כיצד לבחור את בקבוקון האחסון הקריוגני המתאים למעבדה שלך

מהן בקבוקוני קריו?

בקבוקוני אחסון קריוגנייםהם מיכלים קטנים, גליליים ובעלי מכסה, המיועדים לאחסון ושימור דגימות בטמפרטורות נמוכות במיוחד. למרות שבאופן מסורתי בקבוקונים אלה היו עשויים מזכוכית, כיום הם עשויים הרבה יותר מפוליפרופילן מסיבות נוחות ועלות. בקבוקוני קריו תוכננו בקפידה לעמוד בטמפרטורות נמוכות עד -196 מעלות צלזיוס, ולהתאים למגוון רחב של סוגי תאים. אלה נעים מתאי גזע לאבחון, מיקרואורגניזמים, תאים ראשוניים ועד שורות תאים מבוססות. מעבר לכך, ייתכנו גם אורגניזמים רב-תאיים קטנים המאוחסנים בתוךבקבוקוני אחסון קריוגניים, כמו גם חומצות גרעין וחלבונים שיש לאחסן ברמות טמפרטורת אחסון קריוגנית.

בקבוקוני אחסון קריוגניים מגיעים במגוון צורות, ומציאת הסוג הנכון העונה על כל הצרכים שלכם תבטיח שתשמרו על שלמות הדגימה מבלי לשלם יותר מדי. קראו את המאמר שלנו כדי ללמוד עוד על שיקולי הקנייה המרכזיים בעת בחירת בקבוקון הקריוגני המתאים ליישום המעבדה שלכם.

מאפייני בקבוקון קריוגני שיש לקחת בחשבון

חוטים חיצוניים לעומת חוטים פנימיים

אנשים לעתים קרובות עושים בחירה זו על סמך העדפה אישית, אך למעשה ישנם הבדלים פונקציונליים מרכזיים שיש לקחת בחשבון בין שני סוגי החוטים.

מעבדות רבות בוחרות לעתים קרובות בבקבוקונים עם הברגה פנימית כדי למזער את שטח האחסון של המבחנים ולאפשר התאמה טובה יותר לקופסאות הקפאה. למרות זאת, ייתכן שתשקלו שאפשרות ההברגה החיצונית היא האפשרות הטובה יותר עבורכם. הם נחשבים כבעלי סיכון נמוך יותר לזיהום, בשל העיצוב המקשה עוד יותר על כל דבר מלבד הדגימה להיכנס לבקבוקון.

בקבוקונים עם הברגה חיצונית עדיפים בדרך כלל עבור יישומים גנומיים, אך כל אחת מהאפשרויות נחשבת מתאימה לבנקאות ביולוגית ויישומים אחרים של תפוקה גבוהה.

דבר אחרון שכדאי לקחת בחשבון בנוגע להברגה - אם המעבדה שלכם משתמשת באוטומציה, ייתכן שתצטרכו לשקול איזה הברגה ניתן להשתמש עם תופסי המכשיר.

נפח אחסון

בקבוקונים קריוגניים זמינים במגוון גדלים כדי לכסות את רוב הצרכים, אך לרוב הם נעים בין 1 מ"ל ל-5 מ"ל.

המפתח הוא לוודא שהקריובקבוקון שלכם אינו מלא יתר על המידה ושיש מקום נוסף פנוי, למקרה שהדגימה תתנפח בזמן ההקפאה. בפועל, משמעות הדבר היא שמעבדות בוחרות בבקבוקונים של 1 מ"ל בעת אחסון דגימות של 0.5 מ"ל של תאים מורחפים בחומר קריופרוטקטיב, ובקבוקונים של 2.0 מ"ל עבור 1.0 מ"ל של דגימה. טיפ נוסף למניעת מילוי יתר של הבקבוקונים הוא להשתמש בקריובקבוקונים עם סימונים מדורגים, מה שיבטיח שתמנעו נפיחות שעלולה לגרום לסדקים או דליפה.

מכסה בורג לעומת מכסה הפוך

סוג המכסה שתבחרו תלוי בעיקר בשאלה האם תשתמשו בחנקן בשלב נוזלי או לא. אם כן, תזדקקו לבקבוקונים עם מכסה הברגה. זה מבטיח שהבקבוקונים לא ייפתחו בטעות עקב טיפול לקוי או שינויי טמפרטורה. בנוסף, מכסי הברגה מאפשרים שליפה קלה יותר מקופסאות קריוגניות ואחסון יעיל יותר.

עם זאת, אם אינכם משתמשים בחנקן נוזלי וזקוקים למכסה נוח יותר שקל יותר לפתוח, אז מכסה מתקפל הוא האפשרות הטובה יותר. זה יחסוך לכם הרבה זמן מכיוון שהוא קל הרבה יותר לפתיחה, מה שהופך אותו לשימושי במיוחד בפעולות בעלות תפוקה גבוהה ובתהליכים אצווה.

אבטחת חותם

הדרך הטובה ביותר להבטיח אטימה בטוחה היא לוודא שפקק הקריוביול והבקבוק עשויים מאותו חומר. זה יבטיח שהם יתכווצו ויתרחבו יחד. אם הם עשויים מחומרים שונים, הם יתכווצו ויתרחבו בקצב שונה ככל שהטמפרטורה משתנה, מה שיגרום לפערים ודליפות אפשריות וזיהום כתוצאה מכך.

