Czym są Cryovials?
Kriogeniczne fiolki do przechowywaniato małe, zakręcane i cylindryczne pojemniki przeznaczone do przechowywania i konserwacji próbek w bardzo niskich temperaturach. Chociaż tradycyjnie fiolki te były wykonane ze szkła, obecnie są znacznie częściej wykonane z polipropylenu ze względu na wygodę i koszty. Kriofiolki zostały starannie zaprojektowane, aby wytrzymać temperatury do -196℃ i pomieścić szeroką gamę typów komórek. Obejmują one komórki macierzyste diagnostyczne, mikroorganizmy, komórki pierwotne i ustalone linie komórkowe. Poza tym mogą być również małe organizmy wielokomórkowe, które są przechowywane wfiolki do przechowywania kriogenicznegooraz kwasy nukleinowe i białka, które wymagają przechowywania w kriogenicznych temperaturach.
Kriogeniczne fiolki do przechowywania występują w różnych formach, a znalezienie właściwego typu, który spełnia wszystkie Twoje potrzeby, zapewni zachowanie integralności próbki bez przepłacania. Przeczytaj nasz artykuł, aby dowiedzieć się więcej o kluczowych kwestiach zakupowych przy wyborze odpowiedniej kriofiolki do zastosowań laboratoryjnych.
Właściwości kriogenicznej fiolki, które należy wziąć pod uwagę
Wątki zewnętrzne i wewnętrzne
Ludzie często dokonują tego wyboru na podstawie osobistych preferencji, ale w rzeczywistości istnieją zasadnicze różnice funkcjonalne, które należy wziąć pod uwagę pomiędzy tymi dwoma typami wątków.
Wiele laboratoriów często decyduje się na fiolki z wewnętrznym gwintem, aby zminimalizować przestrzeń do przechowywania probówek i umożliwić lepsze dopasowanie do pudełek zamrażarki. Mimo to możesz rozważyć opcję z zewnętrznym gwintem jako lepszą opcję dla Ciebie. Uważa się, że wiążą się z mniejszym ryzykiem zanieczyszczenia, ze względu na konstrukcję, która sprawia, że do fiolki trudniej jest dostać się czemuś innemu niż próbka.
W zastosowaniach genomicznych zazwyczaj preferuje się fiolki z gwintem zewnętrznym, ale w przypadku biobanków i innych zastosowań o dużej przepustowości obie opcje są uważane za odpowiednie.
Ostatnia rzecz, którą należy wziąć pod uwagę przy nawlekaniu – jeśli w Twoim laboratorium stosuje się automatyzację, warto zastanowić się, jakie gwinty można stosować w chwytakach do instrumentów.
Objętość pamięci masowej
Kriogeniczne fiolki są dostępne w różnych rozmiarach, aby zaspokoić większość potrzeb, ale zazwyczaj ich pojemność mieści się w przedziale od 1 ml do 5 ml.
Kluczem jest upewnienie się, że kriofiolka nie jest przepełniona i że jest dodatkowe miejsce na wypadek, gdyby próbka pęczniała podczas zamrażania. W praktyce oznacza to, że laboratoria wybierają fiolki 1 ml do przechowywania próbek 0,5 ml komórek zawieszonych w krioochronnym środku i fiolki 2,0 ml do 1,0 ml próbki. Inną wskazówką, aby nie przepełniać fiolek, jest używanie kriofiolek z podziałką, co zapobiegnie pęcznieniu, które mogłoby spowodować pękanie lub przeciekanie.
Zakrętka śrubowa kontra zakrętka z klapką
Rodzaj wybranej pokrywy zależy głównie od tego, czy będziesz używać ciekłego azotu, czy nie. Jeśli tak, będziesz potrzebować kriofiolek z zakrętką. Dzięki temu nie otworzą się przypadkowo z powodu niewłaściwego obchodzenia się z nimi lub zmian temperatury. Ponadto zakrętki umożliwiają łatwiejsze wyjmowanie z kriogenicznych pudełek i bardziej wydajne przechowywanie.
Jeśli jednak nie używasz ciekłego azotu i potrzebujesz wygodniejszej pokrywy, którą łatwiej otworzyć, to lepszą opcją jest otwieracz typu flip-top. Zaoszczędzi ci to dużo czasu, ponieważ otwiera się go znacznie łatwiej, co czyni go szczególnie przydatnym w operacjach o większej przepustowości i tych, w których stosuje się procesy wsadowe.
Zabezpieczenie pieczęci
Najlepszym sposobem na zapewnienie szczelności jest upewnienie się, że nasadka kriofiolki i butelka są wykonane z tego samego materiału. Dzięki temu będą się one kurczyć i rozszerzać jednocześnie. Jeśli są wykonane z różnych materiałów, będą się kurczyć i rozszerzać w różnym tempie wraz ze zmianą temperatury, co doprowadzi do powstania szczelin i potencjalnych wycieków, a w konsekwencji skażenia.
