замораживании. На практике это означает, что лаборатории выбирают пробирки объемом 1 мл при хранении образцов объемом 0,5 мл клеток, взвешенных в криопротекторе, и пробирки объемом 2,0 мл для 1,0 мл образца. Еще один совет, чтобы не переполнять пробирки, — использовать криопробирки с градуированной маркировкой, что позволит предотвратить разбухание, которое может привести к трещинам или утечке.
Крышка с завинчивающейся крышкой против откидной крышки
Тип крышки, которую вы выберете, зависит в основном от того, будете ли вы использовать жидкую фазу азота или нет. Если да, то вам понадобятся криопробирки с завинчивающимися крышками. Это гарантирует, что они не откроются случайно из-за неправильного обращения или перепадов температуры. Кроме того, завинчивающиеся крышки облегчают извлечение из криогенных коробок и более эффективное хранение.
Однако, если вы не используете жидкий азот и вам нужна более удобная крышка, которую легче открывать, то лучшим вариантом будет откидная крышка. Это сэкономит вам много времени, так как ее гораздо легче открывать, что делает ее особенно полезной в операциях с высокой пропускной способностью и в тех, где используются пакетные процессы.
Печать безопасности
Лучший способ обеспечить надежную герметизацию — убедиться, что крышка и бутылка криопробирки изготовлены из одного и того же материала. Это гарантирует, что они будут сжиматься и расширяться синхронно. Если они изготовлены из разных материалов, то они будут сжиматься и расширяться с разной скоростью при изменении температуры, что приведет к образованию зазоров и потенциальной утечке и последующему загрязнению.
Некоторые компании предлагают двойные шайбы и фланец для наивысшего уровня безопасности образцов на криопробирках с внешней резьбой. Криопробирки с уплотнительным кольцом считаются наиболее надежными для криопробирок с внутренней резьбой.
Стекло против Пластика
Для безопасности и удобства многие лаборатории теперь используют пластик, обычно полипропилен, вместо термосвариваемых стеклянных ампул. Стеклянные ампулы теперь считаются устаревшим выбором, поскольку в процессе герметизации могут возникнуть невидимые протечки через точечные отверстия, которые при размораживании после хранения в жидком азоте могут привести к их взрыву. Они также не так подходят для современных методов маркировки, что является ключом к обеспечению прослеживаемости образцов.
Отдельно стоящие и с закругленным дном
Криогенные флаконы доступны как в виде самостоятельных флаконов с дном в форме звезды, так и в виде закругленных флаконов. Если вам нужно разместить флаконы на поверхности, то обязательно выбирайте самостоятельные флаконы
Прослеживаемость и отслеживание образцов
Эту область криогенного хранения часто упускают из виду, но отслеживание и прослеживаемость образцов являются важным аспектом, который следует учитывать. Криогенные образцы могут храниться в течение многих лет, в течение которых персонал может смениться, и без надлежащего ведения записей они могут стать неидентифицируемыми.
Обязательно выбирайте флаконы, которые максимально упрощают идентификацию образцов. Обратите внимание на следующее:
Большие поля для записей позволяют записывать достаточно подробностей, чтобы записи можно было найти, если пробирка находится в неправильном месте. Обычно достаточно указать идентификационный номер ячейки, дату заморозки и инициалы ответственного лица.
Штрихкоды для помощи системам управления образцами и отслеживания
Цветные колпачки
Заметка на будущее: разрабатываются ультрахолодостойкие чипы, которые при установке в отдельные криопробирки потенциально могли бы хранить подробную термическую историю, а также подробную информацию о партии, результаты испытаний и другую соответствующую документацию по качеству.
Помимо учета различных спецификаций имеющихся в наличии криопробирок, необходимо также уделить внимание техническому процессу хранения криопробирок в жидком азоте.
Температура хранения
Существует несколько методов хранения для криогенного хранения образцов, каждый из которых работает при определенной температуре. Варианты и температура, при которой они работают, включают:
Жидкая фаза LN2: поддержание температуры -196℃
Парообразная фаза LN2: способна работать в определенных диапазонах температур от -135°C до -190°C в зависимости от модели.
Морозильные камеры на основе паров азота: от -20°C до -150°C
Тип хранящихся клеток и предпочтительный для исследователя метод хранения определят, какой из трех доступных вариантов будет использоваться в вашей лаборатории.
Однако из-за чрезвычайно низких температур не все трубки или конструкции будут подходящими или безопасными. Материалы могут стать чрезвычайно хрупкими при чрезвычайно низких температурах, использование флакона, не подходящего для использования при выбранной вами температуре, может привести к тому, что сосуд расколется или треснет во время хранения или размораживания.
Внимательно ознакомьтесь с рекомендациями производителей по правильному использованию, поскольку некоторые криогенные флаконы подходят для температур до -175 °C, некоторые — до -150 °C, а другие — всего лишь до 80 °C.
Также стоит отметить, что многие производители заявляют, что их криогенные флаконы не подходят для погружения в жидкую фазу. Если эти флаконы хранятся в жидкой фазе, то при возвращении к комнатной температуре эти флаконы или их колпачковые уплотнения могут разрушиться из-за быстрого нарастания давления, вызванного небольшими утечками.
Если клетки планируется хранить в жидкой фазе жидкого азота, рассмотрите возможность хранения клеток в подходящих криогенных флаконах, запаянных в криофлексные трубки, или хранение клеток в герметично закрытых стеклянных ампулах.
Время публикации: 25 ноября 2022 г.