CryophialesAd cryogenicam conservationem stirpium cellularum aliarumque materiarum biologicarum criticarum, in vasis dewaris nitrogenio liquido repletis, vulgo adhibentur.

Plura sunt gradus qui ad prosperam conservationem cellularum in nitrogenio liquido pertinent. Quamquam principium fundamentale est congelatio lenta, ars exacta adhibita a genere cellulae et cryoprotectore adhibito pendet. Plures sunt rationes salutis et optimae praxis considerandae cum cellulae sub tam humilibus temperaturis servantur.

Haec scriptura conspectum dare propositum habet quomodo cryophialae in nitrogenio liquido conserventur.

Quid sunt cryophialia?

Cryophiales sunt parvae ampullae operculatae, ad exempla liquida sub temperaturis infimis conservanda destinatae. Haec efficiunt ut cellulae in cryoprotectore conservatae nitrogenio liquido non in contactum directum veniant, periculum fracturarum cellularum minuentes, dum adhuc effectu refrigerante extremo nitrogenii liquidi fruuntur.

Ampullae plerumque variis voluminibus et formis praesto sunt – possunt esse interne vel externe filetatae cum fundis planis vel rotundatis. Formae steriles et non steriles etiam praesto sunt.

Quis UtiturCyrovialiaad cellulas in nitrogenio liquido conservandas

Varia laboratorium NHS et privatum, necnon instituta investigationis in conservatione sanguinis umbilicalis, biologia cellularum epithelialis, immunologia et biologia cellularum primordialium specializantia, cryophialas ad cellulas cryopreservandas utuntur.

Cellulae hoc modo conservatae includunt cellulas B et T, cellulas CHO, cellulas haematopoieticas caulis et progenitores, hybridomata, cellulas intestinales, macrophaga, cellulas mesenchymales caulis et progenitores, monocytos, myeloma, cellulas NK et cellulas caulis pluripotentes.

Conspectus de Conservatione Cryophialium in Nitrogenio Liquido

Cryopreservatio est processus qui cellulas et alias structuras biologicas refrigerando ad temperaturas humillimas conservat. Cellulae in nitrogenio liquido per annos sine iactura vitalitatis cellularis conservari possunt. Haec est delineatio procedendi adhibitarum.

Praeparatio Cellularum

Ratio exacta ad exempla praeparanda variabit secundum genus cellulae, sed plerumque cellulae colliguntur et centrifugantur ut pellet cellularum dives efficiatur. Hoc pellet deinde in supernatante mixto cum cryoprotectore vel medio cryopreservationis resuspenditur.

Medium Cryopreservationis

Hoc medium ad conservandas cellulas in ambitu temperaturae humilis quibus subiicientur adhibetur, inhibendo formationem crystallorum intra et extracellularium et proinde mortem cellularem. Munus eorum est praebere ambitum tutum et protectivum pro cellulis et textibus per processus congelationis, conservationis et liquefactionis.

Medium, quale plasma recens congelatum (FFP), solutio plasmalytorum heparinizata, vel solutiones sine sero, sine componentibus animalibus, miscetur cum cryoprotectoriis, ut dimethylsulphoxidum (DMSO) vel glycerolum.

Granula exemplaris reliquata in cryophialas polypropylenicas, ut puta..., dividitur.Suzhou Ace Societas Biomedica Ampullae Cryogenicae Reponendi.

Magni momenti est ne cryophialae nimis impleantur, quod periculum fissurarum et emissionis contentorum augebit (1).

Frequentia Congelationis Controllata

In genere, lenta et moderata congelationis celeritas ad prosperam cryopreservationem cellularum adhibetur.

Postquam exempla in phialas cryogenicas aliquotas diviserunt, super glaciem humidam vel in armario frigorifico 4°C ponuntur et processus congelationis intra 5 minuta incipit. Generaliter, cellulae refrigerantur ratione -1 ad -3 per minutum (2). Hoc fit utens refrigeratore programmabili vel phialas in arca insulata collocando, quae in armario frigorifico a –70°C ad –90°C celeritate moderata collocatur.