Niektóre firmy oferują podwójne podkładki i kołnierze dla najwyższego poziomu bezpieczeństwa próbek w kriofiolkach z gwintem zewnętrznym. Kriofiolki z pierścieniem uszczelniającym są uważane za najbardziej niezawodne w przypadku kriofiolek z gwintem wewnętrznym.
Szkło kontra plastik
Ze względów bezpieczeństwa i wygody wiele laboratoriów używa teraz plastiku, zazwyczaj polipropylenu, zamiast zgrzewalnych szklanych ampułek. Szklane ampułki są obecnie uważane za przestarzały wybór, ponieważ podczas procesu zgrzewania mogą powstawać niewidoczne przecieki, które po rozmrożeniu po przechowywaniu w ciekłym azocie mogą spowodować ich eksplozję. Nie nadają się również do nowoczesnych technik etykietowania, co jest kluczowe dla zapewnienia identyfikowalności próbek.
Samodzielne i zaokrąglone dno
Kriogeniczne fiolki są dostępne zarówno jako wolnostojące z dnem w kształcie gwiazdy, jak i jako zaokrąglone dno. Jeśli musisz umieścić fiolki na powierzchni, upewnij się, że wybierzesz wolnostojące
Śledzenie i śledzenie próbek
Ten obszar kriogenicznego przechowywania jest często pomijany, ale śledzenie i identyfikowalność próbek to kluczowe aspekty, które należy wziąć pod uwagę. Kriogeniczne próbki mogą być przechowywane przez wiele lat, w tym czasie personel może się zmieniać, a bez prawidłowo prowadzonych rejestrów mogą stać się nie do zidentyfikowania.
Upewnij się, że wybierasz fiolki, które umożliwiają jak najłatwiejszą identyfikację próbki. Na co powinieneś zwrócić uwagę, to:
Duże powierzchnie do zapisywania szczegółów, dzięki którym można odnaleźć dokumenty, jeśli fiolka znajduje się w niewłaściwym miejscu – zazwyczaj wystarczają dane identyfikacyjne komórki, data zamrożenia i inicjały osoby odpowiedzialnej.
Kody kreskowe wspomagające zarządzanie próbkami i systemy śledzenia
Kolorowe czapki
Uwaga na przyszłość – opracowywane są chipy odporne na bardzo niskie temperatury, które po umieszczeniu w pojedynczych kriofiolkach mogłyby potencjalnie przechowywać szczegółową historię termiczną, a także szczegółowe informacje o partii, wyniki testów i inną istotną dokumentację jakościową.
Oprócz uwzględnienia różnych specyfikacji dostępnych fiolek, należy również zastanowić się nad technicznym procesem przechowywania kriogenicznych fiolek w ciekłym azocie.
Temperatura przechowywania
Istnieje kilka metod przechowywania kriogenicznego próbek, każda działa w określonej temperaturze. Opcje i temperatura, w której działają, obejmują:
Faza ciekła LN2: utrzymywać temperaturę -196℃
Gaz LN2 w fazie gazowej: może pracować w określonym zakresie temperatur od -135°C do -190°C, w zależności od modelu.
Zamrażarki parowe azotowe: -20°C do -150°C
Rodzaj przechowywanych komórek i preferowana przez badacza metoda przechowywania decydują o tym, którą z trzech dostępnych opcji wybierze Twoje laboratorium.
Jednak ze względu na ekstremalnie niskie temperatury nie wszystkie probówki lub projekty będą odpowiednie lub bezpieczne. Materiały mogą stać się ekstremalnie kruche w ekstremalnie niskich temperaturach, użycie fiolki nieodpowiedniej do użycia w wybranej temperaturze może spowodować pęknięcie lub rozbicie naczynia podczas przechowywania lub rozmrażania.
Należy dokładnie sprawdzić zalecenia producenta dotyczące prawidłowego użytkowania, ponieważ niektóre kriogeniczne fiolki nadają się do temperatur sięgających nawet -175°C, inne -150°C, a jeszcze inne zaledwie 80°C.
Warto również zauważyć, że wielu producentów twierdzi, że ich kriogeniczne fiolki nie nadają się do zanurzania w fazie ciekłej. Jeśli te fiolki są przechowywane w fazie ciekłej po powrocie do temperatury pokojowej, te fiolki lub ich uszczelki mogą pęknąć z powodu szybkiego wzrostu ciśnienia spowodowanego przez małe nieszczelności.
Jeżeli komórki mają być przechowywane w fazie ciekłej ciekłego azotu, należy rozważyć przechowywanie ich w odpowiednich kriogenicznych fiolkach zamkniętych w rurce krioflex lub w szklanych ampułkach zamykanych hermetycznie.
Czas publikacji: 25-11-2022