חלק מהחברות מציעות דיסקיות כפולות ופלאנג' לרמת אבטחה גבוהה ביותר של דגימות על בקבוקוני קריו עם הברגה חיצונית. בקבוקוני קריו עם טבעת O נחשבים לאמינים ביותר עבור בקבוקוני קריו עם הברגה פנימית.

זכוכית לעומת פלסטיק

מטעמי בטיחות ונוחות, מעבדות רבות משתמשות כיום בפלסטיק, בדרך כלל פוליפרופילן, במקום באמפולות זכוכית הניתנות לאיטום בחום. אמפולות זכוכית נחשבות כיום לבחירה מיושנת, שכן במהלך תהליך האיטום עלולים להתפתח דליפות בלתי נראות מסוג חורים קטנים, אשר כאשר הן מופשרות לאחר אחסון בחנקן נוזלי עלולות לגרום להן להתפוצץ. הן גם אינן מתאימות לטכניקות תיוג מודרניות, שהן המפתח להבטחת מעקב אחר דגימות.

תחתית עומדת לעומת תחתית מעוגלת

בקבוקונים קריוגניים זמינים הן כעצמאיים עם תחתית בצורת כוכב, והן כמעוגלים. אם אתם צריכים להניח את הבקבוקונים שלכם על משטח, הקפידו לבחור את הבקבוק העומד.

עקיבות ומעקב אחר דגימות

תחום זה של אחסון קריוגני מתעלמים ממנו לעתים קרובות, אך מעקב ומעקב אחר דגימות הוא היבט מכריע שיש לקחת בחשבון. ניתן לאחסן דגימות קריוגניות במשך שנים רבות, ובמהלך תקופה זו הצוות יכול להתחלף, ובלי רישומים מתוחזקים כראוי הן עלולות להפוך לבלתי ניתנות לזיהוי.

הקפידו לבחור בקבוקונים המאפשרים זיהוי דגימות קל ככל האפשר. דברים שכדאי לשים לב אליהם כוללים:

אזורי כתיבה גדולים לרישום פרטים מספיקים כדי שניתן יהיה למצוא רשומות אם בקבוקון ממוקם במיקום שגוי - בדרך כלל זהות התא, תאריך ההקפאה וראשי התיבות של האדם האחראי מספיקים.

ברקודים לסיוע בניהול ומעקב אחר דגימות

כובעים צבעוניים

הערה לעתיד - מפותחים שבבים עמידים במיוחד לקור, אשר כאשר יותקנו בתוך קריו-בקבוקונים בודדים, יוכלו לאחסן היסטוריה תרמית מפורטת, כמו גם מידע מפורט על אצווה, תוצאות בדיקה ותיעוד איכות רלוונטי אחר.

בנוסף להתחשבות במפרטים השונים של הבקבוקונים הקיימים, יש להקדיש מחשבה גם לתהליך הטכני של אחסון בקבוקוני קריו בחנקן נוזלי.

טמפרטורת אחסון

ישנן מספר שיטות אחסון לאחסון קריוגני של דגימות, כל אחת פועלת בטמפרטורה ספציפית. האפשרויות והטמפרטורה בה הן פועלות כוללות:

שלב נוזלי LN2: שמירה על טמפרטורה של -196℃

שלב אדים LN2: מסוגלים לפעול בטווחי טמפרטורות ספציפיים בין -135°C ל- -190°C, בהתאם לדגם.

מקפיאי אדי חנקן: ‎-20°C עד ‎-150°C

סוג התאים המאוחסנים ושיטת האחסון המועדפת על החוקר יקבעו באיזו מבין שלוש האפשרויות הזמינות תשתמש המעבדה שלך.

עם זאת, עקב הטמפרטורות הנמוכות ביותר בהן נעשה שימוש, לא כל הצינורות או העיצובים יהיו מתאימים או בטוחים. חומרים יכולים להפוך שבירים ביותר בטמפרטורות נמוכות במיוחד, שימוש בבקבוקון שאינו מתאים לשימוש בטמפרטורה שבחרתם עלול לגרום לניפוץ או להיסדק הכלי במהלך האחסון או ההפשרה.

בדקו היטב את המלצות היצרן לגבי שימוש נכון, שכן חלק מהבקבוקונים הקריוגניים מתאימים לטמפרטורות נמוכות של -175°C, חלקן -150°C ואחרות רק 80°C.

כמו כן, ראוי לציין כי יצרנים רבים מצהירים כי בקבוקונים קריוגניים שלהם אינם מתאימים לטבילה בשלב הנוזלי. אם בקבוקונים אלה מאוחסנים בשלב הנוזלי בעת החזרתם לטמפרטורת החדר, בקבוקונים אלה או אטמי המכסה שלהם עלולים להתנפץ עקב הצטברות מהירה של לחץ הנגרמת על ידי דליפות קטנות.

אם יש לאחסן תאים בשלב הנוזלי של חנקן נוזלי, יש לשקול אחסון תאים בבקבוקונים קריוגניים מתאימים אטומים בחום בצינורות קריופלקס או אחסון תאים באמפולות זכוכית סגורות הרמטית.