Translatio ad Nitrogenium Liquidum

Ampullae cryogenicae congelatae deinde in cisternam nitrogenii liquidi per tempora indefinita transferuntur, dummodo temperatura minor quam -135℃ servetur.

Hae temperaturae infimae per immersionem in nitrogenium liquidum vel vaporosum obtineri possunt.

Phasis liquida an vaporis?

Conservatio in nitrogenio liquido nota est ad temperaturam frigidam cum absoluta constantia conservandam, sed saepe non commendatur ob causas sequentes:

• Necessitas magnorum voluminum (profunditatis) nitrogenii liquidi, quod periculum potentiale affert. Ustiones vel asphyxia propter hoc periculum reale est.
• Casus documentati contaminationis transversalis ab agentibus infectiosis ut aspergillo, hepatitide B et propagatione virali per medium nitrogenii liquidi (2,3)
• Potentia nitrogenii liquidi in phialas effluentis durante immersione. Cum e custodia removetur et ad temperaturam ambientem calefactum, nitrogenium celeriter expandit. Proinde, phiala frangi potest cum e custodia nitrogenii liquidi removetur, periculum creans et ex fragmentis volantibus et ex expositione contentorum (1, 4).

Ob has causas, conservatio temperaturae infimae saepissime in nitrogenio vaporis fit. Cum exempla in liquido conservanda sunt, tubuli cryoflex speciales adhibendi sunt.

Incommodum phasis vaporis est quod gradiens temperaturae verticalis oriri potest, quod fluctuationes temperaturae inter -135℃ et -190℃ efficit. Hoc requirit diligentem et diligentem observationem graduum nitrogenii liquidi et variationum temperaturae (5).

Multi fabri commendant ut cryophialae idoneae sint ad conservationem usque ad -135℃ vel ad usum in phase vaporis tantum.

Cellulas Cryopreservatas Liquefaciens

Ratio liquefactionis culturae congelatae difficilis est, et tractatio et ars aptae requiruntur ad optimam cellularum vitalitatem, recuperationem, et functionem curandam. Protocolla exacta liquefactionis a generibus specificis cellularum pendent. Tamen, liquefactio celeris communis habetur ad:

• Impactum quemvis in recuperationem cellularem minue.
• Adiuva ad tempus expositionis ad substantias solutas in mediis congelationis praesentibus reducendum.
• Damnum quodlibet per recrystallizationem glaciei minue.

Balnea aquae, balnea globulorum, vel instrumenta automataria specialia ad exempla liquefacienda vulgo adhibentur.

Saepe una stirps cellularum semel per 1-2 minuta liquefacitur, leniter in balneo aquae 37°C agitando donec parva tantum glaciei particula in phiala remaneat, antequam in medio crescenti praecalefacto laventur.

Quibusdam cellulis, ut embryonibus mammalium, lentus calefactio ad superviventiam earum necessaria est.

Cellulae nunc paratae sunt ad culturam cellularem, isolationem cellularem, vel, in casu cellularum haematopoieticarum primordialium, ad studia viabilitatis ad integritatem cellularum primordialium donatricis ante therapiam myeloablativam confirmandam.

Mos est parvas portiones ex exemplo praeloto, quod ad numerationem cellularum peragendam adhibitum est, sumere, ut concentrationes cellularum ad culturam in involucris ponendam determinentur. Deinde eventus rationum isolationis cellularum aestimare et cellularum vitalitatem determinare potes.

Optimae Consuetudines ad Cryophialas Conservandas

Cryopreservatio prospera exemplorum in cryophialis repositorum a multis elementis protocolli pendet, inter quas sunt recta conservatio et archivorum conservatio.

• Divide cellulas inter locos repositionis– Si volumina permittunt, cellulas inter fialas divide et in locis separatis conserva ut periculum amissionis speciminis ob defectus instrumentorum minuatur.
• Impedire contaminationem cruciatam– Ante usum subsequentem, phialas cryogenicas steriles semel tantum adhibendas vel autoclavem elige.
• Fialas magnitudinis idoneae pro cellulis tuis utere.– phialae in voluminibus inter 1 et 5 ml veniunt. Vitanda est phialae nimis implendae ne periculum fracturarum minuatur.
• Fialas cryogenicas internas vel externas elige.– Ampullae interne filetatae ab aliquibus universitatibus propter cautiones salutis commendantur – etiam contaminationem impedire possunt dum implentur vel cum in nitrogenio liquido servantur.
• Prohibe Effusionem- Sigilla bi-injecta in operculum cochleatum vel anulos toricos inserta adhibe ad effluxum et contaminationem prohibendam.
• Codices lineares bidimensionales adhibe et phialas nota.– ad vestigialitatem servandam, ampullae cum magnis areis scribendi permittunt singulas ampullas rite inscriptioni aptandas. Codices lineares bidimensionales (2D) in administratione repositionis et conservatione archivorum auxilium ferre possunt. Opercula coloribus distincta ad faciliorem identificationem utilia sunt.
• Conservatio repositionis idonea- Ne cellulae amittantur, vasa repositionis temperaturam et gradus nitrogenii liquidi perpetuo observare debent. Alarmae ​​aptandae sunt ut usores de erroribus moneant.

Cautiones Salutis

Nitrogenium liquidum in investigationibus modernis communis usus factus est, sed periculum gravis iniuriae secum fert si non recte adhibeatur.

Apparatus tutelae personalis (PPE) idoneus gerendus est ad periculum congelationis, ustionum, aliorumque casuum adversorum dum nitrogenium liquidum tractatur minuendum. Gerendum est

• Chirothecae cryogenicae
• Tunica laboratorium
• Scutum faciei integrum resistens impactibus quod etiam collum tegit
• Calcei clausi
• Praecinctura plastica aspergini resistens

Refrigeratoria nitrogenii liquidi in locis bene ventilatis collocanda sunt ut periculum asphyxii minuatur – nitrogenium enim effusum vaporat et oxygenium atmosphaericum depellit. Magnae copiae tabernae systemata alarmis pro oxygenio humili habere debent.

Opportunum est binis laborare cum nitrogenium liquidum tractatur, et eius usus extra horas laboris consuetas prohibendus est.

Cryophiales ad Fluxum Operis Tui Sustentandum

Societas Suzhou Ace Biomedical amplam productorum selectionem offert quae necessitatibus tuis cryopreservationis pro variis generibus cellularum satisfaciunt. Portfolio seriem tuborum necnon seriem cryophialium sterilium comprehendit.

Cryophialae nostrae sunt:

• Operculum cochleare laboratorium 0.5mL 1.5mL 2.0mL Cryophiae Cryogenicae Cryotubus Fundo Conico cum Obturamento

  ● Specificationes 0.5ml, 1.5ml, 2.0ml, cum vel sine fimbria
  ● Designatio conica vel per se stans, sterilis vel non sterilis ambae praesto sunt.
  ● Tubi cochleatis ex polypropyleno gradus medicinalis facti sunt.
  ● Ampullae Cryotubi PP crebro congelari et liquefieri possunt.
  ● Designatio operculi externi probabilitatem contaminationis durante tractatione speciminis minuere potest.
  ● Tubi cryogenici operculi cochleati; fila cochleata universalia ad usum.
  ● Tubi apti rotoribus communissimis
  ● Tubi cryogenici anulares apti sunt ad congelatores 1 unciae et 2 unciae, 48 puteorum, 81 puteorum, 96 puteorum et 100 puteorum.
  ● Autoclavabile ad 121°C et congelabile ad -86°C

  NUMERUS PARTIS	MATERIA	VOLUMEN	PILEUSCOLOR	PCS/SACCA	SACCI/CASULA
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	Niger, Flavus, Caeruleus, Ruber, Purpureus, Albus	quingenti	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ML	Niger, Flavus, Caeruleus, Ruber, Purpureus, Albus	quingenti	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ML	Niger, Flavus, Caeruleus, Ruber, Purpureus, Albus	quingenti	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	Niger, Flavus, Caeruleus, Ruber, Purpureus, Albus	quingenti